(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202180004408.4 (22)申请日 2021.12.0 3 (66)本国优先权数据 PCT/CN2020/133943 2020.12.04 CN (85)PCT国际申请进入国家阶段日 2022.01.05 (86)PCT国际申请的申请数据 PCT/CN2021/13 5336 2021.12.0 3 (71)申请人 深圳市亦 诺微医药 科技有限公司 地址 518110 广东省深圳市龙华区观光路 1301号银星智界2号楼10楼 (72)发明人 陈晓庆　刘园园　周国瑛　 (74)专利代理 机构 广州文冠倪律知识产权代理 事务所(普通 合伙) 44348 代理人 何锦标　张玉颖(51)Int.Cl. C12N 7/01(2006.01) C12N 15/38(2006.01) A61K 35/763(2015.01) A61K 48/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 用于脑肿瘤治 疗的溶瘤性 I型单纯疱疹病毒 (57)摘要 本发明公开了一种用于脑肿瘤治疗的经基 因工程化的溶瘤性HSV ‑1病毒， 其缺乏两份拷贝 的γ34.5基因和内部反向重复区并且任选地将 免疫刺激和/或免疫治疗基因并入。 所述溶瘤性 HSV‑1病毒表现出优异 的抗肿瘤活性， 特别是在 脑肿瘤中。 本发明还公开了一种包含溶瘤性HSV ‑ 1病毒和药学上可接受的载体的药物组合物， 以 及使用所述药物组合物用于脑肿瘤治 疗的方法。 权利要求书2页 说明书23页 附图4页 CN 114375331 A 2022.04.19 CN 114375331 A 1.一种溶瘤性 I型单纯疱疹病毒 （oHSV ‑1） ， 其包含经修饰的基因 组， 其中所述 修饰包含 a) 基因组的末端重复序列中的 γ34.5基因的拷贝的改变， 使得γ34.5基因的所述拷 贝不能表达功能性 ICP34.5蛋白， 以及 b) 基因组的内部反向重复区的缺失， 使得双拷贝基因中的每一个的一份拷贝和内部 反向重复区内的重复的非编码序列的一份拷贝缺失， 其中所述双拷贝基因包含编码ICP0、 ICP4、 ICP34.5、 ORF  P和ORF O的基因， 以及 其中基因组的UL和US成分中的所有单拷贝基因都是完整的， 使得所有单拷贝基因能够 表达各自的功能性蛋白。 2.根据权利要求1所述的oHSV ‑1， 其中所述改变包含 γ34.5基因的所述拷贝的全部或 部分的编码区或调节区的缺失。 3.根据权利要求1或2所述的oHSV ‑1， 其中所述重复的非编码序列包括ICP0的内含子、 LAT结构域和 “a”序列。 4.根据权利要求1或2所述的oHSV ‑1， 其中UL和US成分中的所有单拷贝基因包括UL成分 中的UL1至UL56基因和US成分中的US1至US12基因。 5.根据权利要求1至4中任一项所述的oHSV ‑1， 其中HSV ‑1选自F毒株、 KOS毒株和17毒 株。 6.根据权利要求1至5中任一项所述的oHSV ‑1， 其中HSV ‑1具有原型 （P） 的基因组异构 体。 7.根据权利要求1至6中任一项所述的oHSV ‑1， 其中所述内部反向重复区的缺失导致F 毒株的基因 组中核苷酸1 17005至132096的切除。 8.根据权利要 求6所述的oHSV ‑1， 其中所述内部反向重复区的缺失从UL成分中最后一个 基因的终止密码子开始至US成分中第一个 基因的启动子 。 9.根据权利要求8所述的oHSV ‑1， 其中UL成分中最后一个 基因是UL56基因。 10.根据权利要求8或9所述的oHSV ‑1， 其中US成分中第一个 基因是US1基因。 11.根据权利要求1至10中任一项所述的oHSV ‑1， 其中将编码免疫刺激剂和/或免疫治 疗剂的异源性核酸序列并入所述oHSV ‑1， 其中所述并入不干扰HSV ‑1基因组的天然基因的 表达。 12.根据权利要求11所述的oHSV ‑1， 其中将编码免疫刺激剂和免疫治疗剂的异源性核 酸序列并入所述 oHSV‑1。 13.根据权利要求11或12所述的oHSV ‑1， 其中所述免疫刺激剂选自GM ‑CSF、 IL‑2、 IL‑ 12、 IL‑15、 IL‑24和IL‑27。 14.根据权利要求13所述的oHSV ‑1， 其中所述免疫刺激剂是I L‑12。 15.根据权利 要求11至14 中任一项所述的oHSV ‑1， 其中所述免疫治疗剂是抗PD ‑1剂、 抗 CTLA‑4剂或两者。 16.根据权利要求15所述的oHSV ‑1， 其中所述免疫 治疗剂是抗P D‑1剂。 17.根据权利要求11至16中任一项所述的oHSV ‑1， 其中所述异源性核酸序列被并入所 述内部反向重复区和/或UL成分中的UL3和UL4基因之间。 18.根据权利要求11至17中任一项所述的oHSV ‑1， 其中将编码IL ‑12和抗PD ‑1剂的异源 性核酸序列并入所述 oHSV‑1。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114375331 A 219.根据权利要求18所述的oHSV ‑1， 其中编码IL ‑12的异源性核酸序列被并入所述 内部 反向重复区， 并且编码抗P D‑1剂的异源性核酸序列被并入UL成分中的UL3和UL4基因之间。 20.一种用于肿瘤治疗的药物组合物， 其包含有 效量的权利要求1至18的任一项所述的 oHSV‑1和药学上可接受的载体。 21.根据权利要求20所述的药物组合物， 其中所述肿瘤是脑肿瘤。 22.根据权利要求21所述的药物组合物， 其中所述脑肿瘤选自神经胶质瘤、 胶质母细胞 瘤、 少突神经胶质瘤、 星形细胞瘤、 室管膜瘤、 原始神经外胚层肿瘤、 非典型脑膜瘤、 恶性脑 膜瘤和神经母细胞瘤。 23.根据权利要求2 2所述的药物组合物， 其中所述脑肿瘤是多形性胶质母细胞瘤。 24.权利要求1至18的任一项所述的oHSV ‑1在制备用于肿瘤治疗的药物中的应用。 25.根据权利要求24所述的应用， 其中所述肿瘤是脑肿瘤。 26.根据权利要求25所述的应用， 其中所述脑肿瘤选自神经胶质瘤、 胶质母细胞瘤、 少 突神经胶质瘤、 星 形细胞瘤、 室管膜瘤、 原始神经外胚层肿瘤、 非典型脑膜瘤、 恶性脑膜瘤和 神经母细胞瘤。 27.根据权利要求25所述的应用， 其中所述脑肿瘤是多形性胶质母细胞瘤。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114375331 A 3