ICS 11.220 CCS B 41 团体标准 T/CVMA 310—2025 伴侣动物 A型流感病毒主动监测技术规范 Technical specifications for active surveillance of influenza A virus in companion animals 2025 - 10 - 28发布 2025 - 10 - 28实施 中国兽医协会 发布 中国兽医协会 CVMA 全国团体标准信息平台 中国兽医协会 CVMA全国团体标准信息平台 T/CVMA 310—2025 I 前 言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由 中国医学科学院病原生物学研究所提出 。 本文件由 中国兽医协会 归口。 本文件起草单位： 中国医学科学院病原生物学研究所、中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所、 上海市动物疫病预防控制中心、中国农业大学、华中农业大学、中国人民解放军南部战区疾病预防控制 中心、青岛农业大学。 本文件主要起草人： 舒跃龙、周杨子、王大燕、赵洪进、孙怡朋、周洪波、严华成、张传美、李希 妍、陈志肖。 中国兽医协会 CVMA 全国团体标准信息平台 中国兽医协会 CVMA全国团体标准信息平台 T/CVMA 310—2025 1 伴侣动物 A型流感主动监测技术规范 1 范围 本文件规定了伴侣动物 A型流感病毒主动监测技术规范的监测目的、 监测点设置、 监测对象和频率、 检测步骤和废弃物处理等技术要求。 本文件适用于宠物诊疗、宠物经营、宠物繁育、流浪动物收容和救助等场所的伴侣动物 A型流感病 毒主动监测。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 27539 动物流感检测 A型流感病毒通用荧光 RT-PCR检测方法 NY/T 541 兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 主动监测 active surveillance 主动、系统性地收集和分析生物样本，以期早期发现、追踪和评估病原体在群体中的传播情况和潜 在威胁的一种监测策略。 3.2 伴侣动物 companion animals 与人类共同生活，给人们提供陪伴和娱乐的动物，以犬、猫为主。 4 缩略语 下列缩略语适用于本文件。 cDNA：互补脱氧核糖核酸 （complementary DNA ） PCR：聚合酶链式反应（ Polymerase Chain Reaction ） RNA：核糖核酸（ Ribonucleic Acid ） VTM：病毒载液（ Virus Transport Media） 中国兽医协会 CVMA 全国团体标准信息平台 T/CVMA 310—2025 2 5 监测目的 5.1 监测国内伴侣动物 A型流感病毒活动水平和流行趋势； 5.2 为伴侣动物 A型流感病毒感染、变异情况及向人类溢出风险评估提供本底数据 。 6 监测点设置 6.1 监测点宜选择伴侣动物聚集区域，如宠物诊疗场所、宠物经营场所、宠物繁育场所、流浪动物收 容和救助场所等。 6.2 如场点或区域符合以下情况之一的，可考虑设置为监测点： ——三年内曾经发生过较大规模伴侣动物相关 A型流感病毒疫情的区域； ——长期使用未熟制的禽肉或禽类动物产品作为饲料的宠物繁育场所； ——处于候鸟栖息地或候鸟迁徙路线的区域； ——伴侣动物饲养密度或诊疗密度较大的区域。 7 监测对象和频率 7.1 监测对象 监测点内的伴侣动物，有明显呼吸道症状的为监测重点。 7.2 监测频率 春季和冬季每月监测一次，其它季节每两个月监测一次。 8 样品采集与实验室检测 8.1 样品采集 8.1.1 主要采集监测对象的咽拭子。若监测对象有明显呼吸道症状的则加采鼻拭子，有明显腹泻症状 的则加采肛拭子或粪便；鸟类则加采肛拭子或粪便。 8.1.2 按照 NY/T 541 要求进行样本的采集、保存和运输，样品保存液配制方法见附录 A。 8.1.3 采样人员在采样过程中 须做好生物安全防护。 8.2 信息收集 记录监测对象、监测点的基本信息，填写附录 B中的采样信息表。样本采集管上标记编号应与采样 信息表中样本编号一一对应，确保采样信息准确。 8.3 实验室检测 8.3.1 实验室条件及生物安全操作要求 样品检测工作应在生物安全二级实验室进行。检测前样品处理应在 BSL-II级生物安全柜中操作，处 理过程应符合 相关生物安全规定。 中国兽医协会 CVMA 全国团体标准信息平台 T/CVMA 310—2025 3 8.3.2 检测方法 使用实时荧光 RT-PCR方法进行 A型流感病毒检测。 检测可使用商品化试剂盒， 也可参照 GB/T 27539 或附录 C自行合成实时荧光定量 RT-PCR所需的引物探针并配制反应体系 进行检测 。 采用测序方法确认核酸阳性样本中 A型流感病毒亚型。测序可使用商品化试剂盒，也可参照附录 D 自行合成 RT-PCR所需的引物并配制反应体系。 8.4 结果记录及报告 检测结束后，及时将样品检测和测序结果等相关信息进行记录，填写附录 E中的结果记录单。 若检测到高致病性 A型流感病毒，应及时将采样信息和检测结果上报有关部门。 9 废弃物处理 采样和检测过程中产生的医疗废弃物按照相关规定进行无害化处理。 中国兽医协会 CVMA 全国团体标准信息平台 T/CVMA 310—2025 4 附 录 A （资料性） VTM的配制 A.1 准备两个 1 L容积可高压的玻璃瓶，纯水洗净后，分别加入 100 mL去核酸试剂和去核酸酶试剂， 平放于摇床上，常温、 200 r/min摇晃 1 h。 A.2 取出玻璃瓶，倒出去核酸试剂和去核酸酶试剂后用 DEPC水洗三次，高压灭菌玻璃瓶。 A.3 将高压灭菌的玻璃瓶置于生物安全柜或超净台中，紫外光照射 1 h。 A.4 配置 1 L VTM ：于玻璃瓶 1中加入 800 mL pH 7.4 的Hank’s平衡液、 10 g BSA 、15 mg两性霉 素、 100000单位青霉素 G和50 mg链霉素，磁力搅拌器混匀。完全溶解后加入 pH7.4的Hank’s平衡液定 容至 1 L。 A.5 将玻璃瓶 1中液体通过 0.40μ m过滤器过滤进入玻璃瓶 2。 A.6 将过滤后的 VTM分装至 2 mL冻存管中，每管 1 mL，分装完成后将 VTM置于 4 ℃避光保存。 中国兽医协会 CVMA 全国团体标准信息平台