(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111551555.1 (22)申请日 2021.12.17 (71)申请人 新乡医学院 地址 453003 河南省新乡市金穗大道6 01号 (72)发明人 韩涛　周祥　高博　郝茜　李秀敏　 仝静　王梦欣　 (74)专利代理 机构 上海助之鑫知识产权代理有 限公司 31328 专利代理师 陈详 (51)Int.Cl. A61K 31/502(2006.01) A61P 35/00(2006.01) C12Q 1/6886(2018.01) (54)发明名称 奥拉帕尼在诱 导核仁应 激中的应用 (57)摘要 本发明涉及生物医药技术， 尤其涉及奥拉帕 尼在诱导核仁应激中的应用。 具体地， 本发明公 开了奥拉帕尼通过抑制核糖体RNA(rRNA)前体的 合成来触发核仁应激， 从而增强核糖体蛋白(RP) RPL5和RPL11以及MDM2之间的相互作用， 敲低 RPL5和RPL11抑制了奥拉帕尼诱导的p53激活。 奥 拉帕尼通过激活p53能有效抑制乳腺癌和结直肠 癌细胞的存活和增殖， 同时揭示了奥拉帕尼的耐 药性的潜在分子机制， 也为使用核仁应激 ‑RPs‑ p53轴为对奥拉帕尼耐药的癌症提供了有希望的 治疗靶点。 权利要求书1页 说明书10页 附图7页 CN 114796226 A 2022.07.29 CN 114796226 A 1.一种奥拉帕尼的用途， 其特征在于， 用于制备药物或试剂， 所述药物或试剂用于选自 下组的一种或多种用途： (1)抑制rRNA前体合成； (2)降低rRNA 表达； (3)诱导核仁应激； (4)稳定或激活p5 3； (5)增强核糖 体蛋白(RP)RPL5和RPL1 1以及MDM2之间的相互作用； 和/或 (6)杀伤携带野生型p5 3的癌细胞或治疗 野生型p5 3的癌症。 2.如权利要求1所述的用途， 其特征在于， 所述癌细胞或癌症选自： 卵巢癌、 乳腺癌、 结 直肠癌、 胰腺癌、 胃癌、 肝癌、 肾脏肿瘤、 肺癌、 小肠癌、 骨癌、 前列腺癌、 大肠癌、 宫颈癌、 淋巴 癌、 肾上腺肿瘤、 膀胱肿瘤、 或其组合； 优选地 来自BRCA1/2缺陷的肿瘤。 3.一种抑制rRNA前体合成、 降低rRNA表达或诱导核仁应激的方法， 其特征在于， 包括步 骤： 施用奥拉帕尼。 4.一种稳定或激活p53、 或调控RPL5和RPL11以及MDM2之间相互作用、 或杀伤携带野生 型p53的癌细胞或治疗 野生型p5 3的癌症的方法， 其特 征在于， 包括 步骤： 施用奥拉帕尼。 5.一种rRNA前体、 rRNA、 核仁应激或其检测试剂的用途， 其特征在于， 用于制备检测奥 拉帕尼耐药性的诊断试剂或试剂盒。 6.如权利要求5所述的用途， 其特征在于， 所述的奥拉帕尼耐药性为癌症或癌症细胞对 奥拉帕尼的耐药性。 7.如权利要求5所述的用途， 其特征在于， 所述检测试剂包括检测rRNA前体水平、 rRNA 水平、 核仁应激发生、 RPL5和RPL1 1表达水平、 和/或p5 3水平和活性的试剂。 8.如权利 要求5所述的用途， 其特征在于， 所述检测试剂包括r RNA前体、 rRNA、 核仁应激 的特异性结合分子、 抗体、 引物或引物对、 探针或芯片(如核酸芯片或蛋白质芯片)。 9.如权利要求1所述的用途， 其特征在于， 所述诊断试剂包括抗体、 引物、 探针、 测序文 库、 核酸芯片(如DNA芯片)或蛋白质芯片。 10.