ICS 65.020 CCS B 33 35 福 建 省 地 方 标 准 DB35/T 1993—2021 果蔗脱毒种苗质量与技术 Quality and technical requirements for pathogen-free plant of chewing cane 2021 - 08 - 17 发布 2021 - 11 - 17 实施 福建省市场监督管理局 发 布 DB35/T 1993—2021 目 次 前言 ................................................................................. II 1 范围 ............................................................................... 1 2 规范性引用文件 ..................................................................... 1 3 术语和定义 ......................................................................... 1 4 种苗脱毒与繁殖 ..................................................................... 2 5 质量要求 ........................................................................... 2 6 有害生物检测对象 ................................................................... 4 7 检测方法 ........................................................................... 5 8 抽样 ............................................................................... 9 9 包装、标签、存储及运输 ............................................................. 9 I DB35/T 1993—2021 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由福建省农业农村厅提出并归口。 本文件起草单位：福建农林大学国家甘蔗工程技术研究中心、农业农村部甘蔗及制品质量监督检验 测试中心、福建省标准化研究院。 本文件主要起草人：高三基、傅华英、黄美婷、郑海梅、黄国强、王锦达、张慧丽、邓祖湖。 II DB35/T 1993—2021 果蔗脱毒种苗质量与技术 1 范围 本文件规定了果蔗种苗脱毒与繁殖、质量要求、有害生物检测对象、检测方法、抽样和包装、标签、 存储及运输。 本文件适用于福建省内果蔗脱毒种苗的繁殖与质量检测。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 NY/T 1488 农作物种质资源鉴定技术规程 甘蔗 NY/T 1796 甘蔗种苗 NY/T 2724 甘蔗脱毒种苗生产技术规程 NY/T 3172 甘蔗种苗脱毒技术规范 NY/T 3754 甘蔗品种真实性鉴定 SSR分子标记法 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 瓶苗 bottle plantlet 将果蔗茎尖和腋芽的顶端分生组织作为外植体，在无菌操作条件下接种于无菌培养基上，并在一定 的光照和温度条件下进行培养，经过丛芽增殖和壮苗继代培养、诱导生根等过程，最终发育成根、茎、 叶俱全的果蔗植株种苗。 3.2 穴盘苗 plug plantlet 将瓶苗假植于装有营养土的塑料穴盘或育苗袋中，并置于具有防虫网（适宜目数为40～60目）隔离 条件下的温室或网室内，经过水肥精细管理，培育成可供大田定植的果蔗植株种苗。 3.3 种茎 seedcane 果蔗顶端生长点以下带有健康、可萌发芽的蔗茎或蔗茎段，可作为大田生产种植用的果蔗种苗（简 称蔗种）。 3.4 遗传变异株 abnormal plantlet 在组织培养过程中果蔗植株的遗传特性发生了改变，其形态或DNA指纹图谱表现出有别于原品种特 征的植株。 1 DB35/T 1993—2021 3.5 目标有害生物 targeted pests 为害果蔗种苗的目标病原（病毒和细菌）、病原真菌和昆虫。 4 种苗脱毒与繁殖 4.1 无目标病原苗的获得 4.1.1 茎尖培养脱毒苗 按照NY/T 2724和NY/T 3172的规定，经茎尖培养方法获得无目标病原的瓶苗、无琼脂苗和穴盘苗等。 