以正式出版文本为准中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 5229 —2019 中华人民共和国海关总署 发 布ICS 97.200.50 Y 75 2019 -12-27发布 2020 -07-01 实施玩具材料中异噻唑啉酮类防腐剂测定 液相色谱 - 质谱联用（LC-MS）法 Leather-Screening of heavy metals （Pb、Cd、Hg、Cr） -Energy dispersive X-ray fluorescence spectrometric method以正式出版文本为准以正式出版文本为准I SN/T 5229—2019前 言 本标准按照 GB / T1.1-2009 给出的规则起草。 请注意本文件中某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本部分由中华人民共和国海关总署提出并归口。本部分起草单位：中华人民共和国天津海关，中华人民共和国南京海关。本部分主要起草人：于智睿、李晶、杨永超、张晓红、洪锦清、李涛。以正式出版文本为准以正式出版文本为准1 SN/T 5229—2019玩具材料中异噻唑啉酮类防腐剂测定 液相色谱 - 质谱联用（LC-MS）法 1　范围 本标准规定了玩具材料中异噻唑啉酮类防腐剂的液相色谱 - 质谱联用法（LC-MS 法） 。 本标准适用于玩具材料中 2- 甲基 -4- 异噻唑啉 -3- 酮（MI） 、5- 氯 -2- 甲基 -4- 异噻唑啉 -3- 酮（CMI）和 1，2- 苯并异噻唑啉 -3- 酮（BIT）的测定。 2　规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本 文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB / T 6682 分析实验室用水规格和试验方法。 3　原理 以去离子水作萃取剂提取样品中的异噻唑啉酮类防腐剂（如图 1 所示） ，液相色谱 - 质谱联用法 （LC-MS）检测玩具材料中异噻唑啉酮类防腐剂的分析方法。 图 1　异噻唑啉酮类防腐剂的结构示意图 4　试剂和材料 除非另有说明，在分析中使用的试剂纯度为分析纯，实验室用水符合 GB/T 6682 的规定。 4.1　甲醇 ( 色谱纯 )。 4.2　无水乙酸 ( 色谱纯 )。 4.3　乙酸溶液：移取无水乙酸配制成体积分数为 0.4% 的乙酸溶液。 4.4　2- 甲基 -4- 异噻唑啉 -3- 酮（MI）标准物质，CAS 号，2682-20-4，纯度大于等于 98%。4.5　5- 氯 -2- 甲 基 -4- 异 噻 唑 啉 -3- 酮（CMI） 标 准 物 质，CAS 号，26172-55-4， 纯 度 大 于 等 于99%。4.6　1，2- 苯并异噻唑啉 -3- 酮（BIT）标准物质，CAS 号，2634-33-51，纯度大于等于 99%。以正式出版文本为准2 SN/T 5229—20194.7　0.22 μm 水相滤膜。 5　仪器和设备 5.1　液相色谱 - 质谱联用仪。 5.2　超声波清洗机，40 kHz。5.3　分析天平，感量 0.0001g。 5.4　漩涡搅拌器。 6　分析步骤6.1　样品前处理 6.1.1　水性液体 准确称取 1.0 g 样品，精确至 1 mg，置于 50 mL 的聚丙烯试管，加水至 15 mL，超声提取 20 min， 0.22 μm 滤膜过滤，待测。 6.1.2　带粘合剂的贴纸类样品 从贴纸样品中取不同颜色代表性试样。 剪成各边长小于 3mm 的小片，混匀。准确称取 1.0 g 上 述样品，精确至 1 mg，置于 50 mL 的聚丙烯试管，加水至 15 mL，超声提取 20 min，0.22 μm 滤膜过滤， 待测。6.1.3　造型粘土样品 准确称取 1.0 g 上述样品，精确至 1 mg，置于 50mL 的聚丙烯试管，加水至 15mL，超声提取 20 min，0.22 μm 滤膜过滤，待测。 6.1.4　皮革样品 从不同颜色或不同部位皮革样品选取代表性试样，试样面积不小于 10 cm 2。试样裁剪成各边长小 于 3 mm 的小片，混匀。