(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202110112912.8 (22)申请日 2021.06.29 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 113181136 A (43)申请公布日 2021.07.3 0 (73)专利权人 青岛大学附属医院 地址 266000 山东省青岛市江苏路16号 (72)发明人 任贺　高超　赵潇　 (74)专利代理 机构 北京中普鸿儒知识产权代理 有限公司 1 1822 专利代理师 林桐苒 (51)Int.Cl. A61K 47/36(2006.01) A61K 9/51(2006.01) A61K 9/06(2006.01)A61K 9/127(2006.01) A61K 47/18(2006.01) A61K 31/7105(2006.01) A61P 35/00(2006.01) 审查员 甄静茹 (54)发明名称 一种装载和递送核酸的复合颗粒及其制备 方法和用途 (57)摘要 本发明属于RNA药物技术领域， 涉及一种装 载和递送核酸的复合颗粒及其制备方法和用途。 所述的复合颗粒在水凝胶内部包封脂质体， 在所 述的脂质体内部包封所述的核酸， 所述的核酸为 DNA或RNA的整体或片段。 利用本发明的装载和递 送核酸的复合颗粒及其制备方法和用途， 能够使 制备得到的复合颗粒在用于肿瘤， 尤其是胰腺癌 的免疫增效治 疗时， 具有更好的治 疗效果。 权利要求书1页 说明书10页 序列表2页 附图8页 CN 113181136 B 2022.09.16 CN 113181136 B 1.一种装载和递送核酸的复合颗粒， 其特征在于： 所述的复合颗粒在水凝胶内部包封 脂质体， 在所述的脂质体内部包封所述的核酸， 所述的核酸为SEQ  ID NO.1所示序列的针对 胰腺癌的免疫 治疗的mRNA。 2.根据权利要求1所述的复合颗粒， 其特征在于： 所述的水凝胶为天然高分子化合物形 成的水凝胶， 所述的天然高分子化 合物选自壳聚糖、 透明质酸、 海藻酸中的一种或几种。 3.根据权利要求1所述的复合颗粒， 其特征在于： 所述的脂质体为阳离子脂质体， 选自 氯化三甲基‑2,3‑二油烯氧基丙基铵和/或溴化 三甲基‑2,3‑二油酰氧基丙基铵。 4.根据权利要求1所述的复合颗粒， 其特征在于： 所述的复合颗粒为纳米复合颗粒， 平 均粒径为80 ‑150nm。 5.根据权利要求1所述的复合颗粒， 其特征在于： 所述的复合颗粒中所述的水凝胶的平 均厚度为80 ‑150mm， 所述的脂质体的平均厚度为80 ‑150mm。 6.根据权利要求1所述的复合颗粒， 其特征在于： 所述的复合颗粒中所述的水凝胶、 所 述的脂质体、 所述的核酸的质量比为20 00‑3000:0.5‑2:1。 7.一种根据权利要求1 ‑6之一所述的复合颗粒的制备方法， 其特征在于， 所述的制备方 法包括如下步骤： （1） 制备 所述的脂质体； （2） 将所述的核酸包封在所述的脂质体中； （3） 制备 所述的水凝胶； （4） 将包封 了所述的核酸的所述的脂质体包封在所述的水凝胶中。 8.根据权利要求1 ‑6之一所述的复合颗粒用于制备治疗 胰腺癌的药物的用途。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 113181136 B 2一种装载和递 送核酸的复合颗粒 及其制备方 法和用途 技术领域 [0001]本发明属于RNA药物技术领域， 涉及一种装载和递送核酸的复合颗粒及其制备方 法和用途。 背景技术 [0002]胰腺癌是一种高度恶性的消化系统肿瘤， 手术、 放化疗等传统治疗手段对于胰腺 癌患者生存周期的延 长十分有限， 而且增加了患者对药物的毒性反应。 近些年来， 肿瘤免疫 治疗技术的发展为改善胰腺癌患者预后开拓了一种全新的途径和方法。 但是， 免疫治疗存 在明显的个体差异， 如何提高免疫治疗的应答率及降低免疫治疗的系统毒性， 已经成为 目 前肿瘤免疫 治疗的关键问题。 [0003]胰腺癌肿瘤免疫微环境中， 免疫细胞多数处于数量与功能的失衡状态， 通常表现 为具有免疫抑制作用的肿瘤相关巨噬细胞(Tumor ‑associate d macrophages,TAMs)、 调节 性T细胞(Regul atory T cells,Tregs)和髓源性抑制 细胞(Myeloid  derived suppressor   cells,MDSCs)功能活跃且大量存在； 而通常表现为具有抗肿瘤作用的CD4+、 CD8+效应T细 胞、 NK细胞和D C细胞数量减少， 并呈现无功能或不 成熟的表型和状态。 而肿瘤微环 境中免疫 抑制细胞 是影响肿瘤发生及预后的关键因素。 [0004]肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)根据活化状态和发挥功能不同， 可分为M 1型即经典活化 型巨噬细胞(classically  activated  macrophage)和M2型即替代活化型巨噬细胞 (alternatively  activated  macrophage)。 M1型巨噬细胞主要 参与炎症反应和抗肿瘤免疫 过程； M2型巨噬细胞表现为刺激血管形成， 降解细胞外基质， 促进肿瘤发生远端转移。 此外， 调节性T细胞(Tregs)能够分泌抑制性细胞因子(TGF ‑β、 IL‑10等)抑制效应T细胞的活化和 功能， 介导肿瘤相关抗原免疫耐受， 使肿瘤细胞逃避免疫监视。 研究表明， 在胰腺癌肿瘤的 转移及复发过程中， M2表型的TAMs以及 Tregs数量显著增加， 是预后差的重要指标。 因此， 通 过药物促进肿瘤微环境中M2型巨噬细胞向M1型巨噬细胞的极化， 以及降低Tregs细胞数量， 重塑肿瘤免疫微环境， 有望成为 提高胰腺癌预后的一种有效方法。 [0005]研究表明， IRF5在巨噬细胞的极化中具有重要的调控作用， 能够将M2型巨噬细胞 重新极化成M1型巨噬细胞， 从而抑制肿瘤发生和转移。 此外， 趋化因子配体5(CCL5)是一类 调节正常T细胞表达和分泌的细胞因子， 又称为活化T细胞表达和分泌的调节因子 (RANTES)。 CCL5/CCR5的相互作用可能以多种方式促进肿瘤的发生， 刺激血管生成， 调节细 胞外基质， 诱导补充基质细胞和炎症细胞及参与免疫逃逸机制。 因此， 提高肿瘤微环境中 IRF5的表达量以及降低CCL5的表达量， 促进M2型巨噬细胞向M1型巨噬细胞极化， 降低Tregs 的招募， 重塑肿瘤免疫微环境， 有助于降低胰腺癌发生和转移。 [0006]RNA(如mRNA)作为基因传递分子， 携带遗传信息， 指导蛋白质合成， 对蛋白质的翻 译效率进行上调或下调， 解 决蛋白“不可成药 ”难题。 近些年来， 基于RNA(mRNA、 siRNA)的药 物在癌症免疫治疗中的应用越来越广泛。 但是， RNA极易被环境中富含的核酸酶降解 从而失 去活性。 因此， 需要一种载体将RNA输送到靶点避免其被降解。说　明　书 1/10 页 3 CN 113181136 B 3