(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202111003702.1 (22)申请日 2021.08.3 0 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 113768878 A (43)申请公布日 2021.12.10 (73)专利权人 杭州师范大学 地址 311121 浙江省杭州市余杭区余杭塘 路2318号 (72)发明人 谢恬　曾义英　李杰　曾昭武　 (74)专利代理 机构 杭州杭诚专利事务所有限公 司 33109 专利代理师 何俊 (51)Int.Cl. A61K 9/127(2006.01) A61K 47/42(2017.01)A61K 47/22(2006.01) A61K 47/24(2006.01) A61K 31/337(2006.01) A61K 31/015(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (56)对比文件 CN 111888331 A,2020.1 1.06 CN 106176609 A,2016.12.07 CN 109260156 A,2019.01.25 谢恬等.榄香烯脂质体系列靶向抗癌天然药 物基础研究进 展. 《中国中西医结合杂志》 .2014, 第34卷(第4期),第5 07-512页. 审查员 杜俊 (54)发明名称 一种榄香烯卡巴他赛双靶向仿生脂质体及 其制备方法和应用 (57)摘要 本发明涉及肿瘤化疗 药物领域， 针对 克服卡 巴他赛治疗胶质瘤时毒性大和靶向效率低的问 题， 提供一种榄香烯卡巴他赛双靶向仿生脂质 体， 每100mL含0.15～0.75g榄香烯、 0.5～2.5mL 无水乙醇、 0.015～0.07g卡巴他赛、 0.2 5～1g油、 0.25～1g聚乙二醇衍生物、 1～5g磷脂、 0.05～ 0.2g胆固醇、 0.025～0.1g  DSPE‑PEG2000‑转铁 蛋白、 0.005～0.025g肿瘤细胞膜蛋白， 余量为 水。 两种药物协同作用， 提高药物的BBB透过率及 胶质瘤细胞摄取率， 同时减少了卡巴他赛毒副作 用和榄香烯的刺激性。 本发明还提供所述脂质体 的制备方法和应用。 权利要求书1页 说明书10页 附图6页 CN 113768878 B 2022.12.20 CN 113768878 B 1.一种榄香烯卡巴他赛双靶向仿生脂质体， 其特征在于， 由以下组分组成： 每100  mL 中， 含0.15~0.75 g榄香烯、 0.5~2.5 mL无水乙醇、 0.015~0.07 g卡巴他赛、 0.25~1 g油、 0.25~1 g聚乙二醇衍生物、 1~5 g磷脂、 0.05~0.2 g胆固醇、 0.02 5~0.1 g DSPE‑PEG2000‑转 铁蛋白、 0.0 05~0.025 g肿瘤细胞膜蛋白、 渗透 压调节剂， 余 量为水。 2.根据权利要求1所述的一种 榄香烯卡巴他赛双靶向仿生脂质体， 其特征在于， 所述油 选自中链 甘油三酯、 大豆油、 棕榈油、 椰子油、 鱼油、 氢化油和动物油中的一种或几种。 3.根据权利要求1或2所述的一种榄香烯卡巴他赛双靶向仿生脂质体， 其特征在于， 所 述磷脂选自大豆磷脂、 蛋黄磷脂、 氢化磷脂、 合成磷脂中的一种或几种。 4.根据权利要求1所述的一种 榄香烯卡巴他赛双靶向仿生脂质体， 其特征在于， 所述 聚 乙二醇衍 生物选自维生素E聚乙二醇琥珀酸酯或二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺 ‑聚乙二醇。 5.根据权利要求1所述的一种榄香烯卡巴他赛双靶向仿生脂质体， 其特征在于， 所述 DSPE‑PEG2000‑转铁蛋白替换为DSPE ‑PEG3000‑转铁蛋白、 DSPE ‑PEG4000‑转铁蛋白、 DSPE ‑ PEG5000‑转铁蛋白中的一种或几种。 6.根据权利要求1或5所述的一种榄香烯卡巴他赛双靶向仿生脂质体， 其特征在于， 所 述肿瘤细胞膜蛋白选自RG2、 C 6、 U251、 U87、 BT ‑325中的一种或几种。 7.权利要求1 ‑6任一榄香烯卡巴他赛双靶向仿生脂质体的制备方法， 其特征在于， 包括 如下步骤： （1） 油相制备： 将卡巴他赛溶于无水乙醇， 按比例将其与油、 磷脂、 胆固醇、 聚乙二醇衍 生物、 榄香烯、 D SPE‑PEG‑转铁蛋白于70～10 0℃熔融得到油相； （2） 水相 制备： 将渗透 压调节剂和水混合， 在5 0～70℃下保温溶解得到水相； （3） 混合挤压： 将上述油相加入水相中， 高速剪切后再进行超声破碎， 加入膜蛋白， 反复 挤压过滤膜， 即得双靶向仿生脂质体。 