准确称取 1.0 g 上述样品，精确至 1 mg，置于 50mL 的聚丙烯试管，加水至 15mL，超声提取 20 min，0.22 μm 滤膜过滤，待测。 6.1.5　空白试验 除了不加试样，其他按 6.3 检测步骤进行检测。 6.2　溶液的配置 6.2.1　标准溶液的配置 分别准确称取 10 mg ( 精确至 0.1 mg) MI、CMI 和 BIT 标准品于 50 mL 容量瓶中，以 0.4% 的乙酸 溶液 (5.3) 定容，配成 3 种质量浓度为 200 mg/L 的标准储备液。6.2.2　标准储备液的配置 准确移取上述 3 种标准储备液，以去离子水稀释，得到 3 种防腐剂质量浓度均为 5.0 μg/L、10μg/L、 20μg/L、50μg/L、100 μg/L、200 μg/L、500 μg/L 的系列混合标准溶液 ( 若样品浓度超出浓度范围，可按 比例适当稀释；亦可根据实际情况选择合适的曲线浓度范围） 。以正式出版文本为准3 SN/T 5229—20196.3　测定 6.3.1　LC-MS 条件 使用的仪器不同，最佳分析条件可能不同，因此不可能给出适合所有 LC-MS 的通用参数。设定 的参数应保证被测组合得到有效分离和测定。下面列出的参数经证明是可行的，谱图可参见附录 A。 a) 液相色谱条件： 1——色谱柱： C18 3.5 μm 色谱柱（2.1×150mm×3.5 μm）或等效色谱柱； 2——流动相：甲醇 - 水（含 0.1% 甲酸）(45/55， V/V) 等度洗脱； 3——流速：200 μL/min ； 4——柱温：室温； 5——进样体积为 5.0 μL。 b) 质谱条件：6——离子源：电喷雾离子源（ESI） ；7——监测模式：正离子监测模式（+） ；8——毛细管电压：4000 V ；9——鞘气压力：241.325 kPa ；10——辅压力气：68.95 kPa ；11——毛细管温度：350 ℃ ；12——监测模式：选择反应监测（SRM）模式；13——采集时间：8min。 6.3.2　测定 根据表 1 中数据采集各异噻唑啉酮防腐剂的质谱峰。 表 1　MI、CMI、BIT 的质谱采集参数 组分 保留时间 母离子（ m/z）定量子离子（ m/z） （碰撞电压 /V）定性子离子（ m/z） （碰撞电压 /V） MI 2.18 116.0 71.4（20） 53.3（34） ，99.1（14） CMI 3.38 149.9 87.2（38） 96.1（24） ，115.1（17） BIT 4.45 152.0 109.1（20） 77.2（31） ，105.1（23） 7　计算结果 7.1　定性结果 用液相色谱 - 串联质谱法对样品进行定性判定，在相同试验条件下，样品中被测组分的质量色 谱峰保留时间与标准溶液中对应组分的质量色谱峰保留时间一致；并且所选择的两对子离子的质荷比 一致，样品色谱图中所选择的监测离子对的相对丰度比与相当浓度标准溶液的离子相对丰度比的偏差 不超过表 2 规定范围，则可以判断样品中存在对应的组分。 表 2　定性确定时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度（k） k>50% 50 % ≥ k > 20 % 20 % ≥ k >10 % k ≤ 10 % 允许的最大偏差 ±20% ±25% ±30% ±50%以正式出版文本为准4 SN/T 5229—20197.2　定量计算 相同实验条件下测定标准溶液和样品溶液 , 制作标准曲线，样品中异噻唑啉酮类防腐剂的含量用 外标法定量，按式（1）计算含量。 1000××=mVcω ……………………………（1） 式中： ω ——玩具中防腐剂的含量，mg/kg c ——从标准曲线得到待测组分的质量浓度， μg/L ； V ——样品定容体积，mL ； m ——样品取样量，g。 8　检测限、定量限和检出浓度、最低定量浓度 本方法对 2- 甲基 -4- 异噻唑啉 -3- 酮（MI） 、5- 氯 -2- 甲基 -4- 异噻唑啉 -3- 酮（CMI）测定 低限为 0.075mg/kg, 对 1，2- 苯并异噻唑啉 -3- 酮（BIT）测定低限为 0.030mg/kg。 9　测试报告 测试报告应至少包括以下内容： （1）样品描述； （2）本标准的编号（包括年号） ；（3）测试结果；（4）测试日期。