(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111554688.4 (22)申请日 2021.12.17 (71)申请人 河南师范大学 地址 453007 河南省新乡市牧野区建 设东 路46号 (72)发明人 董文佩　安方杰　常春　王玉宁　 张贵生　 (74)专利代理 机构 新乡市平 原智汇知识产权代 理事务所(普通 合伙) 41139 代理人 路宽 (51)Int.Cl. C07H 19/24(2006.01) C07H 1/00(2006.01) C07F 9/655(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 非天然碱基核苷酸磷酸单酯类前药分子及 其制备方法和应用 (57)摘要 本发明公开了一种非天然碱基核苷酸磷酸 单酯类前药分子及其制备方法和应用， 非天然碱 基核苷酸磷酸单酯类前 药分子的具体结构如下： 其中R为 本发明还具体公开了该非 天然碱基核苷酸磷酸单酯类前药分子的合成方 法及其在制备抗肿瘤细胞活性药物中的应用。 本 发明的非天然碱基核苷酸磷酸单酯类前药分子 合成方法简单、 收率较高、 节约成本， 并且具有良 好的跨膜效率， 其跨膜效率是非天然碱基核苷酸 的8‑10倍， 同时对MCF ‑7细胞、 A375细胞、 Hela细 胞或HepG2癌细胞具有一定的抑制作用。 权利要求书2页 说明书8页 CN 114249788 A 2022.03.29 CN 114249788 A 1.非天然碱基核苷酸磷酸单酯类前 药分子， 其特 征在于具体结构如下： 其中R为 2.根据权利要求1所述的非天然碱基核苷酸磷酸单酯类前药分子， 其特征在于所述非 天然碱基核苷酸磷酸单酯类前药分子中磷酸的一个羟基被正十六烷氧丙基掩蔽， 磷酸的另 一个羟基裸露， 形成磷酸单酯类化合物， 其既具有疏水性又具亲水性， 因此更容易跨越细胞 膜， 具有较高的跨膜效率， 其 跨膜效率是非 天然碱基核苷酸的8 ‑10倍。 3.一种权利要求1所述的非天然碱基核苷酸磷酸单酯类前药分子的制备方法， 其特征 在于具体合成路线为： 权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114249788 A 24.根据权利要求3所述的非天然碱基核苷酸磷酸单酯类前药分子的制备方法， 其特征 在于化合物A的具体合成步骤为： 步骤S1： 将2 ‑氯苯基二 氯膦与HDP OH混合， 加入干燥的二 氯甲烷， 于 ‑78℃加入三乙胺溶 液并搅拌 反应2h， 浓 缩反应液， 柱层析 得到化合物1； 步骤S2： 将化合物2与TPT3加到反应容器中， 再加入四氢呋喃， 于 ‑60℃条件下加入NMI， 搅拌2h后升至室温反应直至原料不再减少， 加去离子水淬灭反应， 萃取时加稀盐酸溶液洗 涤， 二氯甲烷萃取， 收集有机相， 无 水硫酸钠干燥， 浓 缩， 柱层析 得到化合物3； 步骤S3： 将化合物 3溶解在体积比为8:1:1的THF/Py/H2O混合溶剂中， 再加入TBAF于室温 搅拌反应3h， 用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭反应， 二氯甲烷萃取， 收集有机相并浓缩， 柱层析 得到目标产物化 合物A。 5.根据权利要求4所述的非天然碱基核苷酸磷酸单酯类前药分子的制备方法， 其特征 在于步骤S1 中所述2‑氯苯基二氯膦与HDPOH的投料摩尔配比为1:1； 步骤S2中所述化合物2、 TPT3与NMI投料摩尔配比为1:1:5 ‑7； 步骤S3中所述化合物3与TBAF的投料摩尔配比为1:2 ‑ 4。 6.根据权利要求3所述的非天然碱基核苷酸磷酸单酯类前药分子的制备方法， 其特征 在于化合物B的具体合成步骤为： 步骤S1： 将2 ‑氯苯基二 氯膦与HDP OH混合， 加入干燥的二 氯甲烷， 于 ‑78℃加入三乙胺溶 液并搅拌 反应2h， 浓 缩反应液， 柱层析 得到化合物1； 步骤S2： 将化合物2与NaM加到反应容器中， 再加入THF， 于 ‑60℃条件加入NMI， 搅拌2h后 升至室温反应， 反应完全后加水淬灭， 二氯甲烷萃 取， 收集有机相， 无水硫酸钠干燥， 浓缩有 机相进行柱层析 得到化合物4； 步骤S3： 将化合物4溶解在体积比为8:1:1的THF/Py/H2O混合溶剂中， 再加入TBAF于室温 搅拌反应6h， 用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭反应， 二氯甲烷萃取， 收集有机相， 无水硫酸钠干 燥后浓缩有机相， 柱层析 得到目标产物化 合物B。 7.根据权利要求6所述的非天然碱基核苷酸磷酸单酯类前药分子的制备方法， 其特征 在于步骤S1 中所述2‑氯苯基二氯膦与HDPOH的投料摩尔配比为1:1； 步骤S2中所述化合物2、 NaM与NMI投料摩尔配比为1:1:5 ‑7； 步骤S3中所述 化合物4与TBAF的投料摩尔配比为1:3 。 8.权利要求1所述的非天然碱基核苷酸磷酸单酯类前药分子在制备抗肿瘤细胞活性药 物中的应用。 9.根据权利要求8所述的应用， 其特征在于： 所述肿瘤细胞为MCF ‑7细胞、 A375细胞、 Hela细胞或HepG2细胞中的一种或多种。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114249788 A 3