ICS65.020.01 CCS B 15 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T3852—2021 稻田莎草科杂草抗药性监测技术规程 Technical code of practice for herbicide resistance monitoring of Cyperaceae weeds inrice field 2021-05-07发布 2021-11-01实施 中华人民共和国农业农村部发布 NY/T3852—2021 言 全国农业翰品标准 共服务 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化作导则 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由农业农村部种植业管理司提出并归口。 本文件起草单位：全国农业技术推广服务中心、湖南省农业科学院植物保护研究所、湖南省植保植 检站。 本文件主要起草人：张帅、柏连阳、马国兰、彭亚军、刘都才、王航、陈秋芳、李已夫。 1 NY/T3852—2021 稻田莎草科杂草抗药性监测技术规程 1范围 本文件规定了稻田莎草科杂草(Cyperaceaeweeds)抗药性监测的基本方法。 本文件适用于稻田莎草科杂草对除草剂的抗药性监测。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本义件；不注 日期的引用 最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 S GB/T 17980.40- 试验准则 NY/T1155.3 药室 代验 准厕 距试！ 土壤喷雾法 NY/T1155.4 农药 除草剂 诚试 茎叶喷雾法 NY/T1667. 药登记管 理术语 3术语和定义 S NY/T166 中界定白 火及下列术计 3. 1 A Are 生长抑制中量 使杂草生物量降低50 3. 2 土壤处理法 将除草活性化全 闭，混王或不混 的 施 药方法。 3.3 茎叶处理法 post-emer application 将除草活性化合 喷酒到 的施 3. 4 抗性指数 resistance index(RI 同一除草剂对杂草抗药性 种群GR与敏尼 4试剂与材料 除非另有说明，所用试剂均为分析纯。 4.1丙酮（CH;COCH:，CAS号：67-64-1)。 4.2二甲基甲酰胺[HCON(CH3)2,CAS号：68-12-2]。 4.3 二甲基亚矾（C,H.OS,CAS号：67-68-5）。 4.4吐温-80[CzHO（C,H,O)，，CAS号：9005-65-6]。 4.5除草剂原药或制剂。 4.60.1%吐温-80水溶液：取1g吐温-80（4.4)加人约950mL水中，用水稀释至1000mL，混匀。 4.7除草剂原药母液：取适量除草剂原药（4.5），水溶性药剂用水溶解，非水溶性药剂用丙酮（4.1）、二甲 基甲酰胺（4.2)或二甲基亚砜（4.3）等溶解，混匀；吐温-80（4.4）加入约950mL水中，用水稀释至 1000mL，混匀。 NY/T3852—2021 4.8除草剂梯度稀释液：取适量除草剂原药母液（4.7)，用0.1%吐温-80水溶液（4.6)逐级稀释为梯度稀 释液；若为制剂，可取适量除草剂制剂（4.5)，用水溶解再逐级稀释为梯度稀释液。 5仪器设备 5.1电子天平：感量为0.001g。 5.2喷雾设备：带稳压可定量喷雾的带扇形雾喷头。 5.3培养箱、人工气候箱、人工气候室或温度可控温室：温度范围为10℃～50℃，相对湿度范围为50% ～90%，光照度不小于300001x。 6试样 6.1监测对象 异型莎草（CyperusdifformisL.）、碎米莎草（CyperusiriaL.）、日照飘拂草[Fimbristylismiliacea （L.）Vahl、野荸荠（HeleocharisplantagineiformisTangetWang）、牛毛毡[Heleocharisyokoscensis （Franch.et Savat.）Tang etWang]、水莎草Juncellus serotinus（Rottb.）C.B.Clarke、萤蔺（Scirpus juncoidesRoxb）、扁秆薰草（ScirpusplaniculmisFr.Schmidt）等。 6.2样品采集与保存 6.2.1在杂草抗药性监测区域设立采样点，每个采样点采集5块稻田，每块稻田用倒置“W”九点取样方 法，采集成熟的莎草科杂草种子或营养繁殖器官。 6.2.2采集杂草种子，每个采样点需要采集杂草30株以上，以保证每种莎草科杂草种子量不少于2000 粒。将种子混合，记录采集信息（参见附录A）。将采集的种子晾干，置于阴凉干燥处备用。 