ICS 11.040.40 C 35 T/ CSBM 团体 标准 T/CSBM 0016—2021 镍钛形状记忆合金骨植入物镍离子释放 的体外测试方法 In vitro testing method for nickel ion release of nickel -titanium shape memory alloy bone implant 2021 - 04 - 26发布 2021 - 10 - 01实施 中国生物材料学会 发布 T/CSBM 0016—2021 I 目次 前言 ................................................................................. II 1 范围 ............................................................................... 1 2 规范性引用文件 ..................................................................... 1 3 术语和定义 ......................................................................... 1 4 方法原理 ........................................................................... 1 5 试剂 ............................................................................... 1 6 仪器 ............................................................................... 2 7 试样 ............................................................................... 2 8 分析步骤 ........................................................................... 3 9 结果计算 ........................................................................... 4 10 试验报告 .......................................................................... 4 附录A（资料性） 试样的制备 ........................................................... 6 参考文献 .............................................................................. 8 T/CSBM 0016—2021 II 前言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由中国生物材料学会 提出。 本文件由中国生物材料学会团体标准化技术委员会归口。 本文件起草单位： 兰州西脉记忆合金股份有限公司、甘肃省医疗器械检验检测所、 江阴佩尔科技有 限公司、上海昕昌记忆合金科技有限公司、国标（北京）检验认证有限公司、有研医疗器械（北京）有 限公司、中国食品药品检定研究院。 本文件主要起草人：郑亚亚、杨艳丽、杨英、闫鹏伟、罗万东、杨晓凤、吴俊、朱家珍、张文梅、 宋丽霞、陈庆福、朱毅俊、张凯、马悦辉、李景元、缪祥文、袁志山、李君涛、汤京龙、宋可婧 。 本文件首次发布。 T/CSBM 0016—2021 1 镍钛形状记忆合金骨植入物镍离子释放的体外测试方法 1 范围 本文件规定了镍钛形状记忆合金骨植入物镍离子释放的体外测试方法的 术语和定义、方法原理、试 剂、仪器、试样、分析步骤、结果计算、试验报告 。 本文件适用于镍钛形状记忆合金骨植入物镍离子释放的体外测试。 2 规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件。 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 测试溶液 Test solution 依照8.1制备的溶液。 试样 Sample 试样与骨植入物具有同材料且为同一批号，相同的生产工艺。试样的结构详见附录 A。 试样测试面积 Sample test area 浸入测试溶液试样的面积。 镍释放量 Nickel release 浸入测试溶液的试样在特定环境下存放一定时间后，测定测试溶液中的含镍量用每平方厘米每天 的微克数[ μg/(cm2·d)]表示。 4 方法原理 随时间推移测试从器械中释放出来的镍离子，得到不同浸提时间的镍离子释放量，试验将采用对同 一器械进行多次浸提的方式。首先，将器械放置于一个合适的容器中，容器中装有测试溶液，在温度范 围（37±1）℃内进行浸提。到达规定的时间（8.4 ）后，取出全部浸提液，再注入新溶液继续浸提，重 复上述过程， 直至完成所有设置时间点的浸提。 测试溶液中镍离子浓度可用石墨炉原子吸收光谱仪 （ AAS）、 电感耦合等离子体发射光谱仪(ICP-OES)或电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)或其他适当的分析方法测定。 相应设置时间点镍释放量的单位为微克 /平方厘米· 每天[μg/(cm 2·d)]。 所有时间点取出的浸提液， 应尽快测试其镍离子浓度。 5 试剂 T/CSBM 0016—2021 2 一般要求 分析中宜使用符合国家标准的分析纯试剂、蒸馏水 /去离子水或相当纯度的水。使用其他试剂应能 提供合理性说明。试剂见表1。 表1 试剂名称 试剂名称 备注 去离子水 若干 氯化钠 8.0 g 氯化钾 0.2 g 磷酸二氢纳 0.2 g 磷酸氢二钠（Na 2HP04·12H 20） 2.9 g 浓盐酸 密度ρ=1.179 g/mL 氢氧化钠 按需要配制 硝酸 质量分数为65%，密度ρ =1.40 g/mL 稀硝酸 质量分数约为5% 稀硝酸 将硝酸15 mL移入预先装有去离子水 100 mL的500 mL烧杯中，搅拌并冷却至室温。将溶液移入 250 mL容量瓶中，用去离子水稀释至刻度，混匀。 6 仪器 分析光谱仪 分析仪器灵敏度应达到μ g/L或更高，推荐使用石墨炉原子吸收光谱仪（ AAS）、电感耦合等离子体 发射光谱仪 (ICP-OES)或电感耦合等离子体质谱仪 (ICP-MS)或其他适当的分析方法测定。 灭菌方式采用高温高压灭菌器或其他适宜灭菌方式 高温高压灭菌器必须通过灭菌确认，灭菌设备应处于良好的工作状态。 温控的水浴或恒温培养箱 控温能力为（37 ±1）℃。 带盖的容器 6.4.1 容器和盖均以不含镍且耐酸的非金属材料（如：玻璃、聚丙烯、聚四氟乙烯、聚苯乙烯等）制 成。试样用非金属材料制成鱼线悬吊于磷酸盐缓冲盐溶液（PBS ）中，以免 试样测试面积（7.1.1）接触 容器的底部或壁。容器的形状和大小的选择，应使所用磷酸盐缓冲盐溶液（ PBS）能全部覆盖试样。 6.4.2 为了消除容器和鱼线中镍的干扰，容器和鱼线浸入稀硝酸贮存 24 h以上进行预处理。预处理以 后，以去离子水冲洗并干燥。 7 试样 试样测试面积 T/CSBM 0016—2021 3 7.1.1 试样测试面积的定义 本文件中将试样的表面积定义为“试样测试面积”，单位为平方厘米（ cm2）。 7.1.2 试样的确定 用于体外镍离子释放分析首选对终产品进行测试，若产品无法测试则选择试样，且试样与产品表面 积具有等效性，具有表征意义的试样。 试样的清洗 试样与终产品的清洗方法保持一致。 注： 这一清洗步骤，去除了试样表面可能存在的镍污染，避免了影响试样的镍释放。 试样的制备 用测定试样（见附录 A）的镍释放量进行质量监控。 8 分析步骤 准备测试溶液 8.1.1 磷酸盐缓冲盐溶液（ PBS）的制备 为维持溶液 pH值的稳定， 本文件中采用磷酸盐缓冲盐溶液 （PBS ）作为模拟生理溶液，其浓度为 0.01 mol/L，pH为7.4。 按 《中国药典》 2020年版四部 3303鼠源性病毒检查法中给出一种磷酸盐缓冲盐溶液 （PBS ） 的方法进行配制。配制后进行高温高压或其他适宜灭菌方式灭菌， 磷酸盐缓冲盐溶液（ PBS）灭菌之后， 4℃冰箱密封保存备用。 8.1.2 浸提比例 浸提液体积和样品表面积比要足够大，同时又要保持检测灵敏度。推荐的样品表面积/浸提液体积 比为（0.1～1） cm2/mL。计算所需浸提液体积时，需考虑镍离子的检出限、溶解度极限，且浸提液能完 全浸没样品，有足够的浸提液用于测试。 8.1.3 浸提容器及辅助工具准备 测试开始前，需清洁容器及其他辅助工具，尽量减少容器和其它所有直接接