(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202110969998.6 (22)申请日 2021.08.23 (71)申请人 刘建涛 地址 330013 江西省南昌市经济技 术开发 区枫林西大街849号 (72)发明人 刘建涛　 (74)专利代理 机构 重庆信必达知识产权代理有 限公司 5 0286 代理人 刘竹 (51)Int.Cl. A61K 35/64(2015.01) A61P 7/02(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 1/00(2006.01) (54)发明名称 一种具有纤溶 活性昆虫提取液、 制备方法及 应用 (57)摘要 本发明属于天然提取物 技术领域， 公开了一 种具有纤溶活性昆虫提取液、 制备方法及应用， 将美洲大蠊1 ‑3份和蚁狮1 ‑3份混合物集中到烧 杯中， 冲洗、 滤干、 称重； 加入没过混合物的PBS溶 液， 浸泡2小时； 倒入玻璃研钵中， 加入PBS研磨； 将研磨好的匀浆倒入烧杯中， 加入两倍体积的 PBS浸泡24小时， 并用离心管分装； 在4℃、 10000r/min的条件下离心15分钟， 得到离心粗提 液； 将离心管中沉淀去除， 留上清液即可。 本发明 提供的具有纤溶活性昆虫提取液具有较强的纤 溶活性。 研究表明， 随着昆虫提取液浓度的升高， 提取物上清液冻干粉能够明显的促进人结肠癌 细胞的凋亡， 提取物上清液冻干粉对 结肠癌细胞 增殖具有明显的抑制作用。 权利要求书1页 说明书6页 附图3页 CN 113893265 A 2022.01.07 CN 113893265 A 1.一种具有纤溶活性昆虫提取液的制备方法， 其特征在于， 所述具有纤溶活性昆虫提 取液的制备 方法包括： 将美洲大蠊和蚁狮混合物集中到一个烧杯中， 用蒸馏水进行冲洗， 再用纸巾在桌面上 进行滤干， 滤干后将 称重； 称重结束后， 加入没过混合物的PBS溶 液， 浸泡； 将浸泡之后的溶液倒入玻璃研钵中， 适当加入预冷的PBS进行研磨， 完全研磨直至溶液 完全呈现黑色糊状为研磨完毕； 将研磨好的匀浆倒入 烧杯中， 加入PBS进行浸泡， 将浸泡过后的匀浆进行离心管分装； 离心， 得到的离心粗 提液； 将离心管中沉淀去除， 留上清液。 2.如权利要求1所述的具有 纤溶活性昆虫提取液的制备方法， 其特征在于， 将美洲大蠊 1‑3份和蚁狮1 ‑3份混合物集中到一个烧杯中。 3.如权利要求1所述的具有纤溶活性昆虫提取液的制备方法， 其特征在于， 称重结束 后， 加入没过混合物的PBS溶 液， 浸泡2小时。 4.如权利要求1所述的具有 纤溶活性昆虫提取液的制备方法， 其特征在于， 将研磨好的 匀浆倒入烧杯中， 加入两倍体积的PBS进行24小时浸泡， 将浸泡2 4小时过后的匀浆进行离心 管分装。 5.如权利要求1所述的具有纤溶活性昆虫提取液的制备方法， 其特征在于， 在4℃、 10000r/min的条件下进行离心15分钟， 得到的离心粗 提液。 6.一种由权利要求1所述的具有 纤溶活性昆虫提取液的制备方法制备得到的具有 纤溶 活性昆虫提取液， 其特征在于， 所述具有纤溶 活性昆虫提取液按质量份数计由美洲大蠊 1‑3 份和蚁狮1 ‑3份组成。 7.