ICS 65.020.01 CCS A 015 T/NAIA 团 体 标 准 T/NAIA 0426—2025 草莓茎尖脱毒快繁体系技术规程 Technical protocol for virus-free rapid propagation of strawberry using apical meristems 2025-10-22 发布 2025-10-31 实施 宁夏化学分析测试协会 发 布 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/ NAIA 0426—2025 I 前 言 本文件按照 GB/T 1.1-2020 《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规 则》的规定起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由宁夏化学分析测试协会提出并归口。 本文件起草单位：宁夏大学、银川市农业技术推广服务中心。 本文件主要起草人 ：张雪艳、李浩、王欣怡、曹行行、李邦耀、张晶晶、谢明学、杨玲。 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/ NAIA 0426—2025 1草莓茎尖脱毒快繁体系技术规程 1　范围 本文件规定了草莓茎尖脱毒快繁的关键技术内容 ，包括外植体材料选择与消毒处理 、愈 伤组织诱导 、不定芽分化与继代增殖 、生根诱导及炼苗驯化等操作流程 ，明确了各阶段培养 基组分与激素配比，构建了草莓脱毒苗快速繁育的标准化技术体系。 本文件适用于宁夏地区设施条件下草莓品种的脱毒种苗生产。 2　规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注日期的引用文件 ，仅注日期的版本适 用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件 。 NY/T 2118-2012 蔬菜育苗基质 NY/T 2236-2012 植物组培苗工厂化生产技术规程 NY/T 5010-2016 无公害农产品 种植业产地环境条件 T/DGSS 001-2016 草莓脱毒种苗生产技术规程 T/LWCM 2-2017 无公害食品草莓育苗技术规程 3　术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 茎尖脱毒 利用草莓茎尖生长点中病毒含量极低的特点 ，通过无菌条件下切取茎尖并进行组织培养 ， 以去除病毒污染、获得健康无毒植株的技术手段。 3.2 无菌快繁 在严格无菌环境下 ，通过对外植体进行消毒 、愈伤组织诱导 、不定芽增殖及生根培养等 步骤，实现草莓种苗快速、高效繁育的一种组织培养方法。 4 场地环境条件 组培快繁条件应符合 NY/T 2236-2012 要求；炼苗移栽驯化环境应符合 NY/T 5010-2016 要求。 5 生产技术管理 5.1外植体选择 选择健康、无病虫害、生长旺盛的母株新发生的草莓匍匐茎。 5.2无菌系的建立 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0426-2025 25.2.1外植体消毒 选取生长健壮、无可见病虫害的匍匐茎，剪除末端保留 顶端约 2-5 cm，将处理好的匍 匐茎用洗洁精溶液浸泡并搅拌 15分钟，然后用无菌水冲洗 3-5次后移入超净工作台中。先 用浓度为 75%的乙醇溶液浸泡处理 30-60 s，无菌水冲洗 3-4次，然后分别使用 0.1%升汞处 理4-7分钟或 10%过氧化氢处理 10-15分钟或10%次氯酸钠处理 8-12分钟。再用无菌水冲 洗4-5次，然后用无菌吸水纸吸干匍匐茎表面水分， 用解剖刀切取茎尖生长点 0.2-0.5mm ， 将生长点接种至组培瓶内，数量由组培瓶容量决定，茎尖 间距 1 cm以上。 5..2.2愈伤组织诱导 将茎尖剥离 出的生长点接种在 MS培养基 +6-BA（1.0-1.5mg/L ）+NAA（0.10-0.2 mg/L） 中进行愈伤诱导，数量由组培瓶容量决定，茎尖 间距 1 cm以上。置于 温度 18-25℃、湿度 60-70%、光照强度 2000-3000 lux、每日光照 12-16小时的条件下。 5.2.3丛芽诱导诱导 将诱导出的愈伤组织接种在 MS培养基 +6-BA（1.5-2 mg/L）+NAA（0.15-0.2 mg/L）进 行丛芽诱导，数量由组培瓶容量决定，愈伤组织 间距 2 cm以上。