(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202110736045.5 (22)申请日 2021.06.30 (71)申请人 益科思特 （北京） 医药 科技发展 有限 公司 地址 100085 北京市海淀区开拓路5号3层 B306 (72)发明人 袁清安　白丽莉　孟庆武　李艺佳　 赵立坤　李延虎　 (74)专利代理 机构 北京路浩知识产权代理有限 公司 11002 专利代理师 商秀玲 (51)Int.Cl. C07K 16/30(2006.01) C07K 16/46(2006.01) A61K 39/395(2006.01)A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种结合TROP2的抗体及靶向TROP2和CD3的 双特异性 抗体及其制备方法与应用 (57)摘要 本发明涉及基因工程抗体技术领域， 具体涉 及一种结合TROP2的抗体及靶向TROP2和CD3的双 特异性抗体及其制备方法与应用。 本发明提供的 TROP2抗体具有良好的结合TROP2的能力， 亲和 力 高； 结合TROP2和CD3的双特异性抗体同时具有优 异的抗TROP2和抗CD3抗体的生物学功能， 能够在 肿瘤细胞和免疫效应细胞之间搭建桥梁， 有效激 活免疫效应细胞和导向性免疫反应， 显著增强了 免疫细胞杀伤肿瘤细胞的功效， 同时最大程度地 降低了ADCC效应， 具有较高的安全性， 在肿瘤的 免疫治疗中具有较好的应用前 景。 权利要求书4页 说明书16页 序列表21页 附图6页 CN 115536747 A 2022.12.30 CN 115536747 A 1.一种TROP2抗体， 其特征在于， 包括重链可变区和轻链可变区， 所述重链可变区的 CDR1、 CDR2、 CDR3分别具有SEQ  ID NO.1‑3所示的氨基酸序列， 或者， 其分别具有以SEQ  ID  NO.1‑3所示的氨基酸序列为参考序列、 含有如下突变中的一种或多种突变的组合的氨基酸 序列： (1)SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的第1位S突变为 N； (2)SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的第4 位P突变为R、 K或G； (3)SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列的第1位P突变为H、 A； (4)SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列的第2位 N突变为E； 所述轻链可变区的CDR1、 CDR2和CDR3分别具有SEQ  ID NO.4‑6所示的氨基酸序列， 或 者， 其分别具有以SEQ  ID NO.4‑6所示的氨基酸序列为参考序列， 含有如下突变中的一种或 多种突变的组合的氨基酸序列： (1)SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列的第5位G突变为 N或E； (2)SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列的第7位S突变为R或K； (3)SEQ ID NO.5所示的氨基酸序列的第1位A突变为R； (4)SEQ ID NO.5所示的氨基酸序列的第3位S突变为G、 H或R； (5)SEQ ID NO.5所示的氨基酸序列的第4 位S突变为K。 2.一种TROP2抗体， 其特征在于， 包括重链可变区和轻链可变区， 所述重链可变区的 CDR1具有SEQ  ID NO.1、 7任一所示的氨基酸序列， CDR2具有SEQ  ID NO.2、 8、 9任一所示的氨 基酸序列， CDR3具有SEQ  ID NO.3、 10任一所示的氨基酸序列； 轻链可变区的CDR1具有SEQ  ID NO.4、 11、 12任一所示的氨基酸序列， CDR2具有SEQ  ID  NO.5、 13、 14任一所示的氨基酸序列， CDR3具有SEQ  ID NO.6、 15任一所示的氨基酸序列； 优选地， 所述重链可变区的CDR为如下任一种： (1)CDR1具有SEQ  ID NO.1所示的氨基酸序列， CDR2具有SEQ  ID NO.2所示的氨基酸序 列， CDR3具有SEQ  ID NO.3所示的氨基酸序列； (2)CDR1具有SEQ  ID NO.7所示的氨基酸序列， CDR2具有SEQ  ID NO.9所示的氨基酸序 列， CDR3具有SEQ  ID NO.3所示的氨基酸序列； (3)CDR1具有SEQ  ID NO.7所示的氨基酸序列， CDR2具有SEQ  ID NO.8所示的氨基酸序 列， CDR3具有SEQ  ID NO.3所示的氨基酸序列； (4)CDR1具有SEQ  ID