(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111573366.4 (22)申请日 2021.12.21 (66)本国优先权数据 202110170782.3 2021.02.08 CN (71)申请人 苏州沙砾生物科技有限公司 地址 201203 上海市浦东 新区张衡路107 7 号2028室 申请人 上海沙砾生物科技有限公司 　 珠海拓域 生物科技有限公司 　 珠海沙砾生物科技有限公司 (72)发明人 武欣　姜桦　刘雅容　赵佩佩　 冯浩　邱凌　于海林　朱舒榕　 李明　尤亚男　王卉　(74)专利代理 机构 上海巅石知识产权代理事务 所(普通合伙) 31309 专利代理师 张琤　孙宋暄 (51)Int.Cl. C12N 5/0783(2010.01) A61K 35/17(2015.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 肿瘤浸润淋巴细胞的制备方法及其用途 (57)摘要 本申请涉及一种肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)的 制备方法及其用途， 具体涉及一种培养肿瘤浸润 淋巴细胞的方法， 其包含： 使源自肿瘤组织且未 经体外扩增的TIL经过至少一个阶段的体外扩 增， 其中， 在至少一个阶段的所述体外扩增中， 使 所述TIL与一种或多种c ‑Myc抑制剂接触。 本申请 还涉及使用肿瘤浸润淋巴细胞预防和/或治疗肿 瘤的方法。 权利要求书1页 说明书57页 附图4页 CN 114908050 A 2022.08.16 CN 114908050 A 1.一种培养肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)的方法， 其包含： 使源自肿瘤组织且未经体外扩增 的TIL经过至少一个阶段的体外扩增， 其中， 在至少一个阶段的所述体外扩增中， 使 所述TIL 与一种或多种c ‑Myc抑制剂接触。 2.一种培 养肿瘤浸润淋巴细胞(TI L)的方法， 其包 含： (A)使源自肿瘤组织且未经体外扩增的第一TIL群与一种或多种T细胞生长因子接触； 其中， 经所述步骤(A)得到第二TI L群； (B)使所述第二TIL群与所述一种 或多种c‑Myc抑制剂接触； 其中， 经所述步骤(B)得到 第三TIL群。 3.根据权利要求1 ‑2中任一项所述的方法， 所述c ‑Myc抑制剂包含能够抑制c ‑Myc与Max 相互作用的物质。 4.根据权利要求1 ‑3中任一项所述的方法， 所述c ‑Myc抑制剂包含结合BET(溴结构域和 超末端结构域)家族成员的物质。 5.根据权利要求1 ‑4中任一项所述的方法， 所述c ‑Myc抑制剂选自以下组的一种或多 种： IZCZ‑3、 KSI‑3716、 Mycro  3和JQ‑1。 6.一种肿瘤浸润淋巴细胞(TI L)， 所述TI L经过权利要求1 ‑5中任一项所述的方法获得。 7.一种组合物， 其包 含权利要求6所述的TI L。 8.一种药物组合物， 其包含权利要求6所述的TIL和/或权利要求7所述的组合物， 以及 任选地药 学上可接受的载体。 9.一种影响肿瘤细胞生长的方法， 包含向受试者施用权利要求6所述的TIL、 权利要求7 所述的组合物和/或权利要求8所述的药物组合物。 10.权利要求6所述的TIL、 权利要求7所述的组合物和/或权利要求8所述的药物组合物 在制备药物中的应用， 所述药物用于预防和/或治疗肿瘤。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114908050 A 2肿瘤浸润淋巴细胞的制备方 法及其用途 技术领域 [0001]本申请涉及 生物医药领域， 具体的涉及一种肿瘤浸润淋巴细胞的制备方法及 其用 途。 背景技术 [0002]使用过继性自体转移肿瘤浸润淋巴细胞治疗肿瘤是一种治疗预后不良患者的有 效方法。 但是 过继性自体转移肿瘤浸润淋巴细胞治疗肿瘤需要大量的肿瘤浸润淋巴细胞。 [0003]因此如何提供一种稳健可靠的肿瘤浸润淋巴细胞的培 养方法是亟 待解决的问题。 发明内容 [0004]本申请提供了一种肿瘤浸润淋巴细胞的培养方法， 所述培养方法具有选自以下组 的一种或多种的效果： 使TIL细胞的数量改善， 使TIL细胞的分泌能力提高， 使TIL细胞的杀 伤能力提高， 使NK细胞比例增加， 改变TIL细胞的比例， 使CD4+细胞的比例增加， 使CD8+细胞 的比例降低， 使中心记忆T细胞比例增加， 使调节性T细胞的比例降低， 使活化T细胞比例增 加， 使肿瘤特异性T细胞比例增 加， 和使干细胞样T细胞比例增 加。 [0005]一方面， 本申请提供一种培养肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)的方法， 其包含： 使源 自肿 瘤组织且未经体外扩增的TIL经过至少一个阶段的体外扩增， 其中， 在至少一个阶段的所述 体外扩增中， 使所述TI L与一种或多种c ‑Myc抑制剂接触。 [0006]在一种实施方式中， 使所述源自肿瘤组织且未经体外扩增的TIL经过第一阶段体 外扩增和第二 阶段体外扩增， 且在所述第二阶段体外扩增中， 使经所述第一 阶段体外扩增 的TIL与所述一种或多种c ‑Myc抑制剂接触。 [0007]在一种实施方式中， 与在 体外扩增阶段未曾与所述c ‑Myc抑制剂接触的相应TIL相 比， 在至少一个阶段的所述体外扩增中与所述c ‑Myc抑制剂 接触过的所述TIL显示出改善的 扩增效果。 [0008]在一种实施方式中， 所述改善 的扩增效果包含选自以下组的一种或多种： 改善的 TIL细胞数量， 改善的T细胞亚群比例， 提高的细胞因子分泌 能力， 提高的NK细胞比例， 和提 高的肿瘤 细胞杀伤能力。 [0009]在一种实施方式中， 所述改善的T细胞亚群比例包含选自以下组的一种或多种： 增 加的CD4+细胞比例， 降低的CD8+细胞比例， 增加的中心记忆T细胞比例， 降低的调 节性T细胞 比例， 增加的活化T细胞比例， 增 加的肿瘤特异性T细胞比例， 和 增加的干细胞样T细胞比例。 [0010]在一种实施方式 中， 所述c ‑Myc抑制剂包 含能够抑制c ‑Myc与Max相互作用的物质。 [0011]在一种实施方式中， 所述c ‑Myc抑制剂包含能够以约200 μM或更低的IC50值抑制c‑ Myc与Max结合的物质。 [0012]在一种实施方式中， 所述c ‑Myc抑制剂包含能够以约10 μM或更低的KD值结合c‑Myc 的物质。 [0013]在一种实施方式中， 所述c ‑Myc抑制剂选自以下组的一种或多种： 核酸分子、 多肽说　明　书 1/57 页 3 CN 114908050 A 3