ICS 13.100 C 50 DB32 江苏省 地 方 标 准 DB 32/T 3762 .15—2021 新型冠状病毒检测技术规范 第15部分：血清 /血浆 IgM和IgG抗体磁 微粒化学发光法 检测程序 Technical specifications for SARS -CoV -2 detection Part 1 5: Serum /Plasma IgM and IgG antibodies test procedure by MCLIA 2021 - 12 - 09发布 2022 - 01 - 09实施 江苏省市场监督管理局 发布 DB32/T 3762.15—2021 I 目 次 前 言 ................................ ................................ ............ II 1 范围 ................................ ................................ .............. 1 2 规范性引用文件 ................................ ................................ .... 1 3 术语和定义 ................................ ................................ ........ 1 4 缩略语 ................................ ................................ ............ 1 5 原理 ................................ ................................ .............. 1 6 实验室生物安全防护要求 ................................ ............................ 2 7 准备 ................................ ................................ .............. 2 8 样本采集、要求、保存和运输 ................................ ........................ 2 9 检测方法 ................................ ................................ .......... 3 DB32/T 3762.15—2021 II 前 言 DB32/T 3762《新型冠状病毒检测技术规范》目前分为以下部分： ——第1部分：生物样本采集、运输和保存； ——第2部分：病毒分离与鉴定； ——第3部分：核酸荧光 PCR检测程序； ——第4部分：重组酶介导等温扩增程序； ——第5部分：血清 IgM和IgG抗体酶联免疫吸附检测程序； ——第6部分：血清 IgM和IgG抗体胶体金免疫层析检测程序； ——第7部分：空气样本检测与评估； ——第8部分：物体表面检测与评估； ——第9部分：医务人员职业暴露检测与评估； ——第10部分：微量血清中和试验； ——第11部分：全基因组高通量测序； ——第12部分：药物体外抗病毒效果测定 ； ——第13部分：叠氮溴化丙锭 -荧光 PCR检测程序 ； ——第14部分： N亚基因组荧光 PCR检测程序 ； ——第15部分：血清 /血浆 IgM和IgG抗体磁微粒化学发光法检测程序 ； ——第16部分：核酸数字 PCR法； ——第17部分：核酸检测用假病毒阳性质控品 ； ——第18部分：规模化核酸检测程序 。 本文件为DB32/T 3762 的第 15部分。 本文件按照 GB/T 1.1 -2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起 草。 本文件由江苏省卫生健康委员会提出。 本文件由江苏省卫生标准化技术委员会归口。 本文件主要起草单位：江苏省疾病预防 控制中心 、盐城市疾病预防控制中心、扬州市疾病预防控制 中心、淮安市疾病预防控制中心 、南京市疾病预防控制中心、 镇江市疾病预防控制中心、 东南大学 。 本文件主要起草人： 朱立国、 陈国清、王艳、杨鹏飞、 何敏、朱宝立、 李楚楚、 周璐、田华、孔筱 筱、张宇、沈俐、 韩静、金辉、张诗晗。 DB32/T 3762.15—2021 1 新型冠状病毒检测技术规范 第15部分：血清 /血浆 IgM和IgG抗体磁微粒化学发光法检测程序 1 范围 本文件规定了新型冠状病毒 血清 /血浆 IgM和IgG抗体磁微粒化学发光 法的检测程序。 本文件适用于 新型冠状病毒 确诊病例、 无症状感染者、 疑似病例、密切接触者以及一般人群血清 / 血浆样本中新冠特异性 IgM和IgG抗体磁微粒化学发光法检测的实验操作。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB 19489 实验室生物安全通用要求 WS 233 微生物和生物医学实验室生物安全通用准则 DB32/T 3762.1 新型冠状病毒检测技术规范 第1部分：生物样本采集、运输和保存 新型冠状病毒实验室生物安全指南（第二版） 可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定 原中华人民共和国卫生部 3 术语和定义 本文件没有界定的术语和定义。 4 缩略语 下列缩略语适用于本文件。 IgG：免疫球蛋白 G（Immunoglobulin G ） IgM：免疫球蛋白 M（Immunoglobulin M ） MCLIA：磁微粒化学发光法（ Magnetic Chemiluminescence Enzyme Immunoassay ） RLU：相对发光单位（ Relative Light Unit ） 5 原理 磁微粒化学发光 法综合了磁微粒载体技术和化学发光免疫检测技术。人血清 /血浆中待测的新型冠 状病毒 IgM、IgG 抗体与荧光素标记的重组抗原结合，随后加入包被着抗荧光素抗体的磁微粒，通过 抗荧光素抗体与荧光素的特异性结合使抗原抗体复合物连接在磁微粒上。在外加磁场中直接沉淀，去上 清后清洗沉淀的复合物，加入酶标抗体，形成磁微粒－抗原－抗体－酶标 抗体夹心免疫复合物。再次清 洗后，加入酶促化学发光底物。底物在碱性磷酸酶作用下 被催化裂解，形成不稳定的激发态中间体，当 激发态中间体回到基态时便发出光子，形成发光反应，通过光量子阅读系统记录光子能量，并通过计算