(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202110743872.7 (22)申请日 2021.07.01 (71)申请人 上海交通大 学 地址 200240 上海市闵行区东川路80 0号 (72)发明人 朱明彦　郑艺　 乃皮赛·吐逊买买提　 (74)专利代理 机构 上海科盛知识产权代理有限 公司 312 25 专利代理师 许耀 (51)Int.Cl. C07D 405/12(2006.01) A61P 35/00(2006.01) G01N 21/64(2006.01) (54)发明名称 一种异鼠李素光亲和探针及其合成方法和 应用 (57)摘要 本发明涉及一种异鼠李素光亲和探针及其 合成方法和应用， 该探针以异鼠李素为活性基 团， 双吖丙啶为光交联基团， 炔烃为生物正交反 应基团， 具有如下 所示结构： 与现有技术相比， 本发 明保留了异鼠李素的抑制肿瘤细胞增殖活性， 且 具有良好的细胞膜透过性； 利用双吖丙啶作为光 交联基团， 以及分子结构带有的炔烃作为生物正 交反应基团， 可以实现对靶蛋白共价结合及细胞 内原位靶点钓取， 可用于异鼠李素抗癌作用靶点 的发现。 权利要求书2页 说明书8页 附图3页 CN 114685463 A 2022.07.01 CN 114685463 A 1.一种异鼠李素光亲和探针， 其特征在于， 该探针以异鼠李素为活性基团， 双吖丙啶为 光交联基团， 炔 烃为生物正交基团， 具有如下 所示结构： 2.一种如权利要求1所述的异鼠李素光亲和探针的合成方法， 其特征在于， 包括以下步 骤： S1： 将槲皮素加入无水二氯甲烷和 DMF混合溶液中搅拌溶解， 在冰浴下加入N,N ‑二异丙 基乙胺和氯甲基甲基醚， 搅拌0.5～1.5h， 然后恢复至室温反应16～18h， 反应完成后， 旋蒸 除去溶剂、 萃取、 干燥、 柱层析 纯化得到中间体1， 中间体1的结构式如下 所示： S2： 将步骤S1得到的中间体1和K2CO3加入无水DMF溶液中搅拌溶解， 向溶液中加入光交 联基团(3 ‑(3‑炔‑1‑丁基)‑3‑(2‑碘乙基)‑3H‑双吖丙啶)， 并在62～68℃加热回流反应48～ 96h， 旋蒸除去溶剂、 萃取、 干燥、 柱层析 纯化得到中间体2， 中间体2的结构式如下 所示： S3： 将步骤(2)所得中间体2加入丙酮溶液中搅拌溶解， 在冰浴下向溶液中加入2.5～ 3.5N HCl， 搅拌0.5～1.5h， 然后恢复至室温反应5～7d； 反应结束后加入水淬灭反应， 萃取、 洗涤、 干燥， 旋 干溶剂， 柱层析 纯化得到化 合物3， 化 合物3的结构式如下 所示： 化合物3即为所述的异鼠李素光亲和探针。 3.根据权利要求2所述的一种异鼠李素光亲和探针的合成方法， 其特征在于， 步骤S1 中， 包括以下 条件中的任一项或多 项： (i)槲皮素、 N,N ‑二异丙基乙胺和氯甲基甲基醚的摩尔之比为1:(3～4): 8； (ii)槲皮素与(无 水二氯甲烷和DMF混合溶 液)的质量： 体积之比为1g:(20 0～300)mL；权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114685463 A 2(iii)无水二氯甲烷和DMF混合溶 液中， 无水二氯甲烷和DMF的体积之比为(20～15):1。 4.根据权利要求2所述的一种异鼠李素光亲和探针的合成方法， 其特征在于， 步骤S2 中， 包括以下 条件中的任一项或多 项： (i)中间体1、 K2CO3和光交联基团(3 ‑(3‑炔‑1‑丁基)‑3‑(2‑碘乙基)‑3H‑双吖丙啶)的摩 尔之比为1:(1.2 ～1.3):2； (ii)中间体1与无 水DMF溶液的用量之比为10mg:(0.5～1)mL。 5.根据权利要求2所述的一种异鼠李素光亲和探针的合成方法， 其特征在于， 步骤S3 中， 包括以下 条件中的任一项或多 项： (i)丙酮与H Cl的体积之比为(5～7):1； (ii)中间体2与丙酮的用量之比为10mg:(0.5～1)mL。 6.一种如权利要求1所述的异鼠李素光亲和探针在癌细胞成像中的应用。 7.根据权利要求6所述的异鼠李素光亲和探针的应用， 其特征在于， 所述的癌细胞包括 乳腺癌细胞MDA ‑MB‑231、 结肠癌细胞H CT‑116或前列腺癌细胞PC ‑3。 8.一种如权利要求1所述的异鼠李素光亲和探针在癌细胞原位鉴定异鼠李素直接作用 靶蛋白中的应用。 9.根据权利要求7所述的异鼠李素光亲和探针的应用， 其特征在于， 所述的靶蛋白与探 针共价结合， 通过紫外照射， 实现探针中的双吖丙啶基团与包括癌细胞增殖、 侵袭在内的生 物过程相关蛋白的共价交联。 10.根据权利要求8 或9所述的异鼠李素光亲和探针的应用， 其特征在于， 所述的癌细胞 包括乳腺癌细胞MDA ‑MB‑231、 结肠癌细胞H CT‑116或前列腺癌细胞PC ‑3。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114685463 A 3