(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111671936.3 (22)申请日 2021.12.31 (71)申请人 西北大学 地址 710127 陕西省西安市长安区西北 大 学长安校区 (72)发明人 曹利平　段燕娟　董运红　 (74)专利代理 机构 西安利泽明知识产权代理有 限公司 612 22 专利代理师 贾晓玲 (51)Int.Cl. A61K 47/69(2017.01) A61K 45/00(2006.01) A61K 49/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种药载系统的制备及其在生物成像的应 用 (57)摘要 本发明涉及药物制备技术领域， 且公开了一 种药载系统的制备及其在生物成像的应用， 包括 药物传递系统， 所述其包含一个四苯乙烯基八阳 离子笼的载体和有效量的一种医药活性物质， 其 中前述医药 活性物质被包覆 于药物载体内。 该药 载系统的制备及其在生物成像的应用， 通过使用 的cage在体外实验中， 对人结肠癌和乳腺癌细胞 系的毒性均较低， 其包裹了医药 活性物质后的药 物传递系统更能有效地杀死癌细胞。 相对于单独 的药物， 前述的药物传递系统对癌细胞的抑制作 用明显更强， 通过主体分子笼的两个四苯乙烯单 元使cage在与医药活性物质结合时具有荧光响 应， 无需额外的荧光染料即可用于生物成像， 通 过荧光强度的变化 监测药物的释放过程。 权利要求书2页 说明书5页 附图4页 CN 114470232 A 2022.05.13 CN 114470232 A 1.一种药载系统的制备及其在生物成像的应用， 包括药物传递系统， 其特征在于： 所述 其包含一个四苯乙烯基八阳离子笼(cage)的载体和有效量的一种医药 活性物质， 其中前述 医药活性物质被包覆于药物载体内。 通过简单 的混合， 超声和冻干等操作制备药物传递系 统。 2.根据权利要求1所述的一种药载系统 的制备及其在生物成像的应用， 其特征在于： 所 述药物传递系统可用于传递亲水性和疏水性的医药活性物质， 其包括以下步骤： 首先将载 药系统制备成溶液， 然后在无菌环境下， 将结肠癌细胞HCT  116和乳腺癌细胞MCF ‑7两种癌 细胞分别在培养基中生长， 待细胞进入快速生长时期时， 取相应的溶液加入到细胞培养液 中， 在处理24h之后， 再用含有MT T的无血清培养基培养4h。 使用微型板块阅读器进行分析。 3.根据权利要求1所述的一种药载系统 的制备及其在生物成像的应用， 其特征在于： 所 述超分子载药系统的生物成像包括以下步骤： 在无菌环 境下， 将乳腺癌细胞MCF ‑7在培养基 中生长， 待细胞进入快速生长时期时， 取相应的载药系统溶液加入到细胞培养液中， 孵化0、 3、 6小时在荧 光显微镜下观察细胞 形态， 并拍照片记录荧 光变化。 4.根据权利要求1所述的一种药载系统 的制备及其在生物成像的应用， 其特征在于： 所 述八阳离 子笼的结构为： 5.根据权利要求1所述的一种药载系统 的制备及其在生物成像的应用， 其特征在于： 所 述包含亲水性核苷类药物的药物传递系统的制备过程： 称取一定量经柱层析纯化过的cage 的冻干样品， 溶解于一定量的超纯水。 待其完全溶解后， 缓慢加入药物的水溶液， 其中药物 与cage的摩尔比为2： 1或1： 1， 室温条件下， 在磁力搅拌器上搅拌24h。 将所得的溶液冷冻干 燥得cage药物的复合物粉剂。 6.根据权利要求1所述的一种药载系统 的制备及其在生物成像的应用， 其特征在于： 所 述包含疏水性药物的药物传递系统的制备过程： 称取一定量经柱层析纯化过的cage的冻干 样品， 溶解于一定量的超纯水中。 待其完全溶解后， 缓慢加入药物， 边加边超声使其充分溶 解， 加入稍过量的药物之后， 室温条件下， 在磁力搅拌器上搅拌24h。 然后将所得的反应液， 于7600rpm条件下， 超滤离心10mi n， 将所得沉淀冷冻干燥得ca ge药物的复合物粉剂。 7.根据权利要求1所述的一种药载系统 的制备及其在生物成像的应用， 其特征在于： 所 述测试笼子的细胞毒性的过程： (1)种板： 取人类 结肠癌细胞HCT  116和乳腺癌 细胞MCF‑7悬液， 以(1 ×104个/孔)接种到 96孔板中， 将其置 于加湿的37℃、 5％CO2培养箱中培 养过夜。 (2)都分别用50μM和100μM的笼子水溶液进行培养， 培养24h后， 再用含有MTT的无血清 培养基培养4h。 弃去培养基， 每孔使用100 μL冰冷的PBS将细胞洗涤三遍， 然后每孔加入150 μ L DMSO用于提取细胞内的PPIX， 于摇床上震荡15min， 最后采用微型板块阅读器对各孔在权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114470232 A 2490nm处的吸光 值进行分析。 8.根据权利要求1所述的一种药载系统 的制备及其在生物成像的应用， 其特征在于： 所 述对比单独药物和ca ge药物的复合物粉剂的细胞毒性的过程： (1)种板： 取人类 结肠癌细胞HCT  116和乳腺癌 细胞MCF‑7悬液， 以(1 ×104个/孔)接种到 96孔板中， 将其置 于加湿的37℃、 5％CO2培养箱中培 养过夜。 (2)将cage药物的复合物粉剂配置成水 溶液。 (3)将提前配置好的载药系统的水溶液， 使用移液枪按照每孔100μL的量进行给药， 并 将孔板放置于细胞培养箱中约24h。 再用含有MTT的无血清培养基培养4h。 弃去培养基， 每孔 使用100 μL冰冷的PBS将细胞洗涤三遍， 然后每孔加入150 μL的DMSO用于提取细胞内的PPIX， 于摇床上震荡15mi n， 最后采用微型板块阅读器对各孔在490nm处的吸光 值进行分析。 9.根据权利要求1所述的一种药载系统 的制备及其在生物成像的应用， 其特征在于： 所 述癌细胞M CF‑7的细胞成像的过程： (1)种板： 将乳腺癌 细胞MCF‑7细胞接种于6孔板中， 将其置于加湿的37℃、 5％CO2培养箱 中培养24h。 (2)在培养的细胞加入cage药物的复合物粉剂的水溶液， 作用于不同时间点后(0、 3、 6h)， 抽吸培养基， PBS 缓冲溶液洗涤2次， 然后加入DAPI和DiIC18(3)染色液(5.0 μM)在37℃ 避光染色30min， 用胶体滴管吸走染色液， 用PBS缓冲液冲洗2次， 将孔板置于荧光显微镜下 观察并拍照， 检测ca ge的定位和药物释放。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114470232 A 3