ICS 65.100 CCS A 05 NAIA 宁 夏 化 学 分 析 测 试 协 会 团 体 标 准 T/NAIA 0390—2025 土壤中毒死蜱残留的快速检测 胶体金免疫层析法 Rapid Detection of Chlorpyrifos Residues in Soil by Colloidal Gold Immunochromatographic 2025 - 06 - 16发布 2025 - 06 - 30实施 宁夏化学分析测试协会   发布 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0390—2025 I 前言 本文件按照 GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由宁夏回族自治区农业勘查设计院（宁夏回族自治区农产品质量安全检测中心）提出。 本文件由宁夏化学分析测试协会归口。 本文件起草单位 ：宁夏回族自治区农业勘查设计院、吴忠市红寺堡区农业农村局、自治区农业综合 开发中心 、宁夏回族自治区农田水利建设与开发整治中心 、宁夏回族自治区食品质量监督检验二站 、北 方民族大学宁夏分析测试中心 、石嘴山市农产品质量安全中心 、沙坡头区农业技术推广服务中心 、上海 复博农业科技股份有限公司、宁夏化学分析测试协会。 本文件主要起草人：常立群、彭玉海、刘建岐、白岩、王玮、丁凯、赵瑞、邬佳豪、胡春、孙媛、 张本健、张祯、吕峰、杨波、丁丽、王晓荣、宋婷婷、夏文静、顾莉盼、张小飞。 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0390—2025 1 土壤中毒死蜱残留的快速检测 胶体金免疫层析法 1　范围 本文件规定了土壤中毒死蜱残留快速检测的原理 、试剂及材料 、设备、试样制备与保存 、分析步骤 、 结果判定与表述等内容 。 本文件适用于土壤中毒死蜱残留的快速定性检测。 2　规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款 。其中，注日期的引用文件 ， 仅该日期对应的版本适用于本文件 ；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单） 适用于本 文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 NY/T 1121.1 土壤检测 第1部分：土壤样品的采集、处理和贮存 3　术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4　原理 本法采用竞争抑制免疫层析技术 ，样本中的毒死蜱与胶体金标记抗体结合 ，抑制抗体与试纸条中检 测线（T线）抗原的结合， 通过T线与质控线（ C线）的显色差异判定结果。 5　试剂及材料 除特殊注明外，本法所用试剂均为分析纯， 水为符合 GB/T 6682规定的二级水。 5.1　试剂 5.1.1　正己烷(C6H14，CAS号：110-54-3) ：色谱纯。 5.1.2　提取液： 70 %甲醇水溶液或由毒死蜱残留检测试剂卡配套提供。 5.2　标准品 毒死蜱标准物质 (Chlorpyrifos ，C9H11Cl3NO3PS，CAS号：2921-88-2) ：纯度≥98 %或可以使用满足 溯源要求的商品化标准溶液。 5.3　标准溶液配制 5.3.1　毒死蜱标准储备溶液 (1000 μg/mL)：准确称取毒死蜱标准品 10 mg(精确至0.1 mg)，用正己烷溶 解并定容至 10 mL，将溶液转移至棕色玻璃试剂瓶中 ，避光-18 ℃及以下条件保存， 有效期12个月。 5.3.2　毒死蜱标准工作溶液 (1 μg/mL)：移取一定量标准储备溶液 ，用正己烷逐级稀释 ，混匀。将溶液 转移至棕色玻璃试剂瓶中，避光 -18 ℃及以下条件保存， 有效期1个月。 5.4　材料 5.4.1　毒死蜱残留检测试剂卡：密封包装，干燥阴凉处保存，使用前恢复至室温，即开即用。 5.4.2　具塞离心管： 15 mL。 5.4.3　量筒：10 mL。 6　设备 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0390—2025 26.1　电子天平： 感量0.1 mg和0.01 g。 6.2　涡旋混合器：转速≥ 2500 r/min。 6.3　离心机：转速≥ 4000 r/min。 6.4　移液器： 10 μL-100 μL。 6.5　胶体金分析仪 (可选)：与毒死蜱残留检测试剂卡配套使用，可直接读取测定结果。 7　试样制备与保存 按NY/T 1121.1的规定采集， 将鲜样制备成小于 2 mm粒度的试样，装入聚乙烯瓶或袋中，于 -18 ℃ 及以下条件保存。 8　分析步骤 8.1　提取 称取试样 2.00 g（±0.05 g）于15 mL离心管中 ，加入6 mL提取液，盖上盖子 ，涡旋混匀仪混匀 2 min后4000 r/min离心5 min，取上清液待测。 8.2　测定 取出毒死蜱免疫胶体金快速检测试剂卡与测液恢复至室温 ，置于水平台面上 。使用一次性吸管吸取 8.1中待测液的 100 μL，垂直缓慢滴加于加样孔中 ，液体流动时开始计时 ，在9 min-10 min内读取检测 结果。 8.3　空白试验 除不加试样外， 按照8.1~8.2的规定进行平行测定。 8.4　平行试验 按8.1~8.2的规定对同一试样进行平行测定。 8.5　质控试验 选取阴性样品及阴性样品加标准溶液 （加入毒死蜱含量≥ 0.02 mg/kg），按8.1~8.2的规定进行平 行测定。 9　结果判断及表述 9.1　结果判断 可通过目视法读取试剂卡结果，也可通过胶体金分析仪自动判读结果。 9.2　结果表述 阴性：T线显色高于或者等于 C线显色，表示样本中的待测物浓度低于检测限， 如图1。 阳性：T线显色低于 C线显色， 或者T线不显色，表示样本中的待测物浓度等于或者高于检测限， 如图2。 无效：C线未显色，表示操作过程不正确或者试纸条已失效需重新检测， 如图3。 9.3　质控要求 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0390—2025 3当平行样的检测结果完全一致 ，且阴性质控样和阳性质控样的结果准确时 ，判定该批检测数据有效 。 10　其它 10.1　本方法的检测限为 0.01 mg/kg。 10.2　本方法检测结果为阳性的样品 ，需采用现行有效的参比方法 （气相色谱法 、气相色谱质谱联用仪 法或液相色谱质谱联用仪法或其他现行有效的标准）进行确证。 全国团体标准信息平台