ICS 67.080.20 B 31 DB36 江 西 省 地 方 标 准 DB36/T 1243—2020 稻米中有机硒和无机硒含量的测定 氢化物 原子荧光光谱法 Determination of organic selenium and inorganic selenium contents in rice Hydride generation-atomic fluorescence spectrometry 2020- 04 -07 发布 江西省市场监督管理局 2020- 10 - 01 实施 发 布 DB36/T 1243—2020 目 次 前言 ................................................................................ II 1 范围 .............................................................................. 1 2 规范性引用文件 .................................................................... 1 3 原理 .............................................................................. 1 4 试剂和材料 ........................................................................ 1 5 仪器和设备 ........................................................................ 2 6 分析步骤 .......................................................................... 2 7 结果计算 .......................................................................... 3 8 测定低限和回收率 .................................................................. 4 9 精密度 ............................................................................ 4 I DB36/T XXX—2020 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由江西省农业农村厅提出并归口。 本标准起草单位：江西省农业科学院农产品质量安全与标准研究所、江西省农业科学院土壤肥料与 资源环境研究所。 本标准主要起草人：张标金、董爱琴、谢杰、魏益华、聂根新、涂田华、董秋洪、张祥喜、陈庆隆、 戴廷灿、周瑶敏、张大文。 II DB36/T XXX—2020 稻米中有机硒和无机硒含量的测定 氢化物原子荧光光谱法 1 范围 本标准规定了稻米中总硒和无机硒含量的氢化物原子荧光光谱测定方法，有机硒由总硒减去无机硒 得到。 本标准适用于稻米中有机硒和无机硒含量的测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 5009.93 食品安全国家标准 食品中硒的测定 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 稻米中的硒以不同的化学形式存在，包括无机硒和有机硒。试样中无机硒经6mol/L盐酸水浴条件提 取，使用环己烷萃取净化，用氢化物原子荧光光谱法测定提取液中无机硒的含量。总硒含量按GB 5009.93 （第一法 氢化物原子荧光光谱法）测定。有机硒含量为总硒与无机硒的差值。 4 试剂和材料 4.1 除非另有规定，本办法所使用的试剂均为分析纯，实验用水应符合 GB/T 6682 中规定的二级水。 4.2 试剂 4.2.1 盐酸（HCl），优级纯。 4.2.2 硝酸（HNO3），优级纯。 4.2.3 氢氧化钾（KOH）。 4.2.4 硼氢化钾（KBH4）。 4.2.5 铁氰化钾[K3Fe(CN)6]。 4.2.6 正辛醇（C8H18O）。 4.2.7 环己烷（C6H12）。 4.2.8 氩气（Ar）：纯度≥99.995%。 4.3 试剂的配制 1 DB36/T XXX—2020 4.3.1 盐酸溶液（1+1）：量取 250mL 盐酸（4.2.1），用水稀释到 500mL。 4.3.2 盐酸溶液（5+95）：量取 50mL 盐酸（4.2.1），用水稀释到 1000mL。 4.3.3 硝酸溶液（2mol/L）：量取 132.3mL 硝酸（4.2.2），用水稀释到 1000mL。 4.3.4 氢氧化钾溶液（5g/L）：称取 5.0 g 氢氧化钾（4.2.3），用水溶解并定容到 1000mL。 4.3.5 硼氢化钾溶液（10g/L）：称取 10.0g 硼氢化钾（4.2.4），用氢氧化钾溶液（4.3.4）溶解并 定容至 1000mL。 