NO.7所示的氨基酸序列， CDR2具有SEQ  ID NO.8所示的氨基酸序 列， CDR3具有SEQ  ID NO.10所示的氨基酸序列； 轻链可变区的CDR为如下任一种： (1)CDR1具有SEQ  ID NO.4所示的氨基酸序列， CDR2具有SEQ  ID NO.5所示的氨基酸序 列， CDR3具有SEQ  ID NO.6所示的氨基酸序列； (2)CDR1具有SEQ  ID NO.4所示的氨基酸序列， CDR2具有SEQ  ID NO.13所示的氨基酸序 列， CDR3具有SEQ  ID NO.15所示的氨基酸序列； (3)CDR1具有SEQ  ID NO.11所示的氨基酸序列， CDR2具有SEQ  ID NO.13所示的氨基酸 序列， CDR3具有SEQ  ID NO.15所示的氨基酸序列； (4)CDR1具有SEQ  ID NO.12所示的氨基酸序列， CDR2具有SEQ  ID NO.13所示的氨基酸 序列， CDR3具有SEQ  ID NO.15所示的氨基酸序列；权　利　要　求　书 1/4 页 2 CN 115536747 A 2(5)CDR1具有SEQ  ID NO.12所示的氨基酸序列， CDR2具有SEQ  ID NO.14所示的氨基酸 序列， CDR3具有SEQ  ID NO.15所示的氨基酸序列； (6)CDR1具有SEQ  ID NO.4所示的氨基酸序列， CDR2具有SEQ  ID NO.14所示的氨基酸序 列， CDR3具有SEQ  ID NO.15所示的氨基酸序列； 更优选地， 所述重链可变区的CDR和轻链可变区的CDR为如下任一种： (1)重链可变区的CDR1具有SEQ  ID NO.1所示的氨基酸序列， CDR2具有SEQ  ID NO.2所 示的氨基酸序列， CDR3具有SEQ  ID NO.3所示的氨基酸序列； 轻链可变区的CDR1具有SEQ  ID  NO.4所示的氨基酸序列， CDR2具有SEQ  ID NO.5所示的氨基酸序列， CDR3具有SEQ  ID NO.6 所示的氨基酸序列； (2)重链可变区的CDR1具有SEQ  ID NO.7所示的氨基酸序列， CDR2具有SEQ  ID NO.8所 示的氨基酸序列， CDR3具有SEQ  ID NO.3所示的氨基酸序列； 轻链可变区的CDR1具有SEQ  ID  NO.4所示的氨基酸序列， CDR2具有SEQ  ID NO.13所示的氨基酸序列， CDR3具有SEQ  ID  NO.15所示的氨基酸序列； (3)重链可变区的CDR1具有SEQ  ID NO.7所示的氨基酸序列， CDR2具有SEQ  ID NO.8所 示的氨基酸序列， CDR3具有SEQ  ID NO.3所示的氨基酸序列； 轻链可变区的CDR1具有SEQ  ID  NO.12所示的氨基酸序列， CDR2具有SEQ  ID NO.13所示的氨基酸序列， CDR3具有SEQ  ID  NO.15所示的氨基酸序列； (4)重链可变区的CDR1具有SEQ  ID NO.7所示的氨基酸序列， CDR2具有SEQ  ID NO.8所 示的氨基酸序列， CDR3具有SEQ  ID NO.3所示的氨基酸序列； 轻链可变区的CDR1具有SEQ  ID  NO.12所示的氨基酸序列， CDR2具有SEQ  ID NO.14所示的氨基酸序列， CDR3具有SEQ  ID  NO.15所示的氨基酸序列。 3.根据权利要求2所述的TROP2抗体， 其特征在于， 所述重链可变区具有SEQ  ID NO.16、 18‑20任一所示的氨基酸序列， 轻链可变 区具有SEQ  ID NO.17、 21 ‑25任一所示的氨基酸序 列； 或者， 所述重链可变区、 轻链可变区与前述序列相比具有满足以下二者中至少一个： a) 结合相同抗原表位； b)序列同一性大于70％、 80％、 85％、 90％、 97％、 98％或99％的氨基酸 序列； 优选地， 所述重链可变区具有SEQ  ID NO.16所示的氨基酸序列， 轻链可变区具有SEQ   ID NO.17所示的氨基酸序列； 或者， 所述重链可变区具有SEQ  ID NO.19所示的氨基酸序列， 轻链可变区具有SEQ  ID  NO.21所示的氨基酸序列； 或者， 所述重链可变区具有SEQ  ID NO.19所示的氨基酸序列， 轻链可变区具有SEQ  ID  NO.23所示的氨基酸序列； 或者， 所述重链可变区具有SEQ  ID NO.19所示的氨基酸序列， 轻链可变区具有SEQ  ID  NO.24所示的氨基酸序列。 4.根据权利 要求1～3任一项所述的TROP2抗体， 其特征在于， 所述重链的Fc片段为人或 人源化抗体的Fc片段， 所述人或人源化 抗体为IgG1、 IgG2、 IgA、 IgE、 IgM、 IgG4或IgD。 5.根据权利要求1～4任一项所述的TROP2抗体， 其特征在于， 所述抗体的重链具有SEQ   ID NO.27、 29任一所示的氨基酸序列，