TB 宁夏食品安全协会团体标准 T/NXFSA001—2019 枸杞中12种农药残留快速检测方法 胶体金免疫层析法 2019-07-17发布 2019-07-17实施 宁夏食品安全协会发布 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/NXFSA001—2019 I前  言 本标准是按照GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》给出的规则编写。 本标准由杞源堂（宁夏）生物科技有限公司提出，宁夏食品安全协会归口。 本标准主要起草单位：杞源堂（宁夏）生物科技有限公司、宁夏中农艾森检测有限公司、深圳市易瑞生 物技术股份有限公司、宁夏食品安全协会、宁夏食品检测研究院、宁夏食品质量监督检验二站、中宁县 枸杞产业发展服务局、宁夏百瑞源枸杞产业发展有限公司、宁夏红枸杞产业有限公司。 本标准主要起草人：余君伟、金虹、孟跃军、乔长晟、岳苑、伊倩茹、张慧玲、凌锡喆、付辉、刘 娟、严立宁、王文辉、张金宏、周学义、张美娟、曾楚怡、曹琛、马涛、严义勇、井辉隶、王炳志、沈 晗、朱嘉辉、严海霞、马莹、郭小瑞。 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/NXFSA001—2019 1枸杞中12种农药残留快速检测方法 胶体金免疫层析法 1范围 本标准规定了枸杞鲜果、干果中啶虫脒、吡虫啉、毒死蜱、多菌灵、氯氰菊酯、氯氟氰菊酯、氰戊 菊酯、苯醚甲环唑、克百威、哒螨灵、甲基对硫磷、炔螨特残留的胶体金免疫层析快速检测方法。 本标准适用于枸杞鲜果和干果中啶虫脒、吡虫啉、毒死蜱、多菌灵、氯氰菊酯、氯氟氰菊酯、氰戊 菊酯、苯醚甲环唑、克百威、哒螨灵、甲基对硫磷、炔螨特12种农药残留的快速检测。 2原理 应用胶体金竞争抑制免疫层析法的原理，样品中残留的待测物与检测线上的待测物抗原共同竞争胶 体金标记的特异性抗体，通过检测线与控制线颜色深浅比较，对样品中待测物进行定性半定量判定。 3试剂与材料 3.1胶体金免疫层析试剂盒 农药残留胶体金免疫层析检测试剂盒，含胶体金试纸条及配套试剂。 3.2提取液 3.2.1水溶性农药提取液：啶虫脒、吡虫啉、毒死蜱、多菌灵、克百威、哒螨灵、甲基对硫磷、炔螨特， 应用纯水或蒸馏水为提取液。 3.2.2不溶或难于水农药提取液：氯氰菊酯、氯氟氰菊酯、氰戊菊酯、苯醚甲环唑，应用体积比为1:1 水与无水乙醇（分析纯）混合液为提取液。 4仪器设备 4.1电子天平（感量0.1g）。 4.2温育器：40℃±2℃（可选）。 4.3便携式读数仪。测量波长：525nm。 4.4移液器：300µL。 5测定步骤 5.1样品前处理 选取代表性枸杞样品，称取20g±1.0g整粒样品，放入约120mL带盖容器中，加入提取液。 全国团体标准信息平台 Q/NXSPAQXH001—2019 2枸杞干果，直接加入80mL提取液；枸杞鲜果，应捣碎后加入80mL提取液。拧紧容器盖，充分震荡混匀 3min，再浸泡5min～10min后摇匀，用移液器移取上清液3-5ml至5mL离心管中，即为待测液。 5.2测定 5.2.1检测卡法测定 取出检测卡，水平放置，用吸管吸取一定量待测液，滴2～3滴到加样孔，滴加时须缓慢逐滴加入。 在滴加样品后应在5min～10min内读结果，10min后结果无效。 5.2.2试纸条与金标微孔（试剂瓶）法测定 吸取制备好的样品待测液9～10滴（约300μL）于含胶体金的微孔或试剂瓶中，并上下抽吸5～10 次混匀或摇晃试剂瓶6～8次充分溶解混匀。于20℃～40℃开始第一次温育2分钟；取出试纸筒中的试 纸条，将测试条插入微孔或试剂瓶中；于20℃～40℃开始第二次温育5分钟；从微孔或试剂瓶中取出 测试条，轻轻刮去测试条下端的吸水海绵，进行结果判读。. 6结果判读 6.1目视判定 6.1.1通过对比控制线（C线）和测试线（T线）的颜色深浅来进行结果判定。由于长时间放置会引起 测试线颜色的变化，应在5min内进行结果判读。 6.1.2首先查看控制线是否有颜色显现。如果不显色，检测无效，需另取测试条进行测试。 6.1.3控制线正常显色的情况下，按表1进行结果判断，示意图见图1。 表1结果判断依据 测试线（T线）与控制线（C线）颜色深浅比较结果判断 结果分析 T线颜色深于C线 阴性说明被测样品中未检出被测农药 T线颜色浅于C线或T线不显色 阳性说明检测样品中检出被测农药 注：“空白”系未滴加任何试剂的全新测试条图样。 全国团体标准信息平台 T/NXFSA001—2019 3图1目视判定示意图 6.2读数仪判定 6.2.1如果使用读数仪进行结果判断，应于反应完成5min内读取结果。 6.2.2应按照读数仪的使用说明书读数。 6.2.3阴性结果R≥1.0，阳性结果R＜1.0。计算方式：峰面积分析，计算检测线峰面积/控制线峰面积 比值。 7检出限 检出限应符合表2规定。 表2胶体金免疫层析检测方法检出限 检测农药名称 检出限（mg/kg） 检测农药名称 检出限（mg/kg） 啶虫脒 2.0 吡虫啉 1.0 毒死蜱 0.1 多菌灵 1.0 氯氰菊酯 2.0 氯氟氰菊酯 0.2 氰戊菊酯 0.2 苯醚甲环唑 0.1 克百威 0.02 哒螨灵 0.5 甲基对硫磷 0.02 炔螨特 3.0 8确证实验 如被测样品中试纸条检测结果为阳性时，应采用国标方法进行确证检测。 9其它 本方法的测定步骤和结果判读也可以根据厂家试剂盒的说明书进行。 全国团体标准信息平台