4.3.6 铁氰化钾溶液（100g/L）：称取 10.0g 铁氰化钾（4.2.5），用水溶解并定容至 100mL，混匀。 4.4 标准品 硒标准溶液：1000mg/L，经国家认证并授予标准物质证书的硒标准溶液。 4.5 标准溶液的配制 4.5.1 硒标准储备液（100mg/L）：准确吸取 1.0mL 硒标准溶液（1000mg/L）于 10mL 容量瓶中，用硝 酸溶液（4.3.3）定容至刻度。 4.5.2 硒标准中间液（1mg/L）：取 1.0mL 硒标准储备液（4.5.1），用盐酸溶液（4.3.2）定容至 100mL。 4.5.3 硒标准使用液（50μg/L）：取 5.0mL 硒标准中间液（4.5.2），用盐酸溶液（4.3.2）定容至 100mL。 5 仪器和设备 5.1 所有玻璃器皿均需以硝酸溶液（1+5）浸泡过夜，用自来水反复冲洗干净，再用 GB/T 6682 中的 二级水冲洗 3 次。 5.2 原子荧光光谱仪：配硒空心阴极灯。 5.3 天平：感量为 1mg。 5.4 电热板。 5.5 恒温水浴振荡器。 5.6 分液漏斗：100mL。 6 分析步骤 6.1 试样制备 稻米样品去除杂物，混匀后缩分至100g，经粉碎至全部通过孔径0.25mm（60目）尼龙筛，混匀后储 于聚乙烯瓶中备用。 6.2 总硒的测定 总硒测定的试样制备按 6.1 执行，测定按GB 5009.93 （第一法 氢化物原子荧光光谱法）进行。 6.3 无机硒的测定 2 DB36/T XXX—2020 6.3.1 试样处理 称取约2.5g试样（精确到0.001g）置于50mL具塞刻度试管中，加入20 mL盐酸溶液（4.3.1），混匀 后置于70℃恒温水浴，100 r/min～200 r/min震荡浸提2 h，冷却至室温，经脱脂棉过滤后，用少量（少 于15mL）盐酸溶液（4.3.1）冲洗棉球并收集滤液定容至50mL。将滤液倒入分液漏斗中（5.6），加入5mL 环己烷（4.2.7）萃取，静置分层并收集水相。取水相25mL于50mL具塞刻度试管中，并置于沸水浴中20min， 冷却至室温，分别加入2.5mL铁氰化钾溶液（4.3.6）、3滴正辛醇（4.2.6），加水定容至50mL，待测。 同时做试剂空白试验。 6.3.2 硒标准系列溶液的配制 取50mL容量瓶6个，依次准确加入50μg/L 硒标准使用液（4.5.3）0mL、0.5mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、 4.0mL、5.0mL，分别加入25 mL盐酸溶液（4.3.1），混匀，置于沸水浴中保持20min。待冷却至室温后， 分别加入2.5mL铁氰化钾溶液（4.3.6），3滴正辛醇（4.2.6），用水定容至50mL，混匀备测。硒标准系 列溶液各相当于硒浓度0μg/L、0.5μg/L、1.0μg/L、2.0μg/L、3.0μg/L、4.0μg/L、5.0μg/L。 注：可根据仪器的灵敏度及样品中硒的实际含量确定标准系列溶液中硒元素的质量浓度。 6.3.3 测定 6.3.3.1 仪器工作条件 按照GB 5009.93（第一法 氢化物原子荧光光谱法）选择仪器工作条件。 6.3.3.2 标准曲线的绘制 以盐酸溶液（4.3.2）为载流、硼氢化钾溶液（4.3.5）为还原剂，测定空白溶液的荧光强度后，按 顺序由低到高分别测定硒系列标准工作溶液的荧光强度，根据荧光强度和对应的元素浓度绘制硒标准曲 线。 6.3.3.3 待测试液测定 按顺序依次对空白试验溶液、试样待测溶液进行测定。若测定结果超出标准曲线的线性范围，应将 试液稀释后再测定。 7 结果计算 7.1 按式（1）计算试样中无机硒含量： X1  (c  c 0)  V  D 1000 …………………………………………………… (1) m 10001000 式中： X1 ——试样中无机硒的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）； c ——试样提取液测定浓度，单位为微克每升（μg/L）； c0 ——无机硒空白测定浓度，单位为微克每升（μg/L）； V ——测定体积，50mL； D ——分取倍数，2； m ——无机硒测定时称取的试样质量，单位为克(g)； 注：以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留3位有效数字。 3 DB36/T XXX—2020 7.2 按式（2）计算试样中有机硒含量： X 2  X  X 1 ……………………………………………………………(2) 式中： X2——试样中有机硒的含量，单位为毫克每千克(mg/kg)； X——试样中总硒的含量，单位为毫克每千克(mg/kg)； X1——试样中无机硒的含量，单位为毫克每千克(mg/kg)。 8 测定低限和回收率 当称样量为2.5g，定容体积为50mL时，本方法稻米中无机硒的最低检出限为：0.001mg/kg，定量限 为：0.004mg/kg。 本方法稻米中无机硒的回收率范围为：88.2%～113.6%。 9 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。 _________________________________ 4