(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202110870730.7 (22)申请日 2021.07.3 0 (66)本国优先权数据 2020107527 73.0 2020.07.3 0 CN (71)申请人 香雪生命科 学技术 （广东） 有限公司 地址 519031 广东省珠海市横琴新区环岛 东路3000号2715办公 (72)发明人 李懿　陈少沛　孙含丽　 (74)专利代理 机构 上海专利商标事务所有限公 司 31100 代理人 陈静 (51)Int.Cl. C07K 14/725(2006.01) C07K 19/00(2006.01) C12N 15/12(2006.01)C12N 15/62(2006.01) C12N 15/85(2006.01) C12N 5/10(2006.01) A61K 38/17(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种识别AFP的高亲和力TCR (57)摘要 本发明提供了一种T细胞受体(TCR)， 其具有 结合KWVESIFLIF ‑HLA A2402复合物的特性； 并且 所述TCR对所述KWVESIFLIF ‑HLA A2402复合物的 结合亲和力是野生型TCR对KWVESIFLIF ‑HLA  A2402复合物的结合亲和 力的至少2倍。 本发明还 提供了此类TCR与治疗剂的融合分子。 此类TCR可 以单独使用， 也可与治疗剂联用， 以靶向呈递 KWVESIFL IF‑HLA A2402复合物肿瘤细胞。 权利要求书4页 说明书25页 序列表28页 附图13页 CN 114057864 A 2022.02.18 CN 114057864 A 1.一种T细 胞受体(TCR)， 所述T细 胞受体包含TCRα 链可变域和TCRβ 链可变域， 其特征在 于， 其具有结合KWVESIFLIF ‑HLA A2402复合物的活性， 并且所述TCRα链可变域的氨基酸序 列与SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列有至少90％的序列同源性和所述TCRβ 链可变域的氨基 酸序列与SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列有至少90％的序列同源性。 2.如权利要求1所述的T细胞受体， 其特征在于， 所述TCR与KWVESIFLIF ‑HLA A2402复合 物的亲和力是野生型TCR的至少2倍。 3.如权利要求1所述的T细胞受体， 其特 征在于， 所述TCR是 可溶的。 4.如权利要求1所述的T细胞受体， 其特征在于， 所述TCR为α β异质二聚TCR； 优选地， 所 述TCR具有α 链恒定区序列TRAC *01和β 链恒定区序列TRBC1* 01或TRBC2* 01。 5.如权利 要求1所述的T细 胞受体， 其特征在于， 所述TCRα 链可变域的3个CDR区(互补决 定区)的基准序列如下， CDR1α： DSAIYN CDR2α： IQSSQRE CDR3α： AVRRRNYGQNFV， 并且CDR3α 含有至少一个下列突变： 突变前的残基 突变后的残基 CDR3α 的第1位A G或S CDR3α 的第2位V A或G或I或L或S或T CDR3α 的第3位R I或T或V CDR3α 的第4 位R W或Y或N或M CDR3α 的第5位R Y CDR3α 的第6位 N E或H或Q或R或T或I或V或M CDR3α 的第7位Y L或P或W或V 优选地， 所述CDR3α 中氨基酸 突变包含： 突变前的残基 突变后的残基 CDR3α 的第4 位R Y。 6.如权利 要求1所述的T细胞受体， 其特征在于， 所述TCRα 链可变域的氨基酸序列与SEQ   ID NO:1所示的氨基酸序列有至少95％的序列同源性； 和所述TCRβ 链可变域的氨基酸序列 与SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列有至少95％的序列同源性。 7.如权利要求1所述的T细胞受体， 其特 征在于， 所述TCRβ 链可变域的3个CDR为： CDR1β： SGHDT； CDR2β： YYEEEE； 和 CDR3β： AS SLIAQNHNEQF。 8.如权利 要求1所述的T细胞受体， 其特征在于， 所述TCRβ 链可变域的氨基酸序列 为SEQ  ID NO:2。 9.如权利要求1所述的T细胞受体， 其特征在于， 所述TCRα链可变域的CDR3α选自 GGVYRNYGQ NFV、 AVTYRQYGQ NFV和AVIYRNYGQ NFV。 10.