ICS 65.160.01 CCS GBC X 50 广西物品编码与标准化促进会 团体标准 T/GBC 96—2025 六堡茶中 5种致嗅杂环化合物的测定 顶空-固相微萃取 /气相色谱 -质谱法 Determination of 5 odorant heterocyclic compounds in Liu Bao Tea by headspace -solid phase microextraction/gas chromatography -mass spectrometry 2025 - 09 - 29发布 2025 - 10 - 29实施 广西物品编码与标准化促进会 发布 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/GBC 96 —2025 I 前言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由广西壮族自治区分析测试研究中心提出并宣贯。 本文件由广西物品编码与标准化促进会归口。 本文件起草单位：广西壮族自治区分析测试研究中心、广西壮族自治区南宁生态环境监测中心、广 西壮族自治区产品质量检验研究院、广西壮族自治区地质矿产测试研究中心、广西南环检测科技有限公 司、广西新百桂科技有限公司、广西新桂环保科技集团有限公司、广西西大检测有限公司、广西壮族自 治区林业科学研究院、广西南宁信雄科技服务有限公司、广西梧州粤桂合作特别试验区投资开发有限公 司。 本文件主要起草人： 韦英亮、范磊、潘扬昌、 伍先国、梁鑫佳、黄一帆、 梁杰、游海燕、覃柳妹、 陈海燕、 蓝贵婵、 梁忠云、黄优菊 、覃保林、班书浩、梁力丹、 甘惠云、玉一岚、黄宁、卢一叶、蓝苏 梅、陈艳。 本标准版权为广西物品编码与标准化促进会所有，除了用于国家法律或事先得到广西物品编码 与标准化促进会的许可外 ,不得以任何形式或任何手段复制、再版或使用本标准及其章节 ,包括电子 版、影印件 ,或发布在互联网及内部网络等。 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/GBC 96 —2025 1 六堡茶中 5种致嗅杂环化合物的测定 顶空-固相微萃取 /气相色谱 -质谱法 1 范围 本文件规定了测定六堡茶中 2,5-二甲基吡嗪、 2,3,5-三甲基吡嗪、 2,3,5,6-四甲基吡嗪、吲哚、 3- 甲基吲哚 5种致嗅杂环化合物的顶空 -固相微萃取 /气相色谱 -质谱法。 本文件适用于六堡茶中 2,5-二甲基吡 嗪、2,3,5-三甲基吡嗪、 2,3,5,6-四甲基吡嗪、吲哚、 3-甲基 吲哚5种致嗅杂环化合物含量的测定。 当取样量为 0.1 g，定容体积为 10.0 mL，采用选择离子扫描方式定量时， 2,5-二甲基吡嗪、 2,3,5- 三甲基吡嗪、 2,3,5,6-四甲基吡嗪、吲哚、 3-甲基吲哚方法检出限分别为 0.4 µg/kg，1.5 µg/kg，1.4 µg/kg，0.8 µg/kg，2.0 µg/kg， 测定下限分别为 1.6 µg/kg，6.0 µg/kg，5.6 µg/kg，3.2 µg/kg，8.0 µg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 方法原理 利用固相微萃取纤维吸附六堡茶样品中 2,5-二甲基吡嗪、 2,3,5-三甲基吡嗪、 2,3,5,6-四甲基吡嗪、 吲哚、3-甲基吲哚，顶空富集后用气相色谱 -质谱联用仪分离测定，内标法定量。 5 试剂和材料 试剂规格要求 除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯以上试剂。 试剂 5.2.1 超纯水：符合 GB/T 6682 的要求，质谱检验无干扰成分。 5.2.2 甲醇(CH3OH)：色谱纯。 5.2.3 氯化钠(NaCl)：优级纯，经 450℃烘烤2 h后置干燥器内备用。 5.2.4 标准物质： 2,5-二甲基吡嗪 (C7H9N)、2,3,5-三甲基吡嗪 (C7H10N2)、2,3,5,6-四甲基吡嗪 (C8H12N2)、 吲哚(C8H7N)、3-甲基吲哚 (C9H9N)，纯度≥ 95％，或使用有证标准物质。 5.2.5 内标物： 2-异丁基-3-甲氧基吡嗪 (C9H14N2O)，纯度＞95％，或使用有证标准物质。 5.2.6 氦气：纯度≥ 99.999％。 