ICS 65.020.01 CCS A 014 T/NAIA 团 体 标 准 T/NAIA 0427—2025 番茄快繁体系技术规程 Technical specification for the tomato rapid propagation system 2025-10-22 发布 2025-10-31 实施 宁夏化学分析测试协会 发 布 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/ NAIA 0427—2025 I 前 言 本文件按照 GB/T 1.1-2020 《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规 则》的规定起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由宁夏化学分析测试协会提出并归口。 本文件起草单位：宁夏大学、银川市农业技术推广服务中心。 本文件主要起草人 ：张雪艳、李浩、王欣怡、曹行行、李邦耀、张晶晶、谢明学、杨玲。 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/ NAIA 0427—2025 1番茄快繁体系技术规程 1　范围 本文件规定了番茄快繁体系种子预处理 、无菌苗培养 、愈伤组织诱导 、不定芽诱导 、继 代增殖、生根培养及炼苗驯化等关键技术流程与操作规范。 本文件适用于宁夏地区设施条件下番茄品种的组织培养快繁与脱毒种苗生产。 2　规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注日期的引用文件 ，仅注日期的版本适 用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件 。 GB 16715.3-2010 瓜菜作物种子 　茄果类 NY/T 2118-2012 蔬菜育苗基质 NY/T 2236-2012 植物组培苗工厂化生产技术规程 NY/T 5010-2016 无公害农产品 种植业产地环境条件 3　术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 番茄快繁体系 以番茄为材料，利用植物组织培养技术，在无菌条件下，通过培养基选择、种子脱毒 、 愈伤诱导 、不定芽诱导 、继代增殖 、生根培养及炼苗驯化等环节 ，实现番茄健康种苗高效扩 繁的技术体系 。该体系具备脱毒彻底 、周期短、增殖快、成苗一致性强等特点 ，适用于设施 农业、育种及大规模苗木供应。 3.2 愈伤组织诱导 在适宜的培养基和植物激素条件下 ，诱导番茄茎尖或胚轴等组织形成愈伤组织 ，为后续 不定芽诱导及苗木快繁提供基础材料。 3.3 不定芽诱导 通过调控外源激素浓度 ，使愈伤组织中的潜在细胞重新启动分裂过程 ，形成具有再生能 力的不定芽簇。 3.4 继代培养 在组培过程中 ，将已形成的不定芽或苗按一定节段切取后 ，转接至培养基中继续生长或 繁殖的过程。 3.5 炼苗驯化 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0427-2025 2将组培苗移出无菌环境 ，逐步适应外界自然条件的过渡过程 。包括瓶口开启 、去除培养 基残留、移栽至基质盆栽和控制温湿光等措施 ，促进组培苗根系发育与功能恢复 ，提高田间 移栽的成活率和适应性。 4　场地环境条件 组培快繁条件应符合 NY/T 2236-2012 要求；炼苗移栽驯化环境应符合 NY/T 5010-2016 要 求。 5　生产技术管理 5.1品种选择 选用来源合法、知识产权清晰且允许进行商业化组织培养快繁的番茄品种。 5.2无菌系的建立 5.2.2培养基的选择 5.2.2. 1纱布培养基 依据组培瓶内径裁剪无菌脱脂纱布 ，叠取三层浸入无菌蒸馏水充分润湿后 ，平整铺设于 瓶底。密封 瓶口后于高压蒸汽灭菌锅内 121℃灭菌 20-30分钟。 5.2.2. 2基质培养基 采用符合 NY/T 2118 -2012要求的基质，将消毒的基质均匀平铺于组培瓶底部， 深度为 1.5-3.0 cm。然后用无菌蒸馏水沿瓶壁缓慢添加至基质完全湿润（ 持水量约 60-70%），密封 瓶口后置于高压蒸汽灭菌锅内 121℃灭菌 20-30分钟。 5.2.2.3 MS培养基 将配制好的 MS培养基分装至组培瓶中 ，厚度为 1.0-2.0 cm。