团 体 标 准 ICS 13.020 CCS Y 28 T/CI 582—2024 基于卤虫无节幼体的纳米塑料水生 毒性测定方法 Determination of aquatic toxicity of nanoplastics based on Artemia spp. 2024 ⁃12⁃24 发布 2024 ⁃12⁃24 实施 中国国际科技促进会 　发 布 中 国 标 准 出 版 社 　出 版 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/CI 582—2024 目 次 前言………………………………………………………………………………………………………… Ⅲ 1　范围……………………………………………………………………………………………………… 1 2　规范性引用文件 ………………………………………………………………………………………… 1 3　术语和定义 ……………………………………………………………………………………………… 1 4　试验材料 ………………………………………………………………………………………………… 2 4.1　测试生物体 ………………………………………………………………………………………… 2 4.2　化学品 ……………………………………………………………………………………………… 2 5　试验设备 ………………………………………………………………………………………………… 3 6　纳米塑料分散体的制备与表征 ………………………………………………………………………… 3 6.1　分散体的准备 ……………………………………………………………………………………… 3 6.2　分散体的表征 ……………………………………………………………………………………… 4 6.3　原液悬浮液中分散体的稳定性 …………………………………………………………………… 4 6.4　人工海水中分散体的稳定性 ……………………………………………………………………… 4 6.5　毒性试验暴露介质的制备 ………………………………………………………………………… 4 7　试验操作 ………………………………………………………………………………………………… 4 7.1　试验概述 …………………………………………………………………………………………… 4 7.2　卤虫卵囊的孵化 …………………………………………………………………………………… 5 7.3　纳米塑料对卤虫无节幼体的毒性测试 …………………………………………………………… 6 8　数据分析 ………………………………………………………………………………………………… 7 9　试验报告 ………………………………………………………………………………………………… 7 9.1　试验程序 …………………………………………………………………………………………… 7 9.2　报告中应包含的信息 ……………………………………………………………………………… 7 10　结果有效性 ……………………………………………………………………………………………… 8 参考文献 ……………………………………………………………………………………………………… 9 Ⅰ 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/CI 582—2024 前 言 本文件按照 GB/T 1.1—2020《标准化工作导则　第 1 部分：标准化文件的结构和起草规则 》的规 定起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利 。本文件的发布机构不承担识别专利的责任 。 本文件由浙江树人学院提出 。 本文件由中国国际科技促进会归口 。 本文件起草单位 ：浙江树人学院 、浙江省水利河口研究院 （浙江省海洋规划设计研究院 ） 、自然资源 部第二海洋研究所 、浙江省海洋监测预报中心 、浙江省农业科学院 、杭州统标检测科技有限公司 。 本文件主要起草人 ：陆胤、王维、黄伟、陈思杨、玛青、王栩鸣、王媚臻、杨奇昆、徐豪、周洁、俞帅、 曾江宁、许开平、程方平、周小峰、姚鹏城、尤爱菊。 Ⅲ 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/CI 582—2024 基于卤虫无节幼体的纳米塑料水生 毒性测定方法 1　范围 本文件规定了卤虫无节幼体的水生毒性试验及纳米塑料的术语和定义 、试验概述 、试验方法 、数据 处理与分析等的基本要求 。 本文件适用于测定纳米塑料水生毒性而进行的卤虫无节幼体的急性毒性和慢性毒性的试验 ，其他 类型的纳米材料可参照使用 。 本文件不适用于水溶性的纳米材料 。 本文件没有考虑供试物在试验期间可能发生的降解 。如有必要 ，可在试验开始和结束时对试验体 系中供试物浓度进行分析 。 2　规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款 。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件 ；不注日期的引用文件 ，其最新版本 （包括所有的修改单 ）适用于 本文件。 GB/T 37129　纳米技术　纳米材料风险评估 GB/T 37156　纳米技术　材料规范　纳米物体特性指南 3　术语和定义 GB/T 37129、GB/T 37156界定的以及下列术语和定义适用于本文件 。 3.1 孵化过程　 hatching process 在适当的环境条件下 ，将卤虫卵囊 （原肠胚）转化为幼体的过程 。 3.1.1 试验容器　 test vessel 容器适用于卤虫 （Artemia spp.）的培养。 注1： 试验容器和所有与试验溶液接触的设备 ，完全由玻璃或其他化学惰性材料制成 。 注2： 试验容器包括烧瓶或烧杯等 。 3.1.2 幼体　 nauplius 新孵化的卤虫 （Artemia spp.）幼体。 注： 卤虫（Artemia spp.）的幼体（Nauplius ）在初次孵化时的长度小于 0.4 mm。 3.1.3 卵囊　 oocyst 处于休眠状态的卤虫 （Artemia spp.）卵。 注： 卵囊能长期储存 ，并按需孵化 。 1 全国团体标准信息平台 T/CI 582—2024 3.2　 测试所用的纳米塑料　 nano⁃plastic 经过制造的纳米材料 ， 以分散体的形式 ，用于接受生物学或化学测试或评估 。 [来源：GB/T 37129 —2018，3.1] 3.3 纳米物体　 nano⁃object 具有一个 、两个或三个纳米级外部尺寸的离散材料块 。 [来源：GB/T 37156 —2018，3.1 ] 注： 如果尺寸差异显著 （通常超过三倍 ） ，则可能更倾向于使用诸如 “纳米纤维 ”或“纳米片”等术语，而不是“纳米 颗粒” 。 3.4 对照　 control 通过设置特定组别 ，为实验结果提供可比较的基准 ，以排除无关变量干扰 、验证实验处理有效性 。 3.4.1 阳性对照　 positive control 经过充分研究的材料或物质 ，当使用特定的测试方法对其进行评估时 ，能证明测试系 统适合于在 测试系统中产生可重复 、适当的阳性响应 。 注： 在卤虫毒性测试中 ，使用重铬酸钾 （K2Cr 2O7）作为阳性对照的处理 ，见ISO 10993 ⁃12。 3.4.2 阴性对照　 negative solution 不含待测样品的试验介质 。 注： 见ISO 10993 ⁃12。 3.5　 毒性相关参数　 toxicity⁃related parameters 衡量卤虫水生毒性的量化指标 。 3.6　 半数有效浓度　 EC 50 符合测试标准的浓度 ，在该浓度下对 50%的生物体产生影响 。 4　试验材料 4.1　测试生物体 可以使用不同种类的卤虫 （Artemia spp.） ，但卤虫（A. salina）是首选的测试物种 。卤虫卵囊的商业 来源很多 。 卤虫幼体 （新生卤虫 ）应通过在实验室孵化率 ≥90%的卵囊来生产 。 4.2　化学品 4.2.1　人工海水 。 4.2.2　重铬酸钾 （K2Cr 2O7） 。 4.2.3　卢戈尔溶液 （卢戈尔碘 ） 。 4.2.4　次氯酸钠 （5.25% NaClO ） 。 4.2.5　氢氧化钠溶液 （400 g/L NaOH ） 。 4.2.6　实验用水应符合 GB 6682 中三级水的规格 。 4.2.7　实验所用化学试剂均为分析纯 （纯度达到 99.9%以上） 。 2 全国团体标准信息平台