(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111499785.8 (22)申请日 2021.12.09 (66)本国优先权数据 202110713431.2 2021.0 6.25 CN (71)申请人 天辰生物医药 （苏州） 有限公司 地址 215163 江苏省苏州市 常熟高新 技术 产业开发区东 南大道1号80 5室 (72)发明人 姜钰超　刘恒　孙乃超　王苗苗　 缪佳　周茂德　 (74)专利代理 机构 上海巅石知识产权代理事务 所(普通合伙) 31309 专利代理师 张琤　蒋舫玮 (51)Int.Cl. C07K 16/30(2006.01) C07K 19/00(2006.01)C07K 16/46(2006.01) C12N 15/13(2006.01) C12N 15/62(2006.01) C12N 5/10(2006.01) A61K 39/395(2006.01) A61K 39/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 35/02(2006.01) G01N 33/574(2006.01) (54)发明名称 靶向GPC3的抗原结合蛋白 (57)摘要 本申请涉及一种分离的抗原结合蛋白， 其包 含分离的抗原结合蛋白， 所述分离的抗原结合蛋 白包含抗体重链可变区VH中的至少一个CDR， 所 述VH包含SEQ  ID NO:17所示的氨基酸序列。 本申 请所述的分离的抗原结合蛋白能够特异性结合 GPC3。 本申请还提供了所述抗原结合蛋白的制备 方法及用途。 权利要求书1页 说明书28页 序列表43页 附图3页 CN 115521380 A 2022.12.27 CN 115521380 A 1.分离的抗原结合蛋白， 其包含抗体重链可变区VH中的至少一个CDR， 所述VH包含SEQ   ID NO:17所示的氨基酸序列。 2.根据权利要求1所述的分离的抗原结合蛋白， 其包含VL中的至少一个CDR， 所述VL包 含SEQ ID NO:25所示的氨基酸序列。 3.根据权利要求1 ‑2中任一项所述的分离的抗原结合蛋白， 其能够特异性结合磷脂酰 肌醇蛋白多糖3(GPC 3)。 4.嵌合抗原 受体， 其包含抗原结合结构域、 跨膜结构域、 共刺激结构域和胞内信号传导 结构域， 所述 抗原结合结构域包 含权利要求1 ‑3中任一项所述的分离的抗原结合蛋白。 5.免疫效应细胞， 其包 含权利要求 4所述的嵌合 抗原受体。 6.分离的核酸分子， 其编码权利要求1 ‑3中任一项所述的分离的抗原结合蛋白或权利 要求4所述的嵌合 抗原受体。 7.载体， 其包 含权利要求6所述的核酸分子 。 8.细胞， 其包 含权利要求6所述的核酸分子或权利要求7 所述的载体。 9.药物组合物， 其包含权利要求1 ‑3中任一项所述的抗原结合蛋白， 权利要求4中所述 的嵌合抗原受体或权利要求5所述的免疫效应细胞， 以及任选地药 学上可接受的载剂。 10.权利要求1 ‑3中任一项所述的分离的抗原结合蛋白、 权利要求4中所述的嵌合抗原 受体和/或权利要求5中所述的免疫效应细胞在制备药物中的用途， 所述药物用于预防和/ 或治疗疾病和/或病症， 其中所述疾病和/或病症包 含肿瘤。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115521380 A 2靶向GPC3的抗原结 合蛋白 技术领域 [0001]本申请涉及生物医药领域， 具体的涉及一种能够特异性结合GPC3的抗原结合蛋白 及嵌合抗原受体。 背景技术 [0002]Glypican3(GPC3)是一种70kd膜蛋白， 属于Glypicans家族， 高度且集中表达于胚 胎发育期并且呈现组织特异性， 表达之后会被furin酶切割产生N端40kd可溶性部分以及 30kd部分通过GPI分子锚定于细胞膜的C端。 基因组学和功能研究表明， GPC3对于维持Wnt通 路、 Hedgehogs通路的激活中有重要作用， 例如GPC3偶联的硫酸乙酰肝素分子可以增强Wnts 与其受体的结合从而对于维持Wnt通路有重要作用。 GP C3表达于脑、 消化道、 膀胱， 性腺和皮 肤并高度 表达于肝细胞癌表面； 肝癌发生中Wnt 通路起到了重要的作用， 例如20％肝细胞癌 β‑Catenin通路突变以及Frizzled ‑7受体过度表达， GPC3在部分肝细胞癌发生过程中可能 起到了促进作用。 因此， 亟需开发针对GPC 3的治疗药物。 发明内容 [0003]本申请提供了一种靶向GPC3的抗原结合蛋白， 其能够以较高亲和力特异性结合 GPC3。 所述抗原结合蛋白能结合人GPC3和鼠GPC3。 另一方面， 本申请还提供了包含 所述抗原 结合蛋白的嵌合 抗原受体(CAR)， 及CAR ‑T细胞， 所述CAR ‑T细胞对HepG2细胞 具有较强杀伤。 [0004]一方面， 本申请提供了一种分离 的抗原结合蛋白， 其包含抗体重链可变区VH中的 至少一个CDR， 所述VH包 含SEQ ID NO:17所示的氨基酸序列。 [0005]在某些实施方式中， 所述分离的抗原结合蛋白包含HCDR3， 所述HCDR3包含SEQ  ID  NO:10所示的氨基酸序列。 [0006]在某些实施方式中， 所述分离的抗原结合蛋白包含HCDR2， 所述HCDR2包含SEQ  ID  NO:11所示的氨基酸序列。 [0007]在某些实施方式中， 所述分离的抗原结合蛋白包含HCDR1， 所述HCDR1包含SEQ  ID  NO:12所示的氨基酸序列。 [0008]在某些实施方式中， 所述分离的抗原结合蛋白包含HCDR1， HCDR2和HCDR3， 所述 HCDR1包含SEQ  ID NO:12所示的氨基酸序列， 所述HCDR2包含SEQ  ID NO:11所示的氨基酸序 列， 且所述H CDR3包含SEQ ID NO:10所示的氨基酸序列。 [0009]在某些实施方式中， 所述分离的抗原结合蛋白包含H ‑FR1， 所述H ‑FR1的C末端与所 述HCDR1的N末端直接或间接相连， 且所述H ‑FR1包含SEQ ID NO:13所示的氨基酸序列。 [0010]在某些实施方式中， 所述分离的抗原结合蛋白包含H ‑FR2， 所述H ‑FR2位于所述 HCDR1和所述H CDR2之间， 且所述H ‑FR2包含SEQ ID NO:14所示的氨基酸序列。 [0011]在某些实施方式中， 所述分离的抗原结合蛋白包含H ‑FR3， 所述H ‑FR3位于所述 HCDR2和所述H CDR3之间， 且所述H ‑FR3包含SEQ ID NO:15所示的氨基酸序列。 [0012]在某些实施方式中， 所述分离的抗原结合蛋白包含H ‑FR4， 所述H ‑FR4的N末端与所说　明　书 1/28 页 3 CN 115521380 A 3