(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111589480.6 (22)申请日 2021.12.23 (71)申请人 长春工业大学 地址 130012 吉林省长 春市朝阳区延安大 街2055号 (72)发明人 孙国英　郭辉　姜春竹　魏珊珊　 刘宝强　 (74)专利代理 机构 长春众邦菁华知识产权代理 有限公司 2 2214 代理人 周蕾 (51)Int.Cl. A61K 49/14(2006.01) A61K 49/18(2006.01) A61K 9/107(2006.01) A61K 31/409(2006.01)A61K 31/4188(2006.01) A61K 41/00(2020.01) A61K 47/64(2017.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 双响应纳米前药物胶束及其制备方法和应 用 (57)摘要 本发明涉及一种双响应纳米前药物胶束及 其制备方法和应用， 本发明的胶束表达式为 NLG919/PGA ‑Cys‑PPA@Gd， 该胶束具有较高的载 药率和控释性能， 可用于MRI介导的PDT和免疫协 同治疗。 本发明以胱胺(Cys)为连接体， 通过自组 装γ‑聚谷氨酸(PGA) ‑Gd3+螯合的脱镁叶绿素A (PPA@Gd)将吲哚胺2,3 ‑双加氧酶(IDO)抑制剂 NLG919装载到疏水核内， 构建了纳米药物前胶 束， 以防止PS提前泄漏并控制药物释放。 本发明 首次通过将Gd3+与PPA螯合赋予纳米微粒MRI的 能力， 形成一种集诊断和治疗功能于一体的新型 纳米平台。 最后， 在荷瘤小鼠模型中综合评价成 像引导PDT与免疫协同治疗， 取得了明显的协同 治疗效果。 权利要求书2页 说明书12页 附图8页 CN 114028587 A 2022.02.11 CN 114028587 A 1.一种双响应纳米前药物胶束， 其特征在于， 该胶束是以胱胺(Cys)为连接体， 通过自 组装γ‑聚谷氨酸(PGA) ‑Gd3+螯合的脱镁叶绿素A(PPA@Gd)将吲哚胺2,3 ‑双加氧酶(IDO)抑 制剂NLG919装 载到疏水核内， 构建得到的双响应纳米前药物胶 束， 其表达式为NLG919/PGA ‑ Cys‑PPA@Gd。 2.根据权利要求1所述的双响应纳米前药物胶束， 其特征在于， 所述双响应纳米前药物 胶束呈球形， 其平均直径为10 3.6±2.1nm、 平均水动力直径为13 6.3±4.5nm。 3.一种权利要求1或2所述的双响应纳米前药物胶束的制备方法， 其特征在于， 包括以 下步骤： 步骤1、 用PGA和Cys制备 得到PGA‑Cys； 步骤2、 通过酰胺键将P PA与PGA‑Cys偶联， 合成两亲性接枝共聚物PGA ‑Cy s‑PPA； 步骤3、 将GdCl3·6H2O加入到PGA ‑Cys‑PPA溶液中， 得到产品PGA ‑Cys‑PPA@Gd； 步骤4、 将NLG919和PGA ‑Cys‑PPA@Gd结合物混合， 然后在超声的情况下将混合溶液滴加 到蒸馏水中， 透析， 得到双药负载的胶束水 溶液NLG919/PGA ‑Cys‑PPA@Gd。 4.根据权利要求3所述的双响应纳米前药物胶束的制备方法， 其特征在于， 所述步骤1 的一种具体实施方式为： 将0.50g,3.40mmol  PGA溶解在50mL  0.1M的磷酸盐缓冲溶液中， 然后加入3.28g, 0.017mol  EDC和3.94g,0.034molNHS活化PGA的羧基官能团30分钟； 随后， 向上述溶液中滴 加0.1M氢氧化钠直至溶液的pH值达到中性， 再向溶液中加入1.54g,6.80mmol  Cys， 在25℃ 下连续搅拌反应24h； 最后， 将反应溶液装入透析袋中， 用蒸馏水透析48小时， 并使用冷冻干 燥机进行冻干得到PGA ‑Cys。 5.根据权利要求3所述的双响应纳米前药物胶束的制备方法， 其特征在于， 所述步骤2 的一种具体实施方式为： 在黑暗以及通入氮气气氛 的条件下， 将0.12g,0.20mmol  PPA溶解于20mL的DMSO中， 再 向其中加入0.19g,1.01mmol  EDC和0.12g,1.01mmol  NHS， 转移 至100mL三颈烧瓶内， 通入氮 气， 在黑暗条件 下反应12h用于PPA 羧基的活化； 然后将第一步合 成的产物PGA‑Cys加入到上 述溶液中连续搅拌反应2 4小时； 随后将反应溶液装入透析袋用D MSO透析2天， 再经蒸馏水透 析1天， 以去除游离的PPA和有机溶剂； 最后将反应溶液冷冻干燥， 得到墨绿色产物PGA ‑Cys‑ PPA。 6.根据权利要求3所述的双响应纳米前药物胶束的制备方法， 其特征在于， 所述步骤3 的一种具体实施方式为： 以GdCl3·6H2O:PGA‑Cys‑PPA的摩尔比2:1将GdCl3·6H2O加入PGA ‑Cys‑PPA溶液中， 搅拌 24h， 然后将未螯合的GdCl3从PGA‑Cys‑PPA中通过蒸馏水透析2天， 然后冻干得到最终产品 PGA‑Cys‑PPA@Gd。 7.根据权利要求3所述的双响应纳米前药物胶束的制备方法， 其特征在于， 所述步骤4 的一种具体实施方式为： 将2mg的NLG919和10mg的PGA ‑Cys‑PPA@Gd结合物在100 μL  DMSO溶液中混合， 然后在超 声的情况下将混合溶液滴加到4mL蒸馏水中， 2分钟 后将该溶液用蒸馏水透析2天， 得到双药 负载的胶束水 溶液NLG919/PGA ‑Cys‑PPA@Gd。 8.一种权利要求1或2所述的双响应纳米前药物胶束在制备用于核磁共振成像引导的权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114028587 A 2光动力免疫协同治疗药物上的应用。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114028587 A 3