CS T / NAIA 团 体 标 准 T/ NAIA 0320 -2024 化妆品中芦丁等 6种黄酮类化合物的测定 高效液相色谱法 Determination of Rutin and other flavonoid in cosmetics By High-performance liquid chromatography 2024-10- 02发布 2024-10- 20实施 宁夏化学分析测试协会 发 布ICS 71.100.70 CCS C 268 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0320-2024 I前 言 本文件按照 GB/T 1.1-2020《标准化工作导则 第 1 部分：标准化文件的结构和起草规 则》的规定起草。 本文件由宁夏回族自治区药品检验研究院提出。 本文件由宁夏化学分析测试协会归口。 本文件起草单位：宁夏回族自治区药品检验研究院（国家枸杞产品质量检验检测中心 (宁夏 ))、宁夏回族自治区药品质量控制与评价重点实验室、宁夏卫生健康职业技术学院、 宁夏工商职业技术学院。 本文件主要起草人：肖哲丽、王宁、王宁霞、马玲、尚博扬、翟宇、武亦融、王荣、 贺凯、刘永衡、马宗卫。 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0320-2024 1化妆品中芦丁等 6种黄酮类化合物的测定 高效液相色谱法 Determination of Rutin and other flavonoid in cosmetics By High-performance liquid chromatography 1 范围 本文件规定了高效液相色谱法测定化妆品中芦丁 等6种黄酮类化合物含量的测 定方法。 本文件适用于水剂类 、乳液类、膏霜类、贴面面膜类化妆品中芦丁 等6种黄酮类化合物 的定性与定量测定 。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注日期的引用文件 ，仅注日期的 版本适用于本文件 。凡是不注日期的引用文件 ，其最新版本 （包括所有的修改单 ）适 用于本文件 。 GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义 。 4 原理 样品经80%甲醇水溶液超声提取后 ，采用高效液相色谱系统分离 ，二极管阵列检测 器（DAD），在波长360nm处检测，根据保留时间和紫外光谱定性 ，外标法定量 。 5 试剂与材料 除另有说明外，本方法所用试剂均为分析纯， 水为 GB/T6682 中规定的一级水 。 5.1 甲醇：色谱纯。 5.2 磷酸：H3PO 4，色谱纯。 5.3 80%甲醇溶液：准确量取 800mL甲醇于1L容量瓶中，用水定容至刻度，混匀后备用 。 5.4 0.1%磷酸溶液：准确量取 1.0mL磷酸于1L容量瓶中，用水定容至刻度，混匀后备用 。 5.5 标准品 芦丁（CAS号153-18-4）、杨梅酮（CAS号529-44-2）、异鼠李素 -3-O- β-D-芸 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0320-2024 2香糖苷（CAS号604-80-8）、槲皮素（CAS号117-39-5）、木樨草素 （CAS号 491-90-3）、山奈酚（CAS号520-18-3）标准品：纯度 ≥91%。 5.6 标准品溶液配制 5.6.1 标准储备溶液 ：分别精密称取芦丁、杨梅酮、异鼠李素 -3-O- β-D-芸香糖苷 ，槲皮素、木 樨草素、山奈酚标准品各10mg(精确至0.01mg)，分别置于10mL容量瓶中， 用适量甲醇 （5.1）溶解并定容至刻度 ，摇匀，配制成1000mg/L 标准储备溶液 ，于4℃避光保存 ，可 使用三个月。 5.6.2 混合标准储备 溶液：分别准确移取上述标准储备溶液（ 5.6.1）各2.5mL于50mL容量瓶 中，用甲醇定容至刻度，配制成浓度为 50mg/L的混合标准储备溶液，临用现配。 5.6.3 混合标准工作溶液：分别准确量取混合标准储备溶液（ 5.6.2）0.2mL、0.4mL、 1.0mL、2.0mL、5.0mL、10.0mL用甲醇稀释至 10mL，得到浓度为 1.0µg/mL、 2.0µg/mL、5.0µg/mL、10.0µg/mL、25.0µg/mL、50µg/mL的混合标准工作溶液（混合 标准工作溶液范围可根据实际情况进行调整），临用现配。标准溶液色谱图见附录 A。 6 仪器与设备 6.1 高效液相色谱仪 ：配有紫外检测器或二极管阵列检测器 。 6.2 分析天平：感量 0.00001g。 6.3 超声波清洗器。 6.4 超纯水机。 6.5 多管涡旋混合仪。 6.6 微孔滤膜： 0.45μm，有机系。 7 样品处理 准确称取化妆品试样 0.5g(精确到0.0001g) 于10mL具塞比色管中 （若试样为贴面面膜 类样品应取液体部分）， 加入约 6mL的80%甲醇溶液，涡旋震荡使试样与提取溶剂充分混 匀，超声提取 20min，冷却至室温， 加入 80%甲醇溶液定容至 10mL，经孔径为 0.45µm有 机微孔滤膜过滤后，滤液作为样品待测溶液。 8 测定条件 8.1高效液相色谱参考条件如下： a) 色谱柱： C18柱（ 4.6mm×250mm ,5μm），或等效色谱柱； 全国团体标准信息平台