一种如权利要求6所述的具有纤溶活性昆虫提取 液在制备抗血栓药物中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 113893265 A 2一种具有纤 溶活性昆虫提取液、 制备方 法及应用 技术领域 [0001]本发明属于天然提取物技术领域， 尤其涉及一种具有纤溶活性昆虫提取液、  制备 方法及应用。 背景技术 [0002]目前， 纤溶活性蛋白是一种非常重要的碱性类胰蛋白酶丝氨酸蛋白酶， 其  拥有较 好的纤溶活性， 广泛存在于微生物、 昆虫和动物中。 经过几十年的研究，  在许多微生物、 昆 虫和动物中分离纯化得到纤溶活性蛋白酶。 某些纤溶蛋白酶  已开发成为临床治疗血栓的 重要药物， 而且纤溶蛋白酶对抗肿瘤的新药开发也  在不断进行中。 [0003]正常生理状况下， 血管受损后， 会在损伤部位形成血栓， 而当伤口愈合后，  形成的 血栓又会被逐渐溶解。 参与纤维 蛋白降解或血栓溶解的是纤溶系统， 它  与凝血系统相互拮 抗， 以防止血栓形成和保持血流畅通。 人体对纤维蛋白的裂  解主要依靠纤溶酶。 纤溶酶可 以裂解单个的裂解纤维蛋白， 也可以裂解网状的  纤维蛋白。 自然界存在大量具有抗凝、 溶 栓效应的活性物质。 从作用机理上纤  溶活性蛋白酶大体上可以分成两类： 一类是纤溶酶原 激活剂， 如尿激酶、 葡激  酶， 其作用原理是纤溶酶原激活剂能将纤溶酶原激活为纤溶酶， 而 具有丝氨酸  蛋白酶活性的纤溶酶则能 降解构成血栓骨架的纤维蛋白， 从而引起溶栓的作 用； 另一类是纤溶酶类物质， 其作用不需通过激活纤溶酶原， 直接降解血块中的纤  维蛋 白。 例如， 溶栓药物链激酶先与纤溶酶原结合， 形成SK ‑纤溶酶原复合物，  这复合物才具有 酶催化的活性， 使游离的纤溶酶原转变成纤溶酶， 最后纤溶酶  溶解纤维蛋白。 但是由于缺 乏特异性， 可导致广泛的纤溶系统激活， 导致抗纤  溶酶缺乏， 产生游离的纤溶酶， 甚至导致 严重出血现象。 目前人们正在开 发具 有提高纤维 蛋白特异 性和溶栓效率， 减少颅内出血的 危险的新型纤溶蛋白。 [0004]美洲大蠊， 学名Per iplaneta  americana(L.)俗名蟑螂、 石姜、 滑虫、 偷油  婆、 茶婆 子， 为昆虫纲有翅亚纲蜚蠊目蜚蠊科大蠊属。 含有蛋白质 、 氨基酸、  肽类、 糖类等多种有效 成分， 具有活血化瘀、 解毒消疳、 利水消肿等功效。 《神  农本草经》 记载， 谓 “味咸， 寒。 主血 瘀、 症坚、 寒热， 破积聚， 喉咽痹， 内  寒， 无子”， 用以治疗小儿疳积、 疔疮、 痈肿、 喉蛾、 无名肿 毒、 梅毒以及 毒 蛇、 蜈蚣咬伤 等疾病。 药用昆虫蚁狮(Ant lion)， 属于脉翅目蚁岭科， 又名称   为沙牛、 沙王八、 土牛、 老倒等。 成虫名为蚁岭， 属脉翅目中分布最多、 最广  泛的一种。 蚁狮 被视为一种名贵的中药材料。 其功能主要有祛瘀消肿、 平肝解  热、 通便散结等， 主治癫痫、 脉管炎、 便秘、 结石等疑难杂症外用可医治中耳  炎等， 并且蚁狮作为粉末 状用处时， 对于刀 伤有很好的疗效。 但是， 现有技术  中关于从美洲大蠊和蚁狮中制备提取液的方法还尚未见 报道。 [0005]通过上述分析， 现有技术存在的问题及缺陷为： 现有技术中关于从美洲大  蠊和蚁 狮中共同制备提取 液的方法还尚未 见报道。 [0006]解决以上问题及缺陷的难度为： 如何选择有效的配比， 取得最佳的纤溶活  性和抑 制人结肠癌细胞增殖。说　明　书 1/6 页 3 CN 113893265 A 3