4.1.2 腋芽培养脱毒苗 蔗茎取回并清洗后，在52 ℃热水处理30 min（内含25%多菌灵可湿性粉剂400倍液），然后在38 ℃～ 42 ℃温度下催芽6 d～10 d后，取腋芽的茎尖培养、繁殖成苗。 4.1.3 无毒苗圃组培苗 采用经检测不携带目标病原的种苗，在隔离网室的环境下长成的植株。 4.2 脱毒种苗繁殖与管理 4.2.1 繁殖基地选择 原种、基础种繁殖基地选择排灌方便、水旱轮作、自然隔离条件较好的基地。生产用种繁殖选择在 有一定灌溉条件和隔离条件的繁育基地。 4.2.2 田间病原控制 无目标病原的脱毒种苗在6～9个月生长期间做好病虫害防治。在果蔗生长各生育期和采收前进行田 间巡查，发现有目标病原和其它病原侵染的病株及时清除。 5 质量要求 5.1 整体要求 种苗植株健壮、完整，叶色正常、根系发达，无污染、无病虫为害，无遗传变异。 5.2 脱毒瓶苗 按照NY/T 1796和NY/T 2724的规定，要求根系有分叉，有主根及侧根，叶色浅绿，生长正常，无遗 传变异，无污染。脱毒瓶苗质量分为一级、二级两个等级，见表1。 表1 果蔗脱毒瓶苗等级划分 项目 2 指标 等级 一级 二级 假茎 有（+） 有（+） DB35/T 1993—2021 表1 果蔗脱毒瓶苗等级划分（续） 项目 指标 完全展开叶 片 株高 cm 1.0 cm以上白色根 条 目标病原检出率 % 遗传变异率 % 5.3 ≥4 ≥3，＜4 ≥5.0 ≥3.5，＜5.0 ≥4 ≥2，＜4 不得检出 不得检出 不得检出 不得检出 脱毒穴盘苗 按照NY/T 1796和NY/T 2724的规定，要求植株健壮，叶色正常，根系生长良好，无病虫为害，无遗 传变异株。脱毒穴盘苗质量分为一级、二级两个等级，见表2。 表2 果蔗脱毒穴盘苗等级划分 项目 等级 新出叶 片 假茎株高 cm 假茎茎粗 cm 3.0 cm以上白色根 条 目标病原检出率 % 遗传变异率 % 5.4 指标 一级 二级 ≥6 ≥4，＜6 ≥12.0 ≥8.0，＜12.0 ≥0.3 ≥0.2，＜0.3 ≥4 ≥2，＜4 不得检出 不得检出 不得检出 不得检出 脱毒种茎 按照NY/T 1796的规定，要求蔗茎新鲜、蔗芽饱满、蔗茎节上根点无萌发，大田种植后无遗传变异 株。脱毒种茎质量分为一级、二级两个等级，见表3。 3 DB35/T 1993—2021 表3 果蔗脱毒种茎等级划分 项目 等级 品种纯度 % 夹杂物率 % 种茎茎径 cm 含水量 % 发芽率 % 螟害节率 % 目标病原检出率 % 其他主要病害发病株率 % 指标 一级 二级 100 100 ≤1.0 ≤1.0 ≥2.5 ≥2.0，＜2.5 70～80 70～80 ≥80.0 ≥75.0，＜80.0 ≤1.0 ＞1.0，≤3.0 ≤1.0 ＞1.0，≤3.0 ≤3.0 ＞3.0，≤5.0 注： 其他主要病害指为害果蔗的黑穗病和梢腐病。 5.5 不合格种苗处理 脱毒瓶苗、穴盘苗目标病原检测不合格的，脱毒瓶苗经121 ℃、101 kPa高压灭菌20 min～30 min 后再废弃；穴盘苗采用焚烧或填埋方式处理。 6 有害生物检测对象 6.1 病毒 本文件检测病毒包括甘蔗花叶病毒（sugarcane mosaic virus，SCMV）、高粱花叶病毒（sorghum mosaic virus，SrMV）、甘蔗条纹花叶病毒（sugarcane streak mosaic virus，SCSMV）和甘蔗黄叶病 毒（sugarcane yellow leaf virus，SCYLV）。 6.2 细菌 本文件检测细菌包括甘蔗宿根矮化病菌（ Leifsonia xyli subsp. Xyli ， Lxx ）和甘蔗白条病菌 （Xanthomonas albilineans，Xa）。 6.3 真菌 本文件诊断的真菌性病害包括由黑穗病菌（Sporisorium scitamineum）引起的黑穗病和由梢腐病 菌（Fusarium spp.）引起的梢腐病。 4 DB35/T 1993—2021 6.4 昆虫 本文件鉴定的昆虫包括二点螟（Chilo infuscatellus Snellen）、条螟（Chilo sacchariphagus Bojer）、黄螟（Argyroploce schistaceana Snellen）、红尾白螟（Tryporyza intacta Snellen）、 大螟（Sesamia inferens Walker）、台湾稻螟（Chilo auricilius Dudgeno）等为害果蔗茎部的钻蛀 性害虫。 7 检测方法 7.1 形态指标测定 7.1.1 瓶苗株高 用标尺测量脱毒瓶苗根基位置至最新完整展开叶肥厚带处，结果以平均值表示，精确到0.1 cm。 7.1.2 瓶苗白色根长 用标尺测量脱毒瓶苗白色根的长度，记录大于或等于1.0 cm长的白色根条数。 7.1.3 瓶苗完全展开叶片数 目测并统计脱毒瓶苗植株完全展开的叶片数。 7.1.4 穴盘苗新出叶片数 目测并统计瓶苗移栽假植到穴盘期间新长出的完全展开绿叶数。 7.