密封瓶口后置于高 压蒸汽灭菌锅内 121℃灭菌 20-30分钟。 5.2.3 外植体选择 挑选优良饱满番茄种子 ，种子质量需符合 GB16715.3 -2010标准，纯度不低于 96%，净 度不低于 98%，发芽率不低于 85%，水分不高于 7%。 5.2.4外植体消毒 番茄种子在 洗洁精溶液中搅拌 10-15min ，无菌水冲洗 3-5遍， 55℃温汤浸种 30分钟。 在超净工作台内用滤纸吸干种子表面水分。 然后用 75%酒精处理 30-60 s，无菌水冲洗 2-3 次，再用次氯酸钠溶液 浸泡 6-15 min或过氧化氢溶液 浸泡 8-18min或氯化汞溶液 浸泡 2-5min, 无菌水冲洗 5-6 次，将种子接种至培养瓶内 ，数量由组培瓶容量决定 ，种子间距 1 cm 以上。 5.2.5无菌苗培养 将接种种子的组培瓶置于组培室 ，条件为昼温 25-28℃，光照周期 12-16小时，光照强度 3000-5000lux ；夜温 16-20℃。空气相对湿度 60%-80% 。 全国团体标准信息平台 T/ NAIA 0427—2025 35.2.6愈伤组织诱导 待无菌苗生长至 6-8cm，选取健壮幼苗 ，在超净工作台内剥离 直径 0.3-0.5 mm的茎尖分 生组织（ 含1-2个叶原基）， 接种 MS培养基 +6-BA（1.5-2.5mg/L ）+IBA（0.20-0.3mg/L ） 中进行愈伤诱导， 间距 2 cm以上。置于温度 18-25℃、湿度 60-70%、光照强度 2000-3000 lux、每日光照 12-16小时的条件下。 5.2.7不定芽诱导 将诱导产生的黄绿色 、结构致密且带有可见芽点的愈伤组织 ，小心分割成约 0.5-1.0 cm ³ 的小块（ 确保每块至少带有 1个健壮芽点，避免损伤芽体）。 接种至 MS培养基 +6-BA （2.0-3mg/L ）+NAA（0.05-0.15mg/L ）进行培养， 愈伤组织间距 2 cm以上。置于温度 18-25 ℃、湿度 60-70%、光照强度 2000-3000 lux、每日光照 12-16小时的条件下。 5.2.8继代培养 将初代培养获得的无菌苗， 在超净工作台中修剪成带 1个健壮腋芽的茎段（ 长度约 1.0-2.5 cm）。接种于 MS+IBA（0.05-0.15mg/L ）中进行继代培养。待腋芽萌发并发育成高 约7-10 cm、具5-6片展开叶的健壮组培苗后，重新截取带腋芽茎段作为外植体，转接至同 一配方培养基中进行增殖扩繁。每培养瓶（ Φ90×100 mm）接种 5个茎段，呈五边形对称分 布，确保腋芽朝向光源且不与培养基表面接触。 5.3炼苗驯化 5.3.1 场地准备与环境消毒 炼苗场地应符合 NY/T 5010-201 6中的环境要求。炼苗驯化前，对场地的墙壁、地面、 操作台及育苗器具进行清洁和消毒， 使用 500-1000 mg/L的次氯酸钠溶液或 0.1%高锰酸钾 溶液进行喷洒或擦拭处理， 闷蒸 2-6 h，再充分通风晾干。 5.3.2 炼苗移栽驯化 炼苗过程中应逐步延长瓶口开启时间 ，使组培苗从瓶内无菌 、高湿、弱光环境平稳过渡 到外界常规条件， 驯化时间一般为 2–3 d，以减少环境突变造成番茄苗萎蔫甚至死亡；移栽 前应用无菌水轻柔冲洗根系 ，彻底去除残留琼脂培养基 ，并将根系浸蘸 0.01%-0.05% 的吲哚 丁酸（IBA）或萘乙酸 （NAA）溶液，以促进新根形成和提高移栽成活率 。移栽时选用草炭 、 蛭石、珍珠岩配比为 3:1:1的基质，并在移栽后喷施 500-800 mg/L的多菌灵溶液 。并用组培 罩或透明育苗罩覆盖维持较高湿度 ，2-3 d后去除组培罩或透明育苗罩 ，同时架设 50%-75% 遮光率的遮阳网调控光照 ，环境条件控制在温度 18-25 ℃、相对湿度 75%-90% 、光照强度 1000-2000 lx（以散射光为主），避免强光直射及气流直吹， 时间为 3-5 d。 5.3.3驯化环境调控 在移栽后苗木逐渐恢复和生长过程中 ，应动态调控温度 、光照、湿度及通风条件 。温度 保持在 18-25 ℃，昼夜温差 5-8 ℃，夏季高温时应采取遮阳和喷雾降温，冬季低温时适度 加温保温 。移栽早期光照 保持 1000-2000 lux的散射光 ，待植株恢复后逐步提高至 3000-5000 lux，并保持日照时长 12-16 h，以促进光合积累 。早期湿度 保持 75%-90% ，中后期逐步降至 65%-75% ，避免长期高湿引发病害。