ICS 65.020.01 CCS GDFS B 05 广东省林学会 团体 标准 T/GDFS 47—2024 湿地松种质资源离体超低温保存技术规范 Code of practice for in vitro cryopreservation of germplasm resources of Pinus elliottii 2024 - 11 - 06发布 2024 - 11 - 06实施 广东省林学会 发布 全国团体标准信息平台 T/GDFS 47 —2024 I 目次 前言 ................................ ................................ ................. II 1 范围 ................................ ................................ ............... 1 2 规范性引用文件 ................................ ................................ ..... 1 3 术语和定义 ................................ ................................ ......... 1 4 仪器设备 ................................ ................................ ........... 1 5 基本程序 ................................ ................................ ........... 2 6 材料准备 ................................ ................................ ........... 2 7 超低温保存 ................................ ................................ ......... 3 8 提取 ................................ ................................ ............... 4 9 建档 ................................ ................................ ............... 5 附录A（资料性） 采收母株编号表（含示例数据） ................................ ......... 6 附录B（资料性） 超低温保存信息表（含示例数据） ................................ ....... 7 全国团体标准信息平台 T/GDFS 47 —2024 II 前言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由广东省林学会团体标准化技术委员会 提出并归口。 本文件起草单位：广东省林业科学研究院。 本文件主要起草人：刘阳、王为民、王哲、曾明、郭文冰、龙永彬、赵奋成、吴惠姗、伍彩云、欧 阳曦。 全国团体标准信息平台 T/GDFS 47 —2024 1 湿地松种质资源离体超低温保存技术规范 1 范围 本文件规定了湿地松 （Pinus elliottii Engelm.）种质资源离体超低温保存的仪器设备、基本程 序、材料准备、超低温保存、提取、建档等技术要求。 本文件适用于湿地松种质资源的离体超低温保存。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 5458 液氮生物容器 GB 8599 大型蒸汽灭菌器技术要求 自动控制型 GB/T 14174 大口径液氮容器 GB 21551.4 家用和类似用途电器的抗菌、除菌、净化功能电冰箱的特殊要求 GJB 2253A 氮气和液氮安全应用准则 JG/T 292 洁净工作台 YY 646 小型蒸汽灭菌器 自动控制型 YY 1007 立式蒸汽灭菌器 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 湿地松 Pinus elliottii Engelm. 松科松属高大乔木，原产美国东南部暖带潮湿的低海拔地区，已广泛引种至我国栽培，在 60多年的 育种选择和驯化过程中逐渐乡土化。适生于低山丘陵地带，耐水湿，树干通直，生长势好，为我国长江 以南地区极有发展前途的造林树种。 超低温保存 cryopreservation 在液氮液相（ -196 ℃）或液氮雾相（ -150 ℃）中对离体的植物组织或细胞材料进行长期保存，在 适宜条件下解冻可恢复 生活力，并保持原来遗传特性。 冷冻保护剂 cryoprotectant 可以保护生物器官、组织或细胞等材料免受冷冻损伤的物质， 本文件中涉及 的冷冻保护剂有二甲基 亚砜、山梨醇等1种或多种物质的组合 。 4 仪器设备 洁净工作台 可提供无尘洁净、无菌工作环境等级为 100级（ISO等级5）的局部操作环境的箱式空气净化设备， 技术指标应符合 JG/T 292 的要求。 高压蒸汽灭菌器 全国团体标准信息平台