酶抑制率法农药残留 速测设备性能 要求 Technical requirement for pesticide residue rapid detection equipment by enzyme inhibition rate method ICS 65.060.99 B 90 T/ZNZ 浙江省农产品质量安全学会团体标准 T/ZNZ 008—2019 2019-07-08发布 2019-08-10实施 浙江省 农产品质量安全学会 发布 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/ZNZ 008—2019 1 前 言 本标准按 GB/T 1 .1-2009给出的规则起草。 本标准由浙江省农产品质量安全学会 提出并归口管理。 本标准负责起草单位： 浙江省农业科学院 农产品质量标准研究所 。 本标准参加起草单位： 绿城农科检测技术有限公司、中科佑隆 (杭州)食安标准科技有限公司、厦门 海荭兴仪器股份有限公司 本标准主要起草人： 徐 浩、王 强、王新全、汪志威、叶雪珠、徐霞红、王祥云、齐沛沛、章 虎、 武爱波、杨德辉。 全国团体标准信息平台 2 酶抑制率法农药残留 速测设备性能 要求 1 范围 本标准规定了 基于酶抑制 率法农药残留 速测设备 的性能要求和测试方法 。 本标准适用 于基于酶抑制 率法农药残留速测设备的 性能测试和技术评价 。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 5009.199 蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测 JB/T 12020 多参数食品现场快速检测仪试剂盒（包）质量检测总则 JB/T 12967 有机磷和氨基甲酸酯农药残留快速检测仪 KJ201710 蔬菜中敌百虫、丙溴磷、灭多威、克百威、敌敌畏残留的快速检测 NY/T 448 蔬菜上有机磷和氨基甲酸酯类农药残毒快速 检测方法 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 农药残留 速测设备 pesticide residue rapid detection equipment 基于酶抑制 率法，针对有机磷和氨基甲酸酯农药残留进行检测，可以直接读出 抑制率结果的，包括 检测主机、配套药（试）剂和辅助设备的设备体系。 3.2 灵敏度 sensitivity 农药残留速测设备 对农药的响应敏感度，以对农药标准试液的最低检出质量浓度 和对实际样 品的最 低检出质量浓度来 表示。 3.3 仪器检出限 instrument detection limit 针对农药标准试液 ，农药残留速测设备 阳性检出的 最低质量浓度 ，以毫克每升 (mg/L)计。 3.4 样品检出限 sample detection limit 针对蔬菜 农药添加 样品，综合提取 、检测的全过程，农药残留速测设备 阳性检出的 最低质量浓度 ， 以毫克每千克（ mg/kg）计。 全国团体标准信息平台 T/ZNZ 008—2019 3 3.5 假阳性 false positive 对于未检出1有机磷和氨基甲酸酯 农药残留的蔬菜样 品，农药残留速测设备 检出结果 为阳性的情况。 假阳性有两个来源：一是源于蔬菜本身 的基质干扰， 引发酶抑制反应，造成 假阳性；二是源于农药残留 速测设备 过于敏感 ，造成假 阳性。本标准所指假阳性源于后者 ，作为一种技术指标对设备加以要求。 假 阳性以阴性样品中阳性检出的百分比，即 以假阳性率来表征。 3.6 假阴性 false negative 在实验条件下达到实际最低检出水平时， 农药残留速测设备 将阳性样品 检出阴性结果的情况。 假阴 性试验中的 阳性样品 应与设备的实际最低检出水平相关。 假阴性以阳性样品中阴性检出的百分比，即 以 假阴性率来表征。 3.7 符合率 Consistency rate 在农药残留速测设备 检出阳性的一组样品中，经色质谱法1验证，符合为 阳性结果的 百分比。 4 要求 4.1 灵敏度 应符合表 1的要求。 表1 灵敏度要求 项 目 仪器检出限 mg·L-1 样品检出限 mg·kg-1 敌敌畏 0.1 0.5 克百威 0.05 0.3 灭多威 0.1 0.5 4.2 假阳性和假阴性 应符合表 2的规定。 