试剂配制 5.3.1 标准储备溶液（ 100 mg/L）：准确称取 2,5-二甲基吡嗪、 2,3,5-三甲基吡嗪、 2,3,5,6-四甲基 吡嗪、吲哚、 3-甲基吲哚标准物质各 10.0 mg，分别用甲醇溶解并稀释定容至 100 mL容量瓶。将标准中 间溶液置于聚四氟乙烯封口的螺口瓶中或密闭安瓶中，尽量减少瓶内的液上顶空，于 0℃～4℃下避光 全国团体标准信息平台 T/GBC 96 —2025 2 保存。保存期限为 6个月，开封后需在 1个月内使用。 5.3.2 标准中间溶液（ 10.0 mg/L）：分别用甲醇将 2,5-二甲基吡嗪、 2,3,5-三甲基吡嗪、 2,3,5,6-四 甲基吡嗪、吲哚、 3-甲基吲哚标准储备溶液稀释至质量浓度为 10.0 mg/L。将标准中间溶液置于聚四氟 乙烯封口的螺口瓶中或密闭安瓶中，尽量减少瓶内的液上顶空，于 0℃～4℃下避光保存，使用前要检 查溶液是否挥发。 5.3.3 标准混合使用溶液（ 10.0 μg/L）：将标准中间溶液放至室温，用甲醇或纯水将 10.0 mg/L 的 2,5-二甲基吡嗪、 2,3,5-三甲基吡嗪、 2,3,5,6-四甲基吡嗪、 吲哚、 3-甲基吲哚标准中间溶液稀释成 10.0 μg/L的标准混合使用液。现用现配。 5.3.4 内标储备溶液（ 100 mg/L）：称取 2-异丁基-3-甲氧基吡嗪标准物质 10.0 mg于100 mL容量瓶 中，用甲醇溶解并稀释至刻度，质量浓度为 100 mg/L。将内标储备溶液置于聚四氟乙烯封口的螺口瓶中 或密闭安瓶中，尽量减少瓶内的液上顶空，于 0℃～4℃下避光保存。 5.3.5 内标中间溶液 (10.0 mg/L)：用甲醇将 2-异丁基-3-甲氧基吡嗪储备溶液逐级稀释成质量浓度为 10.0 mg/L的内标中间溶液。将内标中间溶液置于聚四氟乙烯封口的螺口瓶中或密闭安瓿瓶中，尽量减 少瓶内的液上顶空，于 0℃～4℃下避光保存，使用前要检查溶液是否挥发。 5.3.6 内标使用溶液（ 50.0 µg/L）：将内标中间溶液放至室温，用甲醇或纯水将 10.0 mg/L的2-异丁 基-3-甲氧基吡嗪中间溶液稀释成质量浓度为 50.0 µg/L的内标使用溶液。现用现配。 6 仪器和设备 气相色谱质谱联用仪：配有电子轰击电离离子源 (EI)。 全自动顶空固相微萃取装置。 分析天平：感量 0.1 mg和0.01 g。 粉碎机：转速不低于 4000 r/min。 7 样品制备与保存 取100 g样品，粉碎后过孔径 250 µm（60目）标准筛后，混合均匀，于－ 18 ℃下密封避光保存，保存 期不超过 7 d。 8 测定步骤 样品处理 称取粉碎后样品约 0.1 g（准确至 0.000 1 g）于20 mL棕色玻璃瓶，依次加入 3 g氯化钠（ 5.1.3）、 10.0 mL超纯水（ 5.1.1）和20 µL内标使用溶液（ 5.2.7），混匀，置于顶空固相微萃取样品盘适当 位置， 待测。纤维萃取头 270℃活化5 min，插入萃取瓶中， 60℃条件下震荡萃取 40 min后拔出，插入气相色谱 进样口250℃热解析 5 min，经气相分离后进入质谱检测。 标准曲线的绘制 移取标准混合使用溶液（ 5.2.3）30.0 µL、50.0 µL、70.0 µL、100 µL、200 µL、500 µL分别置于预 先加有3 g氯化钠（5.1.3）和10.0 mL 超纯水 （5.1.1） 的固相微萃取瓶 （ 6.6）中，配制成质量浓度为 30.0 ng/L、50.0 ng/L、70.0 ng/L、100 ng/L、200 ng/L、500 ng/L的标准系列，各加入 20 µL内标使用溶液 （5.2.7）,混匀，内标溶液质量浓度为 100 ng/L。按照8.1前处理后，经气相色谱质谱联用仪分析。以峰 面积为纵坐标，质量浓度为横坐标，绘制工作曲线。 仪器参考条件 8.3.1 气相色谱参考条件 载气：高纯氦气 [φ（He）≥99.999％]；载气流速： 1.0 mL/min；进样口温度 ：250℃；进样模式： 不分流进样 ；程序升温 ：起始温度 40℃，保持 10 min，以10℃/min速率升至 260℃，保持 10 min。 全国团体标准信息平台 T/GBC 96 —2025 3 8.3.2 质谱仪参考条件 离子源：电子电离源（ EI）；离子源温度： 230℃；接口温度： 260℃；离子化能量：