ICS71.100.70 CCSY42 团体标准 T/SPMA009-2023 化妆品舒缓功效测试方法 基于脂多糖诱导巨噬细胞系炎症细胞模型 的一氧化氮含量测定 Testingmethodforthesoothingfunctionofcosmetics lipopolysaccharide-inducedinflammatorymacrophagecellmodelbased assayofnitricoxidecontent 2023-05-05发布 2023-05-05实施 上海市预防医学会发布 全国团体标准信息平台 T/SPMA009-2023 I目次 前言.................................................................................II 1范围...............................................................................1 2规范性引用文件.....................................................................1 3术语和定义.........................................................................1 4原理...............................................................................1 5仪器和设备.........................................................................1 6主要试剂及耗材.....................................................................2 7试验方法...........................................................................2 8结果计算...........................................................................4 9试验有效性判定.....................................................................4 10结果报告..........................................................................4 11结果相关性解读....................................................................4 附录A（资料性）RAW264.7细胞培养结果图片示例.........................................5 附录B（资料性）溶液制备..............................................................6 全国团体标准信息平台 T/SPMA009-2023 II前  言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起 草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由上海市预防医学会提出并归口。 本文件起草单位：上海市疾病预防控制中心、广东博溪生物科技有限公司、云南贝泰妮生物科技集 团股份有限公司、片仔癀（上海）生物科技研发有限公司、浙江养生堂天然药物研究所有限公司、时垠 (上海)生物科技有限公司、北京鑫金证国际技术服务有限公司、常州谙美生物科技有限公司、东阿阿胶 股份有限公司、上海家化联合股份有限公司、上海海关技术中心、南方医科大学皮肤病医院、上海嘉亨 日用化学品有限公司、上海测谱检测技术有限公司、上海其然生物科技有限公司、上海永熙信息科技有 限公司。 本文件首期承诺执行单位：上海市疾病预防控制中心、广东博溪生物科技有限公司、云南贝泰妮生 物科技集团股份有限公司、片仔癀（上海）生物科技研发有限公司、浙江养生堂天然药物研究所有限公 司、时垠(上海)生物科技有限公司、北京鑫金证国际技术服务有限公司、常州谙美生物科技有限公司、 东阿阿胶股份有限公司、上海家化联合股份有限公司、上海海关技术中心、南方医科大学皮肤病医院、 上海嘉亨日用化学品有限公司、上海测谱检测技术有限公司、上海其然生物科技有限公司、上海永熙信 息科技有限公司。 本文件主要起草人：崔文广、陈田、霍倩、陶功华、卢永波、王飞飞、赵玥、任君宇、廖峰、许春 晖、钱陈、李竹、周利红、洪新宇、应梦超、张艳云、李晶晶、赵晓、周峰、方国珊、魏春花、常怀龙、 田守生、李小林、王银娟、袁登峰、张坤、叶理、曹平、鲁楠、袁旻嘉、喻竟。 本文件为首次制定。 全国团体标准信息平台 T/SPMA009-2023 1化妆品舒缓功效测试方法基于脂多糖诱导巨噬细胞系炎症细胞模 型的一氧化氮含量测定 1范围 本文件规定了细菌脂多糖诱导小鼠单核巨噬细胞白血病细胞系RAW264.7释放一氧化氮（NO）含量 检测的方法。 本文件适用于化妆品舒缓功效的测试评价。 2规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件。 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 一氧化氮nitricoxide,（NO） 是一种具有多种生物学活性的小分子信使物质，活化的巨噬细胞产生一氧化氮（NO）作为一种免 疫调节因子，影响机体免疫功能。 3.2 光密度opticaldensity（OD） 物质在溶液中吸收特定波长光线强弱的参数，光密度值与光吸收物质在溶液中的浓度成相关性。 4原理 具有舒缓功效的化妆品有助于改善皮肤刺激状态。皮肤刺激状态的发生主要涉及皮肤屏障-神经血 管-免疫炎症的生理过程，通过舒缓皮肤炎症反应可以改善皮肤刺激问题。一氧化氮（NO）作为一种免 疫调节因子参与皮肤炎症反应的生理过程，通过抑制活化的免疫细胞释放过量一氧化氮（NO）可以减 轻皮肤的免疫反应从而改善皮肤的刺激状态。 通过细菌脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导小鼠单核巨噬细胞白血病细胞系RAW264.7释放NO， 采用Griess法测定细胞培养上清液中的NO浓度，计算受试物对小鼠巨噬细胞释放NO的抑制率，评价受 试物的舒缓功效。 5仪器和设备 全国团体标准信息平台