ICS 07.080 CCS Z51 团 体 标 准 T/ SSESB 13 -2025 基于环境 DNA技术的水生入侵物种 RPA快速 检测方法 RPA rapid detection m ethod for aquatic invasive species based on environmental DNA t echnology 2025 -04-25 发布 2025 -04-25 实施 上海市环境科学学会 发布 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/ SSESB 13 -2025 i 目 次 前 言 ................................ ................................ ................................ ................................ ii 1 范围 ................................ ................................ ................................ ................................ 1 2 规范性引用文件 ................................ ................................ ................................ ............ 1 3 术语和定义 ................................ ................................ ................................ .................... 1 4 技术原理 ................................ ................................ ................................ ........................ 2 5 检测用引物和探针 ................................ ................................ ................................ ........ 3 6 试剂 ................................ ................................ ................................ ................................ 3 6.1 采样及前处理试剂 ................................ ................................ ............................... 3 6.2 环境 DNA提取试剂 ................................ ................................ ............................ 3 6.3 RPA扩增试剂 ................................ ................................ ................................ ....... 4 6.4 LFD检测试剂 ................................ ................................ ................................ ....... 4 7 仪器设备 ................................ ................................ ................................ ........................ 4 8 检测步骤 ................................ ................................ ................................ ........................ 4 8.1 水样采集 ................................ ................................ ................................ ............... 4 8.2 水样过滤 ................................ ................................ ................................ ............... 4 8.3 DNA提取 ................................ ................................ ................................ .............. 4 8.4 RPA -LFD检测 ................................ ................................ ................................ ...... 4 9 结果判定 ................................ ................................ ................................ ........................ 5 10 质量控制与保证 ................................ ................................ ................................ .......... 5 10.1 试验对照设置 ................................ ................................ ................................ ..... 5 10.2 平行样品设置 ................................ ................................ ................................ ..... 5 10.3 质量控制 ................................ ................................ ................................ ............. 5 11 废弃物处理 ................................ ................................ ................................ .................. 6 附 录 A（资料性附录）外来入侵水生生物基因扩增靶标序列 ................................ .. 7 全国团体标准信息平台 T/ SSESB 13 -2025 ii 前 言 本文件符合 GB/T1.1 -2020《标准化工作导则第 1部分：标准化文件的结构和起草 规则》有关 的规定起草。 请注意本文件的某些内容涉及 以下专利的使用： 专利 1：  专利编号： CN202311710128.2  专利名称：基于 RPA技术现场检测巴西龟的引物探针组合、试剂盒及方法  专利权人：上海海洋大学 专利 2：  专利编号： CN202311710130.X  专利名称： 基于 RPA技术现场检测齐氏罗非鱼的引物探针组合、试剂盒及 方法  专利权人：上海海洋大学 专利 3：  专利编号： CN202311710137.1  专利名称： 基于 RPA技术现场检测食蚊鱼的引物探针组合、试剂盒及方法  专利权人：上海海洋大学 专利 4：  专利编号： CN202410696497.9  专利名称：塔玛亚历山大藻 RPA检测试剂盒和 RPA -LFD检测系统及检测方 法  专利权人：中国水产科学研究院东海水产研究所 本文件的发布机构对于该专利的真实性、有效性和范围无任何立