ICS 67.050 CCS A 032 T/NAIA 团 体 标 准 T/ NAIA 0345—2024 鸡蛋中地克珠利、妥曲珠利、妥曲珠利 砜、妥曲珠利亚砜的测定 高效液相色谱 -串联质谱法 Determination of diclazuril and toltrazuril 、ponazuril 、Toltrazuril sulfoxide in eggs HPLC-MS/MS 2024-12- 03发布 2024-12- 15实施 宁夏化学分析测试协会 发 布 全国团体标准信息平台 I前 言 本文件按照 GB/T 1.1-2020 《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》规定 编写。 本文件由宁夏化学分析测试协会提出并归口。 本文件起草单位 ：宁夏回族自治区食品检测研究院（国家葡萄酒质量检验检测中心、国家市场 监管重点实验室（枸杞及葡萄酒质量安全） ）、宁夏计量质量技术检验检测研究院、银川海关技术 中心、宁夏化学分析测试协会。 本文件主要起草人 ：马雪梅、汤丽华、朱燕燕、王鹏、孙少忆、吕晓东、王芳焕、王紫昕、王 泽岚、龚慧、谢芳、李强、张小飞。 全国团体标准信息平台 1鸡蛋中地克珠利、妥曲珠利、妥曲珠利砜、妥曲珠利亚砜的测定 高效液相色谱 -串联质谱法 1 范围 本文件规定了鸡蛋中地克珠利 、妥曲珠利 、妥曲珠利砜 、妥曲珠利亚砜的高效液相色谱 -串联质 谱检测方法。 本文件适用于鸡蛋中地克珠利、妥曲珠利、妥曲珠利砜、妥曲珠利亚砜的测定和确证。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注日期的引用文件 ，仅注日期的版本适用于本 文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682分析实验室用水规格和实验方法 SN/T 2318-2009 动物源食品中地克珠利 、妥曲珠利 、妥曲珠利亚砜和妥曲珠利砜残留量的检测 高效液相色谱 -质谱 /质谱法 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 原理 试样经乙酸乙酯提取，反相色谱柱分离，以保留时间定性，供高效液相色谱 -串联质谱仪测定 和确证，内标法定量。 5 试剂和材料 本方法所用的试剂，除另有规定外，均为分析纯， 水为 GB/T 6682规定的一级水。 5.1试剂 5.1.1 乙酸乙酯：色谱纯。 5.1.2 乙腈：色谱纯。 5.1.3 甲醇：色谱纯。 5.1.4 50%乙腈溶液： 取50mL乙腈加水定容至 100mL，混合均匀 。 5.1.5 氯化钠：优级纯 5.2 标准品 5.2.1标准品： 地克珠利（ Diclazuril ，CAS号101831-37-2 ）、妥曲珠利（ Toltrazuril ，CAS号 69004-03-1 ）、妥曲珠利砜（ Ponazuril ，CAS号69004-04-2 ）、妥曲珠利亚砜（ Toltrazuril Sulfoxide ，CAS号69004-15-5 ）、妥曲珠利 -D3（Toltrazuril-D 3，CAS号1353867-75-0 ）。 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0345—2024 25.2.2标准储备液（ 100.0μg/mL ）：分别准确移取地克珠利、妥曲珠利、妥曲珠利砜、妥曲珠利亚 砜标准物质约 10mg（精确至 0.1mg），用甲醇溶解并定容 ,配制成 100.0μ g/mL的标准储备溶液 ，于 冷冻避光贮存。 5.2.3 混合标准溶液：分别准确吸取地克珠利、妥曲珠利、妥曲珠利砜、妥曲珠利亚砜 标准储备液 各1.0 mL于10mL容量瓶中 ，50%乙腈溶液定容至刻度 ，配制成 10.0μ g/mL的混合标准溶液 ，冷藏 避光贮存。 5.2.4 妥曲珠利 -D3储备液：准确移取妥曲珠利 -D3标准物质适量，用甲醇溶解并定容 ,配制成 10.0μ g/mL的妥曲珠利 -D3内标储备溶液，于冷冻避光贮存。 5.2.5妥曲珠利 -D3工作液：准确移取妥曲珠利 -D3储备液 1mL，用甲醇溶解并定容 ,配制成 1.0μg/mL的妥曲珠利 -D3内标工作液，于冷冻避光贮存。 6 仪器和设备 6.1 液相色谱 -串联质谱仪：配备电喷雾离子源。 6.2 天平：感量 0.1mg和0.01g。 6.3 涡旋混合器。 6.4 高速冷冻离心机： 最大转速 10000r/min 。 6.5氮吹仪。 7 分析步骤 7.1 试样的制备 从全部样品中取出约 0.5kg鸡蛋，去壳，匀浆，均分成两份，分别装入洁净容器中，密封，并 标明标记，于 -18℃以下冷冻避光保存。 7.2 试样的提取 称取 5g（精确至 0.01g）样品准确加入适量妥曲珠利 -D3内标工作液， 再加入 10mL乙酸乙酯 ， 2g氯化钠， 涡旋提取 5min后， 4℃ 9000 rpm/min离心 5min,准确吸取 5mL上清液于 N2流下缓慢吹 干，用1mL 50%乙腈溶液复溶后， 过0.22μ m滤膜，供超高效液相色谱串联质谱仪测定。 7.2 仪器参考条件 7.2.1 液相色谱参考条件 7.2.1.1 色谱柱 :C18，2.1mm×100mm，粒径 1.8μm或性能相当。 7.2.1.2 柱温： 40℃。 7.2.1.3 流动相： A：水， B：乙腈；梯 度洗脱见表 1。 7.2.1.4 流速： 0.3mL/min 。 7.2.1.5 进样量： 10μL。 表1 流动相及梯度洗脱条件 时间 /min 流速 /（mL/min） 流动相 A/% 流动相 B/% 0.00 0.3 60 40 4.00 0.3 20 80 5.00 0.3 0 100 6.00 0.3 0 100 全国团体标准信息平台