(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111679133.2 (22)申请日 2021.12.31 (71)申请人 苏州大学 地址 215000 江苏省苏州市吴中区石湖西 路188号 (72)发明人 刘密　张梦　马琳　刁璐　 (74)专利代理 机构 苏州市中南伟业知识产权代 理事务所(普通 合伙) 32257 专利代理师 夏苏娟 (51)Int.Cl. A61K 35/741(2015.01) A61K 35/748(2015.01) A61K 36/064(2006.01) A61K 35/742(2015.01) A61K 35/747(2015.01)A61K 35/744(2015.01) A61K 35/745(2015.01) A61K 9/50(2006.01) A61K 47/24(2006.01) A61K 9/52(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种脂质膜包被益 生菌及其制备和应用 (57)摘要 本发明生物技术领域， 具体涉及一种脂质膜 包被益生菌及其制备和应用， 该脂质膜包被益生 菌包括益生菌和包裹所述益生菌的脂质膜， 所述 脂质膜包含阴离子脂材、 中性脂材和胆固醇。 本 发明使用自组装的生物膜将细菌包裹， 从而获得 一种脂质膜包裹的益生菌； 使用该益生菌剂型可 以增强细菌在胃肠液中的生存能力， 增加细菌在 肠道中的定植等， 可以作为肿瘤预防和治疗的增 强疗法。 权利要求书1页 说明书5页 附图7页 CN 114533764 A 2022.05.27 CN 114533764 A 1.一种脂质膜包被益生菌， 其特征在于， 包括益生菌和包裹所述益生菌的脂质膜， 所述 脂质膜包 含阴离子脂质、 中性脂质和胆固醇。 2.如权利要求1所述的脂质膜包被益生菌， 其特征在于， 所述益生菌选自球菌、 杆菌， 螺 旋菌和放线菌中的一种或多种。 3.如权利要求1所述的脂质膜包被益生菌， 其特征在于， 所述阴离子脂质选自DOPG和/ 或DPPG； 所述中性脂质选自D PPC和/或DOPE 。 4.如权利要求1或3所述的脂质膜包被益生菌， 其特征在于， 所述阴离子脂质、 中性脂质 和胆固醇的摩尔比为3 ‑4： 16‑18： 4‑6。 5.一种权利要求1 ‑4中任一项所述的脂质膜包被益生菌的制备方法， 其特征在于， 包括 以下步骤， S1： 将益生菌培养物悬浮于含阳离 子的缓冲液中， 得到细菌溶 液； 将阴离子脂质、 中性脂质和胆固醇溶解于有机溶剂中， 干燥得到 脂质膜； S2： 将所述脂质膜加入所述细菌溶 液中， 制得 所述脂质膜包被益 生菌。 6.如权利要求5所述的制备方法， 其特征在于， 所述缓冲液中的阳离子的浓度为10 ‑ 15mM。 7.如权利要求5所述的制备方法， 其特征在于， 所述有机溶剂为二氯甲烷和/或三氯甲 烷。 8.一种缓释制剂， 其特 征在于， 包括权利要求1 ‑4中任一项所述的脂质膜包被益 生菌。 9.如权利要求1 ‑4中任一项所述的脂质膜包被益生菌或权利要求7所述的缓释制剂在 制备预防和/或治疗肿瘤药物中的应用。 10.如权利要求9所述的应用， 其特 征在于， 所述肿瘤为结肠癌或原位结肠癌。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114533764 A 2一种脂质膜包被益生菌及其制备和应用 技术领域 [0001]本发明生物技 术领域， 具体涉及一种脂质膜包被益 生菌及其制备和应用。 背景技术 [0002]现有研究表明， 胃肠道中的细菌在多种疾病的发生和发展中起着至关重要  的作 用， 包括癌症、 肥胖症、 糖尿病、 抑郁症等， 因此将细菌制成胃滞留剂型  应用于疾病治疗有 着极大的发展前 景。 [0003]越来越多的证据表明， 肠道微生物群可用于增强癌症免疫疗法的抗肿瘤疗  效。 已 发现共生细菌通过影响局部和系统免疫系统促进恶性肿瘤的发生和发展。  肠道微生物组 的失调被证明会影响PD ‑1阻断剂对荷瘤小鼠和癌症患者的治疗效  果， 而口服补充特定菌 株可以改善抗肿瘤 免疫反应。 微生物 区系可能调节疫苗  反应的一种潜在方式是提供增强 疫苗反应的天然佐剂， 但口服或其他方式直接  使用益生菌给药， 会使益生菌生物利用度 低， 肠道停留时间不足或者无法降低  细菌的免疫原 性， 也无法避免细菌被网状内皮系统吞 噬与清除， 从而导 致使用 益生菌治疗效果 不理想。 发明内容 [0004]本发明旨在解决上述问题， 提供了一种脂质膜包被益生菌及其制备和应用，  使用 自组装的生物膜将细菌包裹， 能够增强细菌在胃肠液中的生存能力， 增加  细菌在肠道中的 定植等。 [0005]按照本发明的技术方案， 所述脂质膜包被益生菌， 包括益生菌和包裹所述  益生菌 的脂质膜， 所述脂质膜包 含阴离子脂质、 中性脂质和胆固醇。 [0006]本发明的脂质膜将益生菌表面进行修饰， 将它包被在脂质膜中， 从而抵御  胃肠道 不良环境以及避免 免疫系统清除。 [0007]进一步的， 所述 益生菌选自球菌、 杆菌， 螺 旋菌和放线菌中的一种或多种。 [0008]具体的， 所述益生菌选自酵母菌(如啤酒酵母、 葡萄汁酵母、 鲁氏酵母)、  益生芽孢 菌(如枯草芽孢杆菌、 地衣芽孢杆菌)、 丁酸梭菌、 乳杆菌(如嗜酸乳  杆菌、 干酪乳杆菌、 詹氏 乳杆菌、 拉曼乳杆菌等)、 球菌(如粪链球菌、 乳球菌、  中介链球菌等)、 双歧杆菌(如长双歧 杆菌、 短双歧杆菌、 两歧双歧杆菌、 青春  双歧杆菌、 卵形双歧杆菌、 嗜热双歧杆菌等)和放线 菌中的一种或多种。 [0009]优选的， 所述 益生菌为鼠李糖乳杆菌和/或长双歧杆菌 。 [0010]所述阴离子脂质 选自DOPG(二油酰磷脂酰甘油)和/或DPPG(二棕榈酰  磷脂酰甘 油)； 中性脂质选自D PPC(二棕榈酰磷脂酰胆碱)和/或DOPE(二油  酰磷脂酰乙醇胺) [0011]进一步的， 所述阴离 子脂质、 中性脂质和胆固醇的摩尔比为3 ‑4： 16‑18： 4‑6。 [0012]优选的， 阴离子脂质为DOPG， 中性脂质为DPPC； DOPG、 和胆固醇的摩  尔比17： 83： 25。 [0013]本发明的第二方面 提供了上述脂质膜包被益 生菌的制备 方法， 包括以下步  骤，说　明　书 1/5 页 3 CN 114533764 A 3