一种确定奥拉帕尼耐药性方法， 其特征在于， 所述方法包括检测核仁应激发生的步 骤和/或检测rRNA前体或rRNA的含量的步骤。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114796226 A 2奥拉帕尼在诱导核 仁应激中的应用 技术领域 [0001]本发明涉及生物医药技术领域， 更具体地涉及奥拉帕尼在诱导核仁应激中的应 用。 背景技术 [0002]基因突变在肿瘤发生中起重要作用。 几个DNA修复基因突变与许多不同类型的癌 症起源密切相关。 BRCA1和BRCA2都是涉及同源重组(HR)的著名且至关重要的DNA修复基因， 它们被细胞广泛用于精确修复有害的双链DNA断裂。 BRCA1/2的种系突变在乳腺癌、 卵巢癌 和许多其他癌症中高度流行， 包括淋巴瘤、 白血病、 黑色素瘤、 前列腺癌、 胰腺癌、 胃癌和结 直肠癌等。 多(ADP ‑核糖)聚合 酶‑1(PARP)‑1)是一种普遍存在的核酶， 参与各种生物过程的 调节， 尤其在DNA修复、 细胞周期、 细胞凋亡等过程中。 [0003]最近， 许多报告表明PARP在来自癌症患者的各种癌细胞系和肿瘤组织中显着上 调。 此外， 越来越多的证据也表明， PARP是治疗 包含BRCA1/2缺陷的肿瘤患者的关键目标。 [0004]在2014‑2018年间， 首个PARP抑制剂奥拉帕尼先后获批用于携带BRCA1/2突变的晚 期卵巢癌和晚期乳腺癌患者治疗。 研究者认为奥拉帕尼是通过不同的机制达到其治疗效果 的。 首先， 已经提出PARPi通过阻止PARylation反应抑制癌细胞增殖。 更重要的是， 它可以将 PARP‑1蛋白捕获到DNA损伤位点， 从而在PARP ‑1和染色质中的基因组DNA之间建立稳定的相 互作用。 随后， PARPi ‑PARP1‑DNA复合物通过破坏复制叉的稳定性来干扰DNA复制， 从而导致 基因组不稳定和细胞死亡。 然而， 由于测量方法 的原因， PARP ‑1捕获的定义是不准确的。 直 到最近， Zandarashvili等人通过使用氢/氘交换质谱结合X射线结构的方法揭示了PARPi与 PARP‑1结合的分子机理。 他们发现PARPi扰乱了DNA断裂处的PARP ‑1变构。 同源重组(HR)修 复在基因组稳定性维持中起着关键的重要作用， 同源重组缺陷(HRD)会损害基因组的稳定 性， 导致癌细胞丢失或抑制DNA修复蛋白PARP ‑14。 因此， 第二个公认的机制是， 由于B RCA种 系突变， Olapar ib通过在HRD细胞中积累DNA损伤 来引起合 成致死。 综上所述， 所有这些发现 表明Olapar ib可能通过影响基因组稳定性来诱导细胞周期停滞和/或细胞凋亡。 然而， 其潜 在分子机制仍未完全了解。 发明内容 [0005]本发明揭示了 奥拉帕尼处理导致p53稳定并以剂量和时间依赖性方式激活其下游 靶基因。 机制研 究发现， 奥拉帕尼通过抑制核糖体RNA(rRNA)前体的合成来触发核仁应激， 从而增强核糖体蛋白(RP)RPL5和RPL11以及MDM2之间的相互作用。 敲低RPL5和RPL11抑制了 奥拉帕尼诱导的p53激活。 更重要的是， 奥拉帕尼通过激活p53能有效抑制乳腺癌和结直肠 癌细胞的存活和增殖。 总之， 本发明表明奥拉帕尼能激活核仁应激 ‑核糖体蛋白 ‑p53通路， 并提示rRNA生物合成是PARPi的新靶点。 [0006]本发明的第一方面， 提供了一种奥拉帕尼的用途， 用于制备药物或试剂， 所述药物 或试剂用于 选自下组的一种或多种用途：说　明　书 1/10 页 3 CN 114796226 A 3