ICS 11.120.01 C 23 团体标准 T/CACM 1326.2—2019 白木香种子超低温保存技术规程 Technical code of practice for cryopreservation of Aquilaria sinensis (Lour.) Gilg see ds 2019 - 10 - 17发布 2019 - 10 - 17实施 中 华 中 医 药 学 会 发布 全国团体标准信息平台 T/CACM 1326.2—2019 I 目 次 前言 ................................ ................................ ................ II 1 范围 ................................ ................................ .............. 1 2 规范性引用文件 ................................ ................................ .... 1 3 术语和定义 ................................ ................................ ........ 1 4 种子采收及选择 ................................ ................................ .... 2 4.1 种子采收 ................................ ................................ ...... 2 4.2 种子选择 ................................ ................................ ...... 2 5 种子前处理 ................................ ................................ ........ 2 5.1 活力 ................................ ................................ .......... 2 5.2 含水量范围 ................................ ................................ .... 2 6 种子保存量 ................................ ................................ ........ 3 7 种子冷冻方式 ................................ ................................ ...... 3 8 恢复培养 ................................ ................................ .......... 3 8.1 种子解冻处理 ................................ ................................ .. 3 8.2 冻后种子活力检测 ................................ .............................. 3 8.3 萌芽成苗 ................................ ................................ ...... 3 附录A（规范性附录） TTC/磷酸盐缓冲溶液的配制和保存方法 ............................... 4 参考文献 ................................ ................................ ............. 5 T/CACM T/CACM 全国团体标准信息平台 T/CACM 1326.2—2019 II 前 言 本标准是药用植物顽拗性种子超低温保存 系列标准之一，该系列标准结构和名称如下： ——T/CACM 1326.1 药用植物顽拗性种子超低温保存技术通则 ； ——T/CACM 1326 .2 白木香种子超低温保存技术规程 ； ——T/CACM 1326. 3 降香种子超低温保存技术规 程； ——T/CACM 1326. 4 益智种子超低温保存技术规程 ； ——T/CACM 1326. 5 高良姜种子超低温保存技术规程 ； ——T/CACM 1326. 6 朱砂根种子超低温保存技术规程 ； ——T/CACM 1326. 7 草豆蔻种子超低温保存技术规程 ； ——T/CACM 1326. 8 化州柚种子超 低温保存 技术规程； ——T/CACM 1326. 9 樟种子超低温保存技术规程 ； ——T/CACM 1326.10 两面针种子超低温保存技术规程 ； ………………。 本标准按照GB/T 1.1 －2009《标准化工 作导则 第1部分：标准 的结构和编写》给出的规则起草。 本标准由中国医学科学院药用植物研究所海南分所提出。 本标准由中华 中医药学会 归口。 本标准起草单位：中国医学科学院药用植物研究所海南分所，中国医学科学院药用植物研究所。 本标准主要起草人：魏建和、曾琳、杨云、郑希龙、王秋玲、何明军、金钺、顾雅坤、符丽。 T/CACM T/CACM 全国团体标准信息平台 T/CACM 1326.2—2019 1 白木香种子超低温保存技术 规程 1 范围 本标准规定了白木香 [Aquilaria sinensis (Lour.) Gilg.] 种子超低温保存过程中的术语和定 义、种子的 选择、种子 前处理、种子保存量、种子冷冻方式、恢复培养等 内容。 本标准适用于白木香种子的超低温长期贮藏 。 2 规范性引用文件 下列文件对本 文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单 ）适用于本文件。 GB/T 3543.6 农作物种子检验规程 水分测定 GB/T 3543. 7 农作物种子检验规程 其他项目检验 3 术语和定义 下列术语 和定义适 用于本文件 。 3.1 白木香 Aquilaria sinensis (Lour.) Gilg. 为瑞香科（Thymelaeaceae ）沉香属（ Aquilaria Lam.）常绿乔木，高 5m～15m。叶革质，圆形、 椭圆形至长圆形或近倒卵形，伞形花序。 渐危种，国家Ⅱ级重点保护野生植 物。该植物老茎受伤后所 积得的树脂 为《中华人民共和国药典》（ 2015版）收载的名贵药 沉香，用于治疗胸腹胀闷疼痛，胃 寒 呕吐呃逆，肾虚气逆喘急。 3.2 白木香果实 Aquilaria sinensis (Lour.) Gilg. fruits 果实为蒴果， 其蒴果果梗短，卵球形，幼时绿色，长 2cm～3cm，直径约 2cm，顶端具短尖头， 基部渐狭，密被黄色短柔毛， 2 瓣裂，2 室，每室具有 1 粒种子。 3.3 白木香种子 Aquilaria sinensis (Lour.) Gilg. seeds 白木香的播种材料为完整种子， 贮藏特性判断为顽拗性种子。种子 褐色、卵球形， 长约 1cm，宽 约 5.5mm，疏被柔毛，基部具有附 属体，附属体长约 1.5cm，上端宽扁，宽约 4mm，下端成柄状。 3.4 种子超低温保存 seed of cryopreservation 将经过前处理的白木香种子置于液氮（ -196℃）中保存。 T/CACM T/CACM 全国团体标准信息平台 T/CACM 1326.2—2019 2 4 种子采收及选择 4.1 种子采收 5 月底～6 月中旬，当果皮颜色由绿转为黄白，果实自然开裂，种子呈棕褐色时即可采收 , 去除 果皮和附属体，取出种子。 4.2 种子选择 挑选发育饱满、均匀 、健康的种子，置于 4℃ 冰箱中保存备用（存放时间不超过 15d）。 5 种子前处理 5.1 活力 5.1.1 检测 白木香种子活力以种子 生活力为判别标准 。按照 GB/T 3543.7 中的 2,3,5-三苯基氯化四氮唑 (TTC) 法检测种子生活力。随机抽取 30 粒种子， 剥去外层种皮， 沿种脊小心将种子分成 2 爿后放培养皿内， 内侧面向下，滴 入 TTC/磷酸盐缓冲 溶液浸没种子，室温 (25℃)避光放置 4h 后观察染色结果。 TTC/磷酸盐缓冲 溶液的配制和保存方法见附录 A。 5.1.2 鉴定及要求 直接用肉眼对染色结果进行观察鉴定。凡胚及胚乳全部染成有光泽的鲜红色，且组织状态正常的， 为有活力的种子，否则为无生活力的种子。 待保存的