8.根据权利要求7所述的制备方法， 其特征在于， 步骤 （2） 所述渗透压调 节剂选自甘油、 葡萄糖、 蔗糖、 海藻糖、 麦 芽 糖、 甘露醇中的一种或几种。 9.根据权利要求7或8所述的制备方法， 其特征在于， 步骤 （3） 所述高速剪切 的速率为 8000～15000 r/min， 剪切时间20～40  min； 超声破碎条件为23 0～240 W。 10.权利要求1 ‑6任一榄香烯卡巴他赛双靶向仿生脂质体在制备脑胶质瘤治疗药物中 的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 113768878 B 2一种榄香烯卡巴他赛双靶向仿生脂质体及其制备方 法和应用 技术领域 [0001]本发明涉及肿瘤化疗药物技术领域， 尤其是涉及 一种榄香烯卡巴他赛双靶向仿生 脂质体及其制备 方法。 背景技术 [0002]脑胶质瘤是人类最具威胁 的疾病之一， 预后极差、 死亡率高。 到目前为止， 手术是 最直接有效的治疗策略， 可以显著减轻症状， 延长胶质瘤患者的生存。 然而， 由于胶质瘤的 异质性和浸润性特点， 手术并不能完全切除， 复发风险高。 化疗也是必 要的， 然而， 胶质瘤的 化疗通常因血脑屏障(BBB)的选择性渗透性和药物对肿瘤组织的靶向性差而受阻。 BBB上有 一个ATP依赖的外排泵P ‑糖蛋白(P ‑gp)， 它可 以主动泵出底物， 增加对细胞毒性药物的清 除。 特别是， 抗癌药在穿越BBB后， 难以靶向于胶质瘤区域 从而吸附于其他正常区域， 有 可能 降低疗效甚至造成神经毒性。 因此， 设计一种能够穿透BBB、 逃逸流出机制和靶向进入胶质 瘤的载体至关重要。 [0003]脂质体是由磷脂双层膜形成的球形囊泡， 在生物相容性和穿越血脑屏障方面引起 了广泛的关注。 它们是神经胶质瘤治疗的常见载体。 由于缺乏主动靶向和肿瘤靶向能力， 限 制了其在胶质瘤化疗中的应用。 BBB上有多种胰岛素受体、 转铁蛋白、 内皮生长因子和氨基 酸的过表达。 受体介导的内吞作用是各种药物通过BBB的主要机制之一。 这里， 转铁蛋白 (Tf)被用作靶向配体修饰脂质体， 通过特异 性识别Tf受体来增加BBB的穿透效应。 虽然通过 上述方法可以改善脑药物积累， 但穿透B BB后靶向胶质瘤仍具有挑战性。 [0004]为了进一步提高抗癌药物的肿瘤聚集性， 将胶质瘤细胞膜蛋白(CMP)包埋到Tf脂 质体中， 研制了仿生脂质体。 近年来， 基于癌细胞细胞膜(蛋白)的仿生纳米工程备受关注， 并被应用于具有同源靶向和免疫 逃逸功能的仿生脂质体的开 发。 由于脂质体与源癌细胞细 胞膜的特异 性同型结合， 脂质体已经取得了很好的活性靶向性。 此外， 免疫系统在识别膜伪 装脂质体方面存在困难， 因为它们被视为具有长循环的源细胞。 自2014年第一篇报道以来， 基于CMP的仿生纳米工程已广泛应用于免疫治疗、 生物成像、 治疗学和胶质瘤光治疗学等生 物医学领域。 然而， 用于胶质瘤化疗的主动靶向仿生脂质体很少报道。 [0005]卡巴他赛(CTX)是一种新型的半合成紫衫烷类化合物， 分子式为C45H57NO14， 分子量 为835.94， 几乎不溶于水， 溶于乙醇。 临床前动物研究表明卡巴他赛具有广谱的抗肿瘤活 性， 包括前列腺癌、 结肠癌、 肺癌、 乳 腺癌等， 且 可以透过BBB。 与其它紫杉 醇类药物相比， CTX 对胶质瘤有明显的抑制作用， 但毒性较大。 榄香烯(ELE)是疗效较好、 副作用小的抗癌天然 活性成分， 从温莪术中提取分离得到， 榄香烯包括α、 β 、 γ、 δ等多种榄香烯异构体。 研究发现 榄香烯可以对多种癌细胞产生抑杀作用， 诱导肿瘤细胞分化和凋亡， 抑制肿瘤细胞 的浸润 和远处转移， 抑制肿瘤血管生 成， 提高机体抗肿瘤免疫反应。 例如专利CN101921164A名称为 (‑)‑β‑榄香烯、 ( ‑)‑β‑榄香醛、 ( ‑)‑β‑榄香醇、 ( ‑)‑β‑氟化榄香烯及其类似物、 中间体和组 合物的合成及应用， 公开了榄香烯针对癌症， 尤其是对脑肿瘤、 肺癌、 卵巢癌、 膀胱癌、 子宫 颈癌、 结肠癌、 乳 腺癌和前列腺癌均有疗效。 ELE是一种脂溶性小分子化合物， 可通过BBB， 在说　明　书 1/10 页 3 CN 113768878 B 3