6.2.3采集杂草的营养繁殖器官，每个采样点每种杂草营养繁殖器官的采集量不少于500个。将营养繁 殖器官混合，记录采集信息（参见附录A）。将营养繁殖器官放人湿沙或0℃～4℃冰箱中湿润保存。 7试验步骤 7.1试材培养 7.1.1种子培养 配制无其他除草剂和其他杂草种子的营养土，风干，过筛装盆，或用植物培养基质装盆至4/5处，采用 盆钵底部渗灌方式，使土壤完全湿润。选取打破休眠的种子，用水浸泡8h以上完成吸胀，晾干后均匀撒 播在土壤表面，每个培养钵播种30粒～50粒莎草种子。覆土0.5cm～1cm，置于25℃（12h）和20℃ （12h），光照度不小于300001x（白天），光周期12h：12h，相对湿度75%～80%条件下的培养箱、人工气 候箱（室)或温度可控温室（5.3)内培养。抗性监测的莎草种群与敏感种群在相同条件下进行培养。 7.1.2营养繁殖器官培养 直接将营养繁殖器官移植于盆钵中，每盆15个～20个。培养过程同7.1.1。 7.2药剂处理 7.2.1单剂量甄别法 选择的除草剂梯度稀释液（4.8)中除草剂剂量为敏感种群的最低致死剂量，按药剂特性选择土壤喷雾 处理或茎叶喷雾处理。如为土壤处理法，供试莎草播种后24h进行土壤喷雾处理，其他参照NY/T 1155.3；如为茎叶处理法，供试莎草长至2叶期，每盆保留15株～20株长势一致的莎草植株，继续培养至 茎3cm～5cm或株高5cm～8cm时喷药处理，其他参照NY/T1155.4。设不含除草剂（含有助剂）的处 理作空白对照。每处理不少于4次重复。处理后按照7.1培养条件继续培养。 7.2.2剂量曲线法 NY/T3852—2021 度稀释液（4.8)进行土壤喷雾处理或茎叶喷雾处理，喷液量为300L/hm²～450L/hm²，处理和培养方法 参照7.2.1。 7.3结果调查 7.3.1目测法 单剂量甄别法采用日测法调查，根据除草剂处理方式和特性，在处理后7d～28d进行目测。观察除 草剂处理后杂草受害的症状，以空白对照处理为参照，比较除草剂处理的杂草防效。参照GB/T 17980.40一2000杂草防效的目测法标准（见表1)，记录除草剂对供试杂草的效果，以防效百分数（%)表 示。1级～4级的为敏感种群；5级～9级的为疑似抗药性种群，进行剂量曲线试验。 表1杂草防效的目测法标准 等级 杂草生长情况 防效 1级 无草 100% 2级 相当于空白对照杂草的0.1%~2.5% 97.5%~99.9% 3级 相当于空白对照杂草的2.6%～5.0% 95.0%~97.4% 4级 相当于空白对照杂草的5.1%~10.0% 90.0%~94.9% 5级 相当于空白对照杂草的10.1%~15.0% 85.0%~89.9% 6级 相当于空白对照杂草的15.1%~25.0% 75.0%~84.9% 7级 相当于空白对照杂草的25.1%～35.0% 65.0%~74.9% 8级 相当于空白对照杂草的35.1%～67.5% 32.5%~64.9% 9级 相当于空白对照杂草的67.6%~100% 0%~32.4% 7.3.2数测法 剂量曲线法采用数测法调查。土壤处理后21d～28d，或茎叶处理后7d～28d，剪取植株地上部分， 称量鲜重，统计重量抑制率，计算毒力回归方程及GR50。 8数据统计与分析 8.1防治效果的计算 对杂草重量抑制率。按公式(1)计算防治效果。 CE= (1) Xo 式中： CE 杂草重量抑制率的数值，单位为百分号（%）； OX 空白对照处理杂草鲜重的数值，单位为克（g）； X1 除草剂处理杂草鲜重的数值，单位为克(g)。 计算结果均保留2位小数。 8.2剂量曲线法 采用概率值分析的方法对数据进行处理。可用SAS、POLO-Plus、DPS等软件进行统计分析，求出每 种供试除草剂的GR50及其95%置信限、斜率（6)及其标准误差等（见附录B)。 8.3抗药性水平的计算 根据杂草对除草剂的敏感基线和测试种群的GR5o，按公式(2)计算测试种群的抗性指数。 RGR5 RI SGR50 (2) 式中： RI 抗性指数； RGR50 抗性种群生长抑制中量的数值，单位为克有效成分每公顷（ga.i./hm²）； SGR50 敏感种群生长抑制中量的数值，单位为克有效成分每公顷（ga.i./hm²）。 3 NY/T3852—2021 计算结果均保留2位小数。 9抗药性水平评估 9.1稻田莎草科杂草对部分除草剂的敏感基线 参见附录C。 9.2抗药性分级标准 根据抗性指数的计算结果，按照杂草抗药性水平的分级标准（见表2)，对测试种群的抗药性水平做出 评估。 表2杂草抗药性水平的分级标准 抗药性水平分 抗性指数，倍 低水平抗性 .0<RI≤3.0 中等 平抗性 RI≤10.0 水平抗 RI 10.0 NY/T3852—2021 附录A (资料性) 杂草种子或营养繁殖器官采集信息登记表