置于 温度 18-25℃、湿度 60-70%、光照强度 2000-3000 lux、每日光照 12-16小时的条件下。 5.2.4增殖继代诱导 将诱导出的、带有多丛生芽的黄绿色愈伤组织，小心分割成约 0.5-1.0 cm³ 的小块（确 保每块至少带有 1个健壮芽点，避免损伤芽体）。 种在 MS培养基 +6-BA(0.75 -1mg/L)+NAA(0.1-0.15 mg/L)进行增殖培养 ，数量由组培瓶容量决定 ，间距 2 cm以上。置于 温度 18-25℃、湿度 60-70%、光照强度 2000-3000 lux、每日光照 12-16小时的条件下。 5.2.5生根诱导 选取增殖培养后生长健壮、 高约 2-3 cm的丛生芽，用解剖刀从其基部切下，获得单株 丛生芽。 接种在 1/2 MS培养基 +（0.05-0.15 mg/L）IBA进行生根诱导，数量由组培瓶容量 决定，间距 2 cm以上。置于温度 18-25℃、湿度 60-80%、光照强度 2000-3000 lux、每日光 照12-16小时的条件下。 5.3炼苗驯化 5.3.1 场地准备与环境消毒 炼苗场地应符合 标准 T/LWCM 2-2017中的环境要求 。炼苗驯化前 ，对场地的墙壁 、地 面、操作台及育苗器具进行清洁和消毒， 使用 500-1000 mg/L的次氯酸钠溶液或 0.1%高锰 酸钾溶液进行喷洒或擦拭处理， 闷蒸 2-6 h，再充分通风晾干。 5.3.2 炼苗移栽驯化 炼苗过程中应逐步延长瓶口开启时间 ，使组培苗从瓶内无菌 、高湿、弱光环境平稳过渡 到外界常规条件， 驯化时间一般为 2–3 d，以减少环境突变造成草莓苗萎蔫甚至死亡；移栽 前应用无菌水轻柔冲洗根系 ，彻底去除残留琼脂培养基 ，并将根系浸蘸 0.01%-0.05% 的吲哚 丁酸（IBA）或萘乙酸 （NAA）溶液，以促进新根形成和提高移栽成活率 。移栽时选用草炭 、 蛭石、珍珠岩配比为 3:1:1的基质（ 应符合 NY/T 2118 -2012基质标准）， 并在移栽后喷施 500-800 mg/L的多菌灵溶液。并用组培罩或透明育苗罩覆盖维持较高湿度， 2-3 d后去除组 培罩或透明育苗罩，同时 架设 50%-75% 遮光率的遮阳网调控光照， 环境条件控制在温度 18-25 ℃、相对湿度 75%-90% 、光照强度 1000-2000 lx（以散射光为主），避免强光直射及 全国团体标准信息平台 T/ NAIA 0426—2025 3气流直吹， 时间为 3-5 d。成活的草莓应符合 标准 T/DGSS 001-2016 中的苗木质量。 5.3.3驯化环境调控 在移栽后苗木逐渐恢复和生长过程中 ，应动态调控温度 、光照、湿度及通风条件 。温度 保持在 18-25 ℃，昼夜温差 5-8 ℃，夏季高温时应采取遮阳和喷雾降温，冬季低温时适度 加温保温 。移栽早期光照 保持 1000-2000 lux的散射光 ，待植株恢复后逐步提高至 3000-5000 lux，并保持日照时长 12-16 h，以促进光合积累 。早期湿度 保持 75%-90% ，中后期逐步降至 65%-75% ，避免长期高湿引发病害。通风管理应循序渐进，前期少量通风，后期增加频率 ， 以提升苗木抗逆性。基质水分保持湿润但不积水（ 含水量 50%-70% ，即手握成团、触之即 散），同时可以 适量补充缓释肥或叶面喷施低浓度磷酸二氢钾 （0.1%-0.2% ）每7-10 d一次， 以增强植株营养和抗逆能力。 5.3.4 病害调控 病害防控应严格遵循“预防为主、综合治理”的原则。炼苗前应对基质进行彻底消毒 ， 并使用清洁水源进行灌溉 ，从源头阻断病原物传播 。对于灰霉病 、叶斑病、根腐病等常见病 害，需优先通过环境调控（如控制湿度、加强通风）降低发病风险；必要时可选用多菌灵 、 百菌清或嘧菌酯等药剂进行防治 ，并注意轮换使用以延缓抗药性产生 。根腐病可在基质中预 混甲基托布津或福美双进行预防 ，发病后可采用甲霜灵溶液灌根 。病毒病防控应严格执行脱 毒苗与常规苗的物理隔离，严禁混栽及交叉操作，并定期开展病害监测。 6 草莓茎尖脱毒无菌快繁体系常见问题及应对措施 草莓茎尖脱毒无菌快繁体系常见问题及应对措施见附录 A。 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0426-2025 4 附　录　A （规范性） 草莓茎尖脱毒无菌快