(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202110747842.3 (22)申请日 2021.07.01 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 113546087 A (43)申请公布日 2021.10.26 (73)专利权人 东华大学 地址 201620 上海市松江区松江新城人民 北路2999号 (72)发明人 史向阳　徐瑶　张昌昌　 (74)专利代理 机构 上海泰能知识产权代理事务 所(普通合伙) 3123 3 专利代理师 魏峯 (51)Int.Cl. A61K 31/704(2006.01) A61K 47/42(2017.01) A61P 35/00(2006.01)A61K 49/08(2006.01) A61K 49/10(2006.01) B82Y 5/00(2011.01) B82Y 40/00(2011.01) (56)对比文件 EP 0160521 A2,1985.1 1.06 CN 111939151 A,2020.1 1.17 US 2012263739 A1,2012.10.18 US 458712 2 A,1986.0 5.06 Xiangyu Meng et al. .A metal –phenolic network-based multifuncti onal nanocomposite w ith pH-responsive ROS generati on and drug release for synergistic c hemodynamic /photothermal/ chemo-therapy. 《Journal of Materials Chemistry B》 .2020,第10卷第1-12页. 审查员 乔月 (54)发明名称 一种纤连蛋白包覆的单宁酸/铁配合物的载 药纳米材 料及其制备和应用 (57)摘要 本发明涉及一种纤连蛋白包覆的单宁酸/铁 配合物的载药纳米材料及其制备方法和应用。 该 方法包括： 将盐酸阿霉素加入三乙胺去质子化， 将得到的疏水性阿霉素溶液与单宁酸溶液混合， 加入铁盐反应， 将得到的负载阿霉素的单宁酸/ 铁配合物的载药纳米材料与纤连蛋白溶液混合 搅拌， 挤压。 该方法制备得到的载药纳米材料不 仅可以实现T1MR成像， 同时通过化疗以及铁死亡 引起的免疫原性死亡还可以起到抗肿瘤免疫的 效果， 具有潜在的临床应用价 值。 权利要求书1页 说明书13页 附图9页 CN 113546087 B 2022.11.25 CN 113546087 B 1.一种纤连蛋白包覆的单宁酸/铁配合物的载药纳米材料， 其特征在于， 将疏水性阿霉 素与单宁酸溶液混合， 搅拌下加入铁 盐反应， 将得到的负载阿霉素的单宁酸/铁配合物的载 药纳米材 料与纤连蛋白溶 液混合搅拌， 通过挤压获得。 2.根据权利要求1所述的载 药纳米材 料， 其特征在于， 所述铁盐为F eCl3。 3.一种纤连蛋白包覆的单宁酸/ 铁配合物的载 药纳米材 料的制备 方法， 包括： (1)将盐酸阿霉素 溶解于溶剂中， 加入三乙胺去质子化， 得到疏 水性阿霉素DOX 溶液； (2)将步骤(1)中DOX溶液与单宁酸TA溶液混合， 搅拌下加入铁盐反应， 离心， 得到负载 阿霉素的单宁酸/ 铁配合物的载 药纳米材 料DOX‑TAF； (3)将步骤(2)中DOX ‑TAF溶于超纯水中， 加入纤连蛋白FN溶液， 搅拌， 挤压， 离心， 真空 干燥， 得到纤连蛋白包覆的单宁酸/ 铁配合物的载 药纳米材 料。 4.根据权利要求3所述的制备方法， 其特征在于， 所述步骤(1)中盐酸阿霉素与三乙胺 的摩尔比为1:1～3； 溶剂为甲醇； 去质子化时间为2 ～4h。 5.根据权利要求3所述的制备方法， 其特征在于， 所述步骤(2)中单宁酸TA溶液的溶剂 为无水乙醇； TA、 铁盐和DOX的质量比为5.14～7.12： 0.45～1： 2.5～3.5 。 6.根据权利 要求3所述的制备方法， 其特征在于， 所述步骤(2)中反应为： 室温搅拌12～ 24h。 