ICS65.120 CCSB46T/ZNZ 浙江省农产品质量安全学会团体标准 T/ZNZ291—2024 饲料中多种抗球虫类药物的测定 液相色谱-串联质谱法 Determinationofavarietyofcoccidiostatinfeeds byliquidchromatography-tandemmassspectrometricmethod 2024-10-28发布 2024-11-28实施 浙江省农产品质量安全学会发布 全国团体标准信息平台 T/ZNZ291—2024 I前  言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起 草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由浙江省农产品质量安全学会提出并归口。 本文件起草单位：绿城农科检测技术有限公司。 本文件主要起草人：余鹏飞、董叶箐、傅诗敏、沈雄雅、陈蓉、何誉、倪娟桢、林婷、孙文闪、何 晓明、徐伟荣。 全国团体标准信息平台 T/ZNZ291—2024 1饲料中多种抗球虫类药物的测定液相色谱-串联质谱法 1范围 本文件规定了饲料中16种抗球虫类药物的液相色谱-串联质谱测定方法。 本文件适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料和预混合饲料等4类饲料中氨丙啉、常山酮、地克 珠利、二硝托胺、癸氧喹酯、甲苄喹啉、甲基盐霉素、克拉珠利、氯苯胍、氯羟吡啶、拉沙洛西、马度 米星铵、莫能菌素、尼卡巴嗪标志物、盐霉素、乙氧酰胺苯甲酯的测定。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T14699.1饲料采样 GB/T20195动物饲料试样的制备 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4原理 试样中抗球虫类药物经乙腈水溶液提取，用通过型亲水亲脂平衡型固相萃取柱净化，液相色谱-串 联质谱定性定量测定，基质外标法定量。 5试剂和材料 除另有规定外，所有试剂均为色谱纯，水为GB/T6682规定的一级水。 5.1试剂和材料 5.1.1乙腈（CH3CN）。 5.1.2甲醇（CH3OH）。 5.1.3N,N-二甲基甲酰胺。 5.1.4乙酸铵（HCOONH4）。 5.2试剂配制 5.2.180%乙腈水溶液：取乙腈800mL、水200mL，混匀。 全国团体标准信息平台 T/ZNZ291—2024 25.2.20.005mol/L乙酸铵水溶液：取乙酸铵0.385g，用水溶解并稀释至1000mL。 5.3标准品 氨丙啉、常山酮、地克珠利、二硝托胺、癸氧喹酯、甲苄喹啉、甲基盐霉素、克拉珠利、氯苯胍、 氯羟吡啶、拉沙洛西、马度米星铵、莫能菌素、尼卡巴嗪标志物、盐霉素、乙氧酰胺苯甲酯含量≥95.0%， 或均应为有证标准物质，具体见附录A。 5.4标准溶液配制 5.4.1标准储备溶液（1000mg/L）：分别准确称取适量16种抗球虫类药物标准品（相当于有效成分 10mg，精确至0.01mg），用N,N-二甲基甲酰胺3mL溶解后，再用甲醇定容至10mL，此溶液浓度均 为1000mg/L。-18℃避光密封保存，有效期6个月。 5.4.2混合标准工作液：准确量取标准储备液（5.4.1）氨丙啉、癸氧喹酯、甲卞喹啉各0.1mL，常山 酮、甲基盐霉素、拉沙洛西、氯苯胍、马度米星铵、莫能菌素、盐霉素、地克珠利、尼卡巴嗪标志物各 0.5mL，氯羟吡啶、乙氧酰胺苯甲酯、克拉珠利、二硝托胺各2mL于100mL容量瓶中，用甲醇定容 至刻度，配制成混合标准工作液。其中氨丙啉、癸氧喹酯、甲卞喹啉浓度为1mg/L，常山酮、甲基盐 霉素、拉沙洛西、氯苯胍、马度米星铵、莫能菌素、盐霉素、地克珠利、尼卡巴嗪标志物浓度为5mg/L， 氯羟吡啶、乙氧酰胺苯甲酯、克拉珠利、二硝托胺浓度为20mg/L。-18℃避光密封保存，有效期1个 月。 5.5材料 5.5.1通过型亲水亲脂平衡型固相萃取柱：200mg，6mL。 5.5.2聚四氟乙烯微孔滤膜：0.22μm。 6仪器和设备 6.1液相色谱—串联质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。 6.2分析天平：感量0.01mg和1mg。 6.3离心机：≥4000r/min。 6.4涡旋振荡器。 6.5超声波清洗器。 6.6固相萃取装置。 7试样的制备与保存 7.1试样的制备 按GB/T14699.1的规定抽取有代表性的饲料样品，用四分法缩减取样，按照GB/T20195制备试样， 粉碎后过0.45mm孔径的分析筛，混匀，装入磨口瓶中，备用。 a)取粉碎过筛后的供试样品，作为供试试料。 b)取粉碎过筛后的空白样品，作为空白试料。 c)取粉碎过筛后的空白样品，添加适宜浓度的混合标准工作液,作为空白添加试料。 全国团体标准信息平台