ICS 67.100 CCS C 144 T/NAIA 团 体 标 准 T/ NAIA 0376—2025 牛奶和奶粉中 22种磺胺类残留量的测定 液相色谱 -串联质谱法 Determination of twenty-two sulfonamides residues in milk and milk powder by HPLC-MS/MS 2025-03- 17发布 2025-03- 31实施 宁夏化学分析测试协会 发 布 全国团体标准信息平台 I前 言 本文件按照 GB/T 1.1-2020 《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》规定 编写。 本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由宁夏化学分析测试协会提出并归口。 本文件起草单位 ：宁夏回族自治区食品检测研究院（国家市场监督管理总局重点实验室（枸杞 及葡萄酒质量安全））、宁夏计量质量检验检测研究院、宁夏化学分析测试协会。 本文件主要起草人 ：朱燕燕、马桂娟、郭阳、姚博伟、张学玲、陈盼盼、刘继辉、孙少忆、高 永梅、何卉、吕毅、吴明 、张小飞。 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0376—2025 1牛奶和奶粉中 22种磺胺类残留量的测定 液相色谱 -串联质谱法 1范围 本文件规定了 牛奶和奶粉中 22种磺胺（磺胺醋酰（ SAA）、磺胺苯酰（ SBA）、磺胺氯哒嗪 （SCP）、磺胺二甲基嘧啶（ SDM）、磺胺地索辛（ SDT）、磺胺多辛（ SDX）、磺胺嘧啶 （SDZ）、磺胺异恶唑（ SFZ）、磺胺脒（ SGN）、磺胺索嘧啶（ SIM）、磺胺对甲氧嘧啶 （SMD）、磺胺间甲氧嘧啶（ SMM）、磺胺二甲唑（ SMO）、磺胺甲氧嗪（ SMP）、磺胺甲嘧啶 （SMR）、磺胺甲噻二唑（ SMT）、磺胺甲恶唑（ SMZ）、磺胺苯吡唑（ SPA）、磺胺吡啶 （SPD）、磺胺喹恶啉（ SQX）、磺胺噻唑（ STZ）、甲氧苄啶（ TMP））的液相色谱 -串联质谱检 测方法。 本文件适用牛奶和奶粉 中22种磺胺的测定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注日期的引用文件 ，仅注日期的版本适用于本 文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682分析实验室用水规格和实验方法 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4原理 试样经1%的甲酸乙腈溶液提取 ，采用分散固相萃取净化 ，经反相色谱柱分离 ，供液相色谱 -串 联质谱仪测定，外标法定量。 5试剂和材料 本方法所用的试剂，除另有规定外，均为分析纯， 水为 GB/T 6682规定的一级水。 5.1试剂 5.1.1乙腈：色谱纯。 5.1.2甲酸：优级纯。 5.1.3氯化钠：分析纯。 5.1.4十八烷基（ C18）粉末： 粒径 50μm。 5.1.5 N-丙基乙二胺 (N-primary secondary amine, PSA)粉末：粒径 50μm。 5.1.6 1%甲酸乙腈溶液： 取10.0mL甲酸（ 5.1.2），用乙腈（ 5.1.1）定容到 1000mL，混匀。 5.1.7 0.1%甲酸水溶液： 取1mL甲酸（ 5.1.2），用水定容到 1000mL，混匀。 5.1.8 0.1%甲酸乙腈溶液： 取1mL甲酸（ 5.1.2），用乙腈（ 5.1.1）定容到 1000mL，混匀。 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0376—2025 25.2标准品 22种磺胺标准品名称、化学分子式、 CAS号和纯度 见附录表 A。 5.3标准溶液配制 5.3.1标准储备液 （1.0mg/mL ）：分别准确称取 22种磺胺 10.00mg，用乙腈 (5.1.1)溶解并定容至 10mL， 避光冷冻贮存， 有效期 3个月。 5.3.2混合标准储备液（ 10.0μg/mL ）：分别移取 22种标准储备液（ 5.3.1）100μL，混合后用乙腈 (5.1.1)定容至 10mL，避光冷冻贮存， 有效期 1个月。 5.3.3混合标准工作溶液：采用空白样品基质配制成浓度 为0.2ng/mL 、0.5ng/mL 、1.0ng/mL 、 2.0ng/mL 、5.0ng/mL 、10.0ng/mL 、20.0ng/mL的标准工作溶液，临用现配。 6仪器和设备 6.1液相色谱 -串联质谱仪：配备电喷雾离子源。 6.2天平：感量 0.01m g和0.01g。 6.3涡旋混合器。 6.4高速离心机：转速 不低于 8000r/min 。 6.5超声波清洗器。 6.6氮吹仪。 6.7有机微孔滤膜， 孔径 0.22μm，或相当者。 7分析步骤 7.1制备与贮存 取适量新鲜或解冻的牛奶，混匀， 于-18℃避光贮存 。 取适量奶粉，混匀，常温避光贮存。 7.2提取与净化 称取 5g牛奶或 1g奶粉（精确到 0.01g），置于50mL具塞离心管中， 加入 10g氯化钠（ 5.1.3） 和10mL甲酸乙腈（ 5.1.6），高速涡旋 5min，8000r/min 离心 5min，取上清液； 残渣再加 10mL的 甲酸乙腈（ 5.1.6）重复提取一次，合并上清液，待净化。 移取 10.0mL上清液至 装有 80mg C18（5.1.4）和50mg PSA（5.1.5）离心管中 ，涡旋 5min，8000 r/min离心 5min，移取 5.0mL上清液氮吹至近干， 1.0mL初始流动相复溶， 过0.22μ m滤膜（ 6.7）， 供液相色谱 -串联质谱仪测定。 7.3仪器参考条件 7.3.1液相色谱参考条件 a）色谱柱： C18，2.1mm×150mm ，粒径 3.5μm或性能相当。 b）柱温： 30℃。 c）流动相： A：0.1%的甲酸水溶液 （5.1.7），B：0.1%甲酸乙腈溶液 （5.1.8）；梯度洗脱见表 1。 d）流速： 0.3mL/min 。 e）进样量： 5μL。 全国团体标准信息平台