7.根据权利 要求3所述的制备方法， 其特征在于， 所述步骤(3)中D OX‑TAF和纤连蛋白FN 的质量比为1： 0.5～1； 纤连蛋白FN溶 液浓度为0.5～ 2.5mg/mL。 8.根据权利要求3所述的制备方法， 其特征在于， 所述步骤(3)中搅拌温度为室温， 搅拌 时间为12 ～24h。 9.一种如权利要求1所述的载药纳米材料在制备化疗/免疫联合治疗和MR成像一体化 药物中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 113546087 B 2一种纤连蛋白包覆的单宁 酸/铁配合物的载药纳米材料及其 制备和应用 技术领域 [0001]本发明属于纳 米医学诊疗材料及其制备和应用领域， 特别涉及 一种纤连蛋白包覆 的单宁酸/ 铁配合物的载 药纳米材 料及其制备 方法和应用。 背景技术 [0002]传统的肿瘤治疗具有毒副作用大、 选择性差、 疗效欠佳等缺点， 而精准诊断和高效 治疗对提高肿瘤患者生存率至 关重要。 通过纳米材料靶向输送传统化疗药物和进 行多种治 疗方式联合治疗是增强治疗效果的有效途径。 发展新型、 易于制备 的多功能化纳米载体材 料同时负载一种或多种造影剂或治疗剂用于肿瘤的高效联合治疗及诊疗一体化依然存在 着巨大的挑战。 [0003]铁死亡于2012年被发现是一种新型的细胞死亡方式， 它区别于其它程序性死亡。 铁死亡的发生与脂质活性氧的形成密不可分， 细胞内活性氧在铁死亡中发挥着重要作用， 各种抗氧化剂和活性氧清除剂可以抑制 铁死亡发生。 目前普遍认为， 铁死亡最终是 由脂质 活性氧参与执行， 大量的活性氧与脂膜上的多聚不饱和脂肪酸(PU FAs)发生反应， 生 成超额 的脂质活性氧导致细胞膜损伤或细胞死亡。 然而， 抑制细胞膜胱氨酸/谷氨酸反向转运体 (System Xc‑)、 谷胱甘肽过氧化物酶 ‑4(GPX‑4)以及还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADPH) 氧化酶等也可促进脂质活性氧的产生进而诱导铁死亡 的发生。 铁死亡 的影响因素有铁、 脂 质活性氧和GPX ‑4。 到目前为止， 含铁的纳米系统(例如铁纳米金属玻璃、 氧化铁和金属 ‑酚 醛网络(或金属 ‑多酚网络， MPNs)已被用作促铁死亡和ROS产生剂， 用于治疗癌症。 在这些系 统中， 由多酚与金属离子配位形成的基于MPN的材料具有多种吸引人的特性， 包括低细胞毒 性、 高热稳定性和pH响应性。 癌细胞中积累的H2O2随后可被多余的铁离子利用， 通过Fenton 反应生成ROS(例如 ·OH)， 这将最终导致细胞死亡(Shan  L,et al.Biomaterials  2019, 210,62‑69)。 [0004]研究发现化疗药物阿霉素(DOX)是一种免疫原性诱导剂， 可以引起肿瘤细胞的免 疫原性细胞死亡(ICD)， 通过诱导肿 瘤细胞自噬， 释放3类信号： 钙 网蛋白暴露在细胞表面， 刺激树突状细胞(DC)吞噬； 三磷酸腺苷释放， 招募DC进入肿瘤灶； 高迁徙率族蛋白B1(HMGB ‑ 1)促进DC与垂死肿瘤细胞稳定结合， 诱导机体产生特异性的T细胞抗肿瘤免疫(Couzin,et   al.Science,2013,342,1432 ‑1433)。 肿瘤细胞的ICD是一种 有多种信号分子和细胞因子参 与的复杂过程， 这些分子的细胞定位和表达水平的改变直接影响死亡肿瘤细胞与免疫细胞 之间的相互作用。 对肿瘤细胞ICD机制的深入研究可为肿瘤的免疫治疗提供新的依据和 手 段。 [0005]目前市面上已经存在诸多的商业化造影剂， 然而这些造影剂的安全性和生物相容 性系列问题依然在学术界存在着许多争议， 因此开发出具有良好的MR成像性能， 且更加安 全的造影剂迫在眉睫。 Gd3+作为顺磁 性金属离子， 由于 其本身具有7个不成对的电子， 因而自 旋的磁矩较大， 弛豫率也较 高， 是作为顺磁性造影剂的最佳选择。 但是Gd3+对生物体产生的说　明　书 1/13 页 3 CN 113546087 B 3