ICS65.150 CCSB52 NXSLT 宁夏饲料工业协会团体标准 T/NXSLT0302—2025 人工诱导黄河鲶雌核发育技术规程 TechnicalregulationsforartificiallyinducedgynogenesisinLanzhouCatfish （报批稿） 在提交反馈意见时，请将您知道的相关专利连同支持性文件一并附上。 2025-07-01发布 2025-08-01实施 宁夏饲料工业协会  发布 全国团体标准信息平台 T/NXSLT0302—2025 I前言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由宁夏大学提出。 本文件由宁夏饲料工业协会归口。 本文件起草单位：宁夏大学、宁夏水产研究所（有限公司）。 本文件主要起草人：李兰兰、连总强、肖伟、赛清云、刘彦斌、田永华、张娟、赵文凯。 全国团体标准信息平台 T/NXSLT0302—2025 1人工诱导黄河鲶雌核发育技术规程 1.范围 本标准规定了黄河鲶配子收集、雌核发育诱导方法、苗种培育及苗种鉴定。 本标准适用于人工诱导黄河鲶雌核发育技术。 2.规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日 期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包 括所有的修改单）适用于本文件。 SC/T1008-2012淡水鱼苗种池塘常规培育技术规范 SC/T1095-2007怀头鲇亲鱼、苗种 SC/T1050-2002南方鲇养殖技术规范亲鱼 SH/T1029.2-1999革胡子鲇养殖技术规范人工养殖技术 3.术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 4.配子收集 4.1人工催产 在每年5～7月繁殖期间，选择体质健壮、无病无伤，性腺发育较好的雌鱼（1.0～2.0kg/ 尾）。催产所用药物为注射用多潘立酮（DOM）和注射用促黄体素释放激素A2（LHRH-A2）， 注射量为（DOM3mg+LHRH-A25μg）/kg。在水温为22～24℃，效应时间在12～14h。 4.2卵子收集 催产完成后，检查亲鱼性腺情况，若雌鱼腹部膨大柔软富有弹性，用手轻挤便可挤出 卵粒。此时通过轻压雌鱼腹部，缓慢挤出并收集卵子。 4.3异源精液收集 雄性亲本选用黄颡鱼。用MS-222溶液剂量（50.0mg/L）麻醉亲鱼，解剖取其精巢，用 消毒过的剪刀轻轻剪碎，并收集精液。 5.雌核发育诱导方法 5.1精液稀释 取黄颡鱼精液与预冷的精液保存液按1:8混合均匀，低温保存备用，实验所用精子选择 经镜检活力达到90%以上的。黄颡鱼精子保存液配制：10g/L柠檬酸钠三钠、29g/L葡萄 糖、0.3g/L氯化钾、2g/L碳酸氢钠、0.48g/L青霉素、1g/L链霉素。 5.2紫外线遗传灭活 全国团体标准信息平台 T/NXSLT0302—2025 2将稀释后的黄颡鱼精子稀释液液均匀涂在预冷培养皿上，保证精液厚度不超过2mm。 将培养皿置于紫外照射装置内的冰浴摇床上，紫外灯强度为107μw/cm3，灯管与精液表明 垂直距离为25cm，照射时间为30min，摇床振荡频率为40r/min，精子灭活全程遮光。 5.3冷休克诱导雌核发育 将精液倒入事先准备好的黄河鲶卵中，并使用羽毛均匀搅拌后，加入曝气水充分受精 后将受精卵均匀铺在附网片上，24℃受精6min后，迅速移入4℃左右的冰水混合物中处理 25min，完成后立即取出并重新放置在24℃曝气水中孵化。 6.苗种培育 6.1鱼苗培育期 从仔鱼孵化出膜培育至3cm左右的夏花鱼苗，历时18～23d。其中，5～6d仔鱼的开口 饵料可投喂的熟鸡蛋黄或丰年虫幼体；11～12d仔鱼的主要外部器官基本分化完毕，应加 强饵料（丰年虫及水丝蚓）投喂。18～20d稚鱼的消化系统完善，捕食能力提高，可投喂 水蚯蚓或绞碎的鱼肉。完成稚鱼期分化的幼鱼，出现彼此争夺栖息范围的种内排斥现象。 因此，鱼苗培育中应逐步疏散或换养在大水体中，降低密度，防止缺氧和相互咬斗。 6.2鱼种培育期 将体长3cm左右的夏花鱼种培育成10～12cm的大规格鱼种，历时30～40d。黄河鲶要 经历由摄食活饵料转变为人工配合饲料的转食过程。鱼种达到5cm后，便可投喂人工配制 的转食饲料，即添加了诱食剂的人工配合饲料，转食过程7~12d。这个阶段是鱼种相互残 食最严重的时期，此时要投足饲料，并及时清池过筛，分级分池饲养。 7.苗种鉴定 7.1形态鉴定 通过比较父本（黄颡鱼）、母本（黄河鲶）和雌核发育子代的外形特征发现：黄颡鱼 和黄河鲶在长鳍和侧鳍的颜色等形态特征上存在显著差异，而雌核发育后代与母本形态一 致，无父本形态特征。 7.2性腺结构鉴定 通过HE染色比较6月龄的三个雌核发育组（共90尾）和普通对照组（60尾）的性别比 例发现：正常对照组雌雄比为1:1，而雌核发育后代均为雌性。 7.3遗传鉴定 通过微卫星遗传标记比较父母本和雌核发育及对照后代（其中母本为同一亲鱼）的基 因型和重组率发现：雌核发育后代的基因型与母本基因型一致，没有父本基因的参与。而 对照群体父母本均参与遗传分配且后代符合孟德尔遗传定律。因此，本试验证明获得的子 代为雌核发育后代。 全国团体标准信息平台