ICS 65.020 CCS A 017 团 体 标 准 T / N A I A 0 2 6 —2 0 2 1T/ NAIA 0364-2025 金银花中12种有效成分含量的测定 液相色谱-质谱联用法 Determination of 12 effective components content in Lonicerae Japonicae flos‒ Liquid chromatography-tandem mass spectrometry method 2025-01-24发布 2025-01-31实施 宁夏化学分析测试协会 发 布 发布T/NAIA 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0364-2025 I前 言 本文件按照 GB/T 1.1-2020 《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规 则》的规定起草。 本文件由宁夏化学分析测试协会提出并归口。 本文件起草单位 ：宁夏农产品质量标准与检测技术研究所，宁夏农林科学院林业与草地 生态研究所，宁夏回族自治区食品检测研究院。 本文件主要起草人 ：赵子丹、王晓静、刘霞、刘华、李彩虹、李谦、李明、张艳、牛艳、 吴燕、马斌、开建荣、赵丹青、杨春霞、陈翔、石欣。 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0364-2025 1金银花中 12种有效成分含量的测定 液相色谱 -质谱联用法 1 范围 本文件规定了 金银花中 12种有效成分含量的液相色谱 -质谱联用测定方法。 本文件适用于 金银花中 12种有效成分 （新绿原酸 、绿原酸、异绿原酸 A、异绿原酸 B、 异绿原酸 C、木犀草苷 、獐牙菜苷 、忍冬苷、莫诺苷、当药醇苷 、断氧化马钱子苷 、断马钱 子酸）的测定。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款 。其中，注日期 的引用文件， 仅该日期对应的版本适用本文件 ；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所 有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法。 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 原理 试样用 70%甲醇溶液超声提取，上清液经离心后，液相色谱 -质谱联用仪检测 ，外标法 定量。 5 试剂与材料 除非另有规定外，所有试剂均为分析纯，水符合 GB/T 6682中规定的一级水。 5.1 试剂 5.1.1 甲醇 (CH 3OH，CAS号： 67-56-1)：色谱纯。 5.1.2 乙腈 (CH 3CN，CAS号： 75-05-8)：色谱纯。 5.1.3 甲酸 (HCOOH ，CAS号： 64-18-6)：色谱纯。 5.2 溶液配制 5.2.1 70%甲醇溶液 (70+30，体积比 )：量取 30 mL水加入 70 mL甲醇中，混匀。 5.2.2 0.1%甲酸水溶液： 量取 1.0 mL甲酸于容量瓶中，用 水定容至 1000 mL，摇匀。 5.3 标准品 新绿原酸（ CAS号 906-33-2）、绿原酸（ CAS号 327-97-9）、异绿原酸 A（CAS号 89919-62-0 ） 、异 绿 原酸 B（CAS号 14534-61-3 ） 、异 绿 原酸 C（CAS号 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0364-2025 232451-88-0 ）、木犀草苷（ CAS号 5373-11-5 ）、獐牙菜苷（ CAS号 14215-86-2 ）、忍 冬苷（ CAS号 25694-72-8 ）、莫诺苷（ CAS号 25406-64-8 ）、当药醇苷（ CAS号 23445-00-3 ）、断氧化马钱子苷（ CAS号 58822-47-2 ）、断马钱子酸（ CAS号 60077-46-5 ），纯度均 ≥98%。 5.4 标准溶液配制 5.4.1 标准储备溶液 (1000 mg/L)：准确称取约 10 mg（精确至 0.1 mg）相应的标准品，用甲 醇溶液 (5.2.1)溶解并定容至 10 mL，避光 -18 ℃及以下条件保存。 5.4.2 混合标准储备溶液 (10 mg/L~100 mg/L)：吸取一定量的标准储备溶液于容量瓶中用甲 醇溶液 (5.2.1)定容至刻度，避光 -18℃及以下条件保存。 5.5 材料 5.5.1 微孔滤膜 (水相 )：13mm×0.22μm，或相当者。 6 仪器与设备 6.1 液相色谱 -三重四极杆质谱联用仪：配有电喷雾离子源（ ESI）。 6.2 分析天平： 感量 0.1 mg和0.01 g。 6.3 离心机： 4000 r/min。 6.4 高速粉碎机： 10000 r/min。 6.5 涡旋混合器。 6.6 数控超声波： 40KHz。 7 分析步骤 7.1 试样制备 金银花样品随机取样 500 g，粉碎后充分混匀 ，放入聚乙烯袋中 ，于-18℃及以下条件保 存。 7.2 样品提取 将试样充分混匀 ，称取 0.02 g，精确至 0.0001 g，置于100 mL容量瓶中 ，先加入 90 mL 甲醇溶液 (5.2.1)，超声处理 30 min，冷却后定容至 100 mL，摇匀后静置 30 min，过0.22 μm 滤膜，待测定。 7.3 测定 7.3.1 液相色谱参考条件 a）色谱柱： C18柱， 2.1 mm（内径） ×100 mm，粒径 1.7 μm，或相当者； b）流动相： A相为甲酸水溶液 (5.2.2)，B相为乙腈 (5.1.2)，流动相 梯度条件见表 1； c）流速： 0.3 mL/min； d）柱温： 40 ℃； e）进样量： 2 μL。 全国团体标准信息平台