如权利要求1所述的T细胞受体， 其特 征在于， 所述TCR具有选自下组的CDR: CDR编号 α‑CDR1α‑CDR2α‑CDR3 β‑CDR1β‑CDR2β‑CDR3 1 DSAIYNIQSSQREGGVYRNYGQ NFVSGHDT YYEEEEASSLIAQNHNEQF权　利　要　求　书 1/4 页 2 CN 114057864 A 22 DSAIYNIQSSQREAVTYRQYGQ NFVSGHDT YYEEEEASSLIAQNHNEQF 3 DSAIYNIQSSQREAVIYRNYGQ NFVSGHDT YYEEEEASSLIAQNHNEQF 4 DSAIYNIQSSQRESAIWRNYGQNFVSGHDT YYEEEEASSLIAQNHNEQF 5 DSAIYNIQSSQREAVIWRNYGQNFVSGHDT YYEEEEASSLIAQNHNEQF 6 DSAIYNIQSSQREAVIWRQYGQNFVSGHDT YYEEEEASSLIAQNHNEQF 7 DSAIYNIQSSQREAVIYRQYGQ NFVSGHDT YYEEEEASSLIAQNHNEQF 8 DSAIYNIQSSQREGSIYRNYGQ NFVSGHDT YYEEEEASSLIAQNHNEQF 9 DSAIYNIQSSQREAVRRRTLGQNFVSGHDT YYEEEEASSLIAQNHNEQF 10 DSAIYNIQSSQREAVRRREVGQNFVSGHDT YYEEEEASSLIAQNHNEQF 11 DSAIYNIQSSQREAVRRREPGQNFVSGHDT YYEEEEASSLIAQNHNEQF 12 DSAIYNIQSSQREAVRRRQVGQNFVSGHDT YYEEEEASSLIAQNHNEQF 13 DSAIYNIQSSQREAVRRRNYGQNFVSGHDT YYEEEEASSLIAQNHALWT 14 DSAIYNIQSSQREGLIWRNYGQNFVSGHDT YYEEEEASSLIAQNHNEQF 15 DSAIYNIQSSQREGAIYRNYGQ NFVSGHDT YYEEEEASSLIAQNHNEQF 16 DSAIYNIQSSQREAVRRRNYGQNFVSGHDT YYEEEEASSLIAQNHAMWT 17 DSAIYNIQSSQREAVINYRYGQNFVSGHDT YYEEEEASSLIAQNHNEQF 18 DSAIYNIQSSQREAVRRRHWGQNFVSGHDT YYEEEEASSLIAQNHNEQF 19 DSAIYNIQSSQREGTIWRNYGQNFVSGHDT YYEEEEASSLIAQNHNEQF 20 DSAIYNIQSSQREGIIYRNYGQNFVSGHDT YYEEEEASSLIAQNHNEQF 21 DSAIYNIQSSQREGAIWRNYGQNFVSGHDT YYEEEEASSLIAQNHNEQF 22 DSAIYNIQSSQREGVIWRNYGQNFVSGHDT YYEEEEASSLIAQNHNEQF 23 DSAIYNIQSSQREAIIWRNYGQNFVSGHDT YYEEEEASSLIAQNHNEQF 24 DSAIYNIQSSQREASIWRNYGQNFVSGHDT YYEEEEASSLIAQNHNEQF 25 DSAIYNIQSSQREAVIWRTYGQNFVSGHDT YYEEEEASSLIAQNHNEQF 26 DSAIYNIQSSQREGAVWRNYGQNFVSGHDT YYEEEEASSLIAQNHNEQF 27 DSAIYNIQSSQREAVRMRIYGQ NFVSGHDT YYEEEEASSLIAQNHNEQF 28 DSAIYNIQSSQREAVRMRVYGQ NFVSGHDT YYEEEEASSLIAQNHNEQF 29 DSAIYNIQSSQREAVRRRMWGQNFVSGHDT YYEEEEASSLIAQNHNEQF。 11.如权利 要求1所述的T细 胞受体， 其特征在于， 所述TCR包含( ⅰ)TCRα 链可变域和除跨 膜结构域以外的全部或部分TCRα 链恒定区； 和( ⅱ)TCRβ 链可变域和除跨膜结构域以外的全 部或部分TCRβ 链恒定区。 12.如权利 要求1所述的T细胞受体， 其特征在于， 所述TCR包含α 链恒定区与β 链恒定区， 并且所述α 链恒定区与β 链恒定区之间含有人工链间二硫键； 优选地， 在所述TCRα 与β 链的恒 定区之间形成人工链间二硫键的半胱氨酸残基取代了 选自下列的一组或多组位 点： TRAC*01外显子1的Thr48和TRBC1* 01或TRBC2* 01外显子1的Ser57； TRAC*01外显子1的Thr45和TRBC1* 01或TRBC2* 01外显子1的Ser7 7； TRAC*01外显子1的Tyr10和TRBC1* 01或TRBC2* 01外显子1的Ser17； TR