ICS 67.050 SN CCS C 53 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T5439.2—2022 出口食品中食源性致病菌快速检测方法 PCR-试纸条法 第2部分金黄色葡萄球菌 Rapid detection of foodborne pathogens from exported food by PCR-Lateral flow dipstick method -Part 2:Staphylococcus aureus 2022-03-14发布 2022-10-01实施 中华人民共和国海关总署 发布 SN/T 5439.2—2022 前言 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件是SN/T5439的第2部分。SN/T5439发布了以下部分： 第1部分：沙门氏菌； 第2部分：金黄色葡萄球菌； 第3部分：副溶血性弧菌； 第4部分：克罗诺杆菌； 第5部分：产志贺毒素大肠埃希氏菌及大肠埃希氏菌0157； 第6部分：空肠弯曲菌； 第7部分：单核细胞增生李斯特氏菌 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。 本文件起草单位：中华人民共和国南京海关、南京农业大学、中华人民共和国上海海关、合肥工业大 学、苏州蝌蚪生物技术有限公司、广东省科学院微生物研究所、广东环凯生物科技有限公司、中华人民共 和国合肥海关、江苏苏测检测认证有限公司、杭州傲敏生物科技有限公司。 本文件主要起草人：薛峰、曾德新、胡同静、蒋原、陈伟、吴诗、张友雄、万强、戴建君、余晓峰、苏静、 陆寿祥、申进玲、汤芳。 SN/T 5439.2—2022 出口食品中食源性致病菌快速检测方法 PCR-试纸条法第2部分：金黄色葡萄球菌 1范围 本文件规定了出口食品中食源性致病菌-金黄色葡萄球菌快速检测的PCR-试纸条方法。 本文件适用于出口食品中金黄色葡萄球菌的定性检测。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅 该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T27403—2008实验室质量控制规范食品分子生物学检测 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 金黄色葡萄球菌Staphylococcusaureu 其是一种耐高盐的革兰氏阳性菌，球形菌，在培养基中菌落特征表现为圆形，菌落表面光滑，颜色为 无色或者金黄色，无扩展生长特点，将金黄色葡萄球菌培养在哥伦比亚血平板中，在光下观察菌落会发 现周围产生了透明的溶血圈，属于葡萄球菌属，是一种常见的病原菌。 4缩略语 下列缩略语适用于本文件。 DNA：脱氧核糖核酸（deoxyribonuleicacid) dNTP：脱氧核苷酸三磷酸（deoxyribonuleosidetriphosphate） EDTA：乙二胺四乙酸(ethylene diaminetetraacetic acid) FITC：异硫氰酸盐（fluorescein5-isothiocyanate） Vi 5方法原理 对样品中金黄色葡萄球菌进行增菌培养后提取DNA，采用上游和下游引物分别经地高辛和异硫氰 酸盐标记的金黄色葡萄球菌的特异性检测引物进行PCR扩增。检测用试纸条上含有金标记的抗异硫 氰酸盐的抗体，可与PCR产物上的异硫氰酸盐标记分子结合，在检测线位置上有抗地高辛抗体，可与 PCR产物上的地高辛标记分子结合，从而显色。如模板未扩增，则无PCR产物与地高辛抗体及FITC 抗体结合，从而不能在检测线（T线）位置显示颜色。 1