表2 假阳性、假阴性 要求 项 目 百分比 % 假阳性率 ≤15 假阴性率 ≤5 1 以GB 23200.113 、GB/T 20769 或相当的方法进行检测 全国团体标准信息平台 4 4.3 符合率 在检出阳性的30份以上样品中，经色 质谱法1验证，阳性结果的符合率应在 80%以上。 5 测试方法 按附录A执行。 全国团体标准信息平台 T/ZNZ 008—2019 5 附录A (规范性附录） 测试方法 A.1 试剂与材料 A.1.1 农药标准溶液：源于国家标准物质。 A.1.2 pH8.0缓冲溶液：分别取 11.9 g无水磷酸氢二钾与 3.2 g磷酸二氢钾，用 1000 mL蒸馏水溶解。 配制农药标准 试液时使用 。 A.1.3 试剂盒（包） ：符合JB/T 12020 -2014的规定。 A.1.4 测试中所用酶、显色剂、底物、缓冲溶液等试剂，均源于供试农药残留速测设备生产公司，并按 其提供的方法配制。 A.2 环境与设备 A.2.1 环境温度：室温在 15 ℃～35 ℃间。 A.2.2 相对湿度： 80 %以下。 A.2.3 电源：交流电 220 V ± 22 V，或设备自带的直流电源。 A.2.4 设备稳定性： 符合JB/T 12967 -2016中4.4的规定 A.2.5 农药残留速测设备 准备：按设备使用说明书规定。 A.3 测试步骤 A.3.1 仪器检出限 测试 由可溯源的农药标准 溶液，用缓冲溶液 (A1.2)分别稀释配制成敌敌畏、克百威、灭多威的不同浓度 的系列标准试液 （现配现用） ，试液浓度 如表A1所示。按供试农药残留速测设备 生产公司 提供的检测方 法进行操作 ，抑制率 结果为阳性的 最低试液浓度 为仪器检出限 。 表A1 农药系列标准试液质量浓度表 农药名 试液浓度 mg·L-1 Level 1 Level 2 Level 3 Level 4 Level 5 Level 6 Level 7 敌敌畏 0.01 0.02 0.05 0.1 0.2 0.4 0.8 克百威 0.005 0.01 0.02 0.05 0.1 0.2 0.4 灭多威 0.01 0.02 0.05 0.1 0.2 0.4 0.8 A.3.2 样品检出限测试 取豇豆样（未检出有机磷和氨基甲酸酯 农药残留 ），切成长度为5 mm~10 mm的小段，称取10 g于玻 璃盘（Φ90 mm玻璃培养皿 ）中，分别加 农药标准溶液 配成相应的蔬菜添加样本。加液总体积 3.0 mL， 不足以缓冲溶液 (A1.2)补足。轻轻摇动玻璃盘使其充分混合，静置 3 min。按供试农药残留速测设备 生 全国团体标准信息平台 6 产公司提供的检测方法进行操作 （提取溶液质量应不少于 称样量的5倍），记录抑制率结果。 抑制率结 果为阳性的 最低添加浓度为样品检出限。敌敌畏、克百威、 灭多威添加样按表A2浓度系列分别 加标配制。 表A2 蔬菜农药添加样 浓度表 农药名 蔬菜农药添加浓度 mg·kg-1 Level 1 Level 2 Level 3 Level 4 Level 5 敌敌畏 0.1 0.2 0.5 1.0 2.0 克百威 0.1 0.3 0.5 1.0 2.0 灭多威 0.1 0.2 0.5 1.0 2.0 A.3.3 假阳性测试 取结球甘蓝、菠菜、大白菜、黄瓜、豇豆 五种蔬菜（未检出有机磷和氨基甲酸酯 农药残留 ），按供 试农药残留速测设备 生产公司 提供的检测方法进行操作（ 提取溶液质量应不少于 称样量的5倍）。每种 菜重复检测 10次，记录抑制率结果。 抑制率结果为阳性的 百分比为假阳性率。 A.3.4 假阴性测试 以供试农药残留速测设备 生产公司 的实际样本检出限为依据，按 A.3.2方法制备阳性添加样。 按供 试农药残留速测设备 生产公司 提供的检测方法进行操作（ 提取溶液质量应不少于 称样量的5倍），每一 添加样，重复 检测10次，记录抑制率结果。 抑制率结果为阴性的百分比为假阴性率。 供试农药残留速测设备 生产公司的实际 样品检出限应达到本标准所要求的 样品检出限。 A.3.5 符合率测试 将农药残留速测设备 检出的阳性样品， 通过色质谱法 检测验证，计算符合为阳性结果的百分比。 备注：对于阳性添加样的浓度有质疑的可以用相关色质谱国标检测方法确证 。 _________________________________ 全国团体标准信息平台