ICS11.040.55 CCSC44DB61 陕西省地方标准 DB61/T1520—2021 实时荧光定量PCR分析仪性能评价规范 Evaluationspecificationforperformanceofreal-timefluorescentquantitative Polymerase-Chain-Reactionanalyzer 2021-12-17发布 2022-01-17实施 陕西省市场监督管理局 发布 DB61/T1520—2021 I目  次 前言.....................................................................................................................................................................II 1范围.................................................................................................................................................................1 2规范性引用文件.............................................................................................................................................1 3术语和定义.....................................................................................................................................................1 4技术要求.........................................................................................................................................................2 5试验方法.........................................................................................................................................................3 6评价规则.......................................................................................................................................................13 参考文献.............................................................................................................................................................15 DB61/T1520—2021 II前  言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由陕西省市场监督管理局提出并归口。 本文件起草单位：西北国家计量测试中心办公室、西安天隆科技有限公司、陕西国华现代测控技术 有限公司、陕西省疾病预防控制中心、陕西科仪阳光检测技术服务有限公司、陕西省计量科学研究院、 西安计量技术研究院、西安市质量与标准化研究院、北京林电伟业电子技术有限公司、陕西省建筑科学 研究院。 本文件主要起草人：陈瑛、彭年才、胡畅、陈琛、田真、余鹏博、李天来、张莉、龚大江、李姣姣、 杨嘉泉、李征、张仁、杨悦、李元沉、马腾、武文昀、李磊 本文件由西北国家计量测试中心负责解释。 本文件首次发布。 联系信息如下： 单位：西北国家计量测试中心办公室 地址：陕西省西安市咸宁西路30号 电话：029-83218679 邮编：710004 DB61/T1520—2021 1实时荧光定量PCR分析仪性能评价规范 1范围 本文件规定了实时荧光定量PCR分析仪（以下简称RT-PCR仪）的术语定义、技术要求、试验方法 和评价规则。 本文件适用于RT-PCR仪性能的检测和评价。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB4793.1测量、控制和实验室用电气设备的安全要求第1部分：通用要求 GB4793.6测量、控制和实验室用电气设备的安全要求第6部分：实验室用材料加热设备的特殊 要求 GB4793.9测量、控制和实验室用电气设备的安全要求第9部分：实验室用分析和其他目的自动 和半自动设备的特殊要求 GB/T14710医用电器环境要求及试验方法 GB/T18268.1测量、控制和实验室用的电设备电磁兼容性要求第1部分：通用要求 GB/T18268.26测量、控制和实验室用的电设备电磁兼容性要求第26部分：特殊要求体外诊断 (IVD)医疗设备 JJF1101环境试验设备温度、湿度参数校准规范 YY0648测量、控制和实验室用电气设备的安全要求第2-101部分：体外诊断（IVD）医用设备 的专用要求 YY/T1173聚合酶链反应分析仪 3术语和定义 JJF1101、YY/T1173界定的以及下列术语和定义适用于本文件。 3.1 实时荧光定量PCR仪real-timePCRsystems 由实时荧光检测系统，温控系统，数据分析系统组成，用来监测PCR反应过程的实时荧光随循环数 的变化，并通过数据分析对检测样本进行定量分析。 3.2 控温模块temperaturecontrolmodule 通过感温元件、导热材料、恒温块等完成RT-PCR仪加热、制冷功能的物理组件。 DB61/T1520—2021 23.3 热盖hotlid 具有加热功能，防止蒸发的水汽在RT-PCR仪管盖上凝结的装置。 3.4 荧光干扰fluorescencecrosstalk RT-PCR仪对某一荧光通道进行荧光检测时，相邻或相近荧光通道也会检测到一定的荧光强度。 4技术要求 4.1温度 4.1.1升温速率 升温速率技术要求见表1。 表1升温速率技术要求 序号 项目 要求 1 平均升温速率 50℃～90℃，≥1.5℃/s 2 最大瞬时升温速率 50℃～90℃，≥2.5℃/s 4.1.2降温速率 降温速率技术要求见表2。 表2降温速率技术要求 序号 项目 要求 1 平均降温速率 90℃～50℃，≥1.5℃/s 2 最大瞬时降温速率 90℃～50℃，≥2.0℃/s 4.1.3控温模块温度示值误差 控温模块O点温度测得值与设定值差值的绝对值不大于0.5℃。 4.1.4控温模块温度波动度 控温模块O点温度波动度不大于±0.3℃。 4.1.5温度均匀度 控温模块各检测孔间温度差值不大于1.0℃。 4.1.6温度持续时间相对误差 温度持续时间与设定温度持续时间的相对误差不大于±5%。 4.1.7热盖温度示值误差 热盖温度测得值与设定值差值的绝对值不大于3.0℃。 DB61/T1520—2021 34.1.8热盖温度波动度 热盖温度波动度不大于±3.0℃。 4.2荧光强度 4.2.1荧光强度重复性 荧光强度的重复性不大于1.5%。 4.2.2荧光检测精密度 用高、中、低三种浓度的荧光染料进行试验，每种浓度下检测结果的精密度不大于5%。 4.2.3荧光线性 对系列稀释荧光染料物质的样本（至少5个梯度）进行检测，各浓度荧光测得值与稀释比例的线性 回归系数r不小于0.990。 4.3样本检测 4.3.1样本检测重复性 对高、中、低浓度核酸样本或有证标准物质进行检测，重复性应不大于3%。 4.3.2样本线性 对系列稀释梯度浓度的样本（至少5个梯度）进行检测，各浓度Ct值与浓度对数值的线性回归系数r 绝对值应不小于0.990。 4.3.3不同通道荧光干扰 进行RT-PCR试验结果分析，其他通道荧光涨幅不高于目标通道试验结果的自动分析阈值。 4.4电气安全 电气安全应符合GB4793.1、GB4793.6、GB4793.9及YY0648的要求。 4.5环境 应符合GB/T14710的要求。 4.6电磁兼容 应符合GB/T18268.1及GB/T18268.26的要求。 5试验方法 5.1温度 5.1.1检测点的选择 控温模块温度检测点按表3进行选择。热盖温度检测点应选择在热盖中心点。 DB61/T1520—2021 4表3控温模块温度检测点选择要求 内容 要求 检测点数量≥6个，且不少于总检测孔数的12%。 特征要求可以区分多控温模块的，检测点应包含每个控温模块内距离其中心点最近的孔位（O点）及最远 的孔位（F点）。 无法区分多控温模块的，检测点应包括离PCR管放置区中心最近的孔位（O点）和最远的孔位（F 点）