(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111537361.6 (22)申请日 2021.12.15 (71)申请人 中国药科大学 地址 210009 江苏省南京市 鼓楼区童家巷 24号 申请人 新疆医科 大学第一附属医院 (72)发明人 姚文兵　田浤　康彦良　高向东　 张莉　张万里　 (74)专利代理 机构 南京艾普利德知识产权代理 事务所 (特殊普通合伙) 32297 代理人 周海斌 (51)Int.Cl. C12N 15/11(2006.01) A61K 39/00(2006.01)A61K 39/39(2006.01) A61K 47/26(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 自组装DNA四面体及 肽疫苗递送系统 (57)摘要 本发明涉及自组装DNA四面体及肽疫苗递送 系统。 自组装DNA四面体由四条单链DNA组成。 重 组自组装DNA四面体由自组装DNA四面体经重组 获得。 肽疫苗递送系统以重组自组装DNA四面体 为主体， 该主体各条单链DNA的5 ’端或3’端分别 偶联有辅助性表位肽或肽疫苗。 本发 明的递送系 统能够将疫 苗高效驻留到淋巴结， 并被DC细胞摄 取并递呈， 从而有效激活抗原特异性T细胞， 抑制 肿瘤的生长 。 权利要求书2页 说明书9页 序列表3页 附图6页 CN 114181935 A 2022.03.15 CN 114181935 A 1.一种自组装DNA四面体， 由四条单链DNA组成， 其特征是， 第一条单链DNA的序列如SEQ   ID NO:10所示， 第二条单链DNA的序列如SEQ  ID NO:11所示， 第三条单链DNA的序列如SEQ   ID NO:12所示， 第四条 单链DNA的序列如SEQ  ID NO:13所示。 2.一种重组自组装DNA四面体， 其特征是， 由权利要求1所述的自组装DNA四面体经重组 获得， 所述第一条、 第二条、 第三条、 第四条单链DNA 中至少有两条单链DNA经预设规则重组 成为重组单链DNA； 其中， 一条重组单链DNA 中内置基序佐剂， 且其余重组单链DNA 中分别内 置基序佐剂的互补序列或互补序列的一部分。 3.根据权利 要求2所述的重组自组装DNA四面体， 其特征是， 所述基序佐剂为TLR ‑9激动 剂基序佐剂CpG系列， 且基序佐剂的序列如SEQ  ID NO:1‑9之一所示。 4.根据权利要求2所述的重组自组装DNA四面体， 其特 征是， 所述预设规则包括： 在重组之前， 所述第一条、 第二条、 第三条、 第四条单链DNA的序列中， 自5 ’端起第18位 和第19位碱基、 第37位和第38位碱基 分别为折弯处碱基， 这些折弯处碱基将各条单链DNA分 别划分为3段子序列， 每一段子序列分别与其余某条单链DNA中的某一段子序列彼此对应且 碱基互补配对； 重组时， 先选择一条单链DNA的序列以内置基序佐剂， 在该单链DNA的序列中任意选定 碱基位置作为起始位置， 从该起始位置起将该单链DNA的序列替换为预先选定的一条基序 佐剂的序列， 且当该基序佐剂的序列覆盖折弯处碱基时保持折弯处碱基不变， 从而获得内 置基序佐剂的重组单链DNA； 根据该内置基序佐剂的重组单链DNA中各段子序列， 将其余各条单链DNA中对应的子序 列进行碱基调整 使之保持碱基互补配对。 5.根据权利要求 4所述的重组自组装DNA四面体， 其特 征是， 在重组之前以及重组之后， 所述第一条单链DNA的序列结构为： 5 ’ ‑1号子序列 ‑折弯处碱基 ‑2号子序列 ‑折弯处碱 基‑3号子序列 ‑3’； 所述第二条单链DNA的序列结构为： 5 ’ ‑4号子序列 ‑折弯处碱基 ‑2号子序列的互补序 列‑折弯处碱基 ‑5号子序列 ‑3’； 所述第三条单链DNA的序列结构为： 5 ’ ‑4号子序列的互补序列 ‑折弯处碱基 ‑6号子序 列‑折弯处碱基 ‑3号子序列的互补序列 ‑3’； 所述第四条单链DNA的序列结构为： 5 ’ ‑1号子序列的互补序列 ‑折弯处碱基 ‑6号子序列 的互补序列 ‑折弯处碱基 ‑5号子序列的互补序列 ‑3’。 6.一种肽疫苗递送系统， 其特征是， 以权利要求2至5任一项所述的重组自组装DNA四面 体为主体， 该主体各条单链DNA的5 ’端或3’端分别偶联有辅助性表 位肽或肽 疫苗； 所述辅助 性表位肽的序列为SEQ  ID NO:18‑36之一； 所述肽疫苗包括 抗原或抗原 表位。 7.根据权利要求6所述的肽疫苗递送系统， 其特征是， 该主体中至少一条单链DNA的5 ’ 端或3’端偶联有辅助性表 位肽， 且该主体中至少一条单链DNA的5 ’端或3’端偶联有肽 疫苗； 或者， 所述抗原为SIINFEKL、 HER2、 PD ‑L1、 CD47、 CD39、 CD73、 CD24、 KRASG12D、 KRASG12V、 KRASG12C、 CTLA ‑4、 NY‑ESO‑1、 P53之一； 或者， 所述抗原为肿瘤新生抗原； 或者， 所述抗原表 位为TSA、 TA A之一。 8.根据权利要求7 所述的肽疫苗 递送系统， 其特 征是， 所述肿瘤新 生抗原包括Adpgk。 9.含有权利要求6 至8任一项所述肽疫苗 递送系统的组合物。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114181935 A 210.权利要求6至8任一项所述肽疫苗递送系统或权利要求9所述组合物用于制备预防 或治疗肿瘤的药物的用途。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114181935 A 3