ICS 65.020.20 CCS B 05 广 44 东 省 地 方 标 准 DB44/T 2323—2021 五指毛桃组织培养育苗技术规程 Code of practice on tissue culture of Ficus hirta 2021 - 07 - 28 发布 2021 - 10 - 28 实施 广东省市场监督管理局  发 布 DB44/T 2323—2021 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由广东省林业局提出﹑归口并组织实施。 本文件起草单位：梅州市农林科学院林业研究所。 本文件主要起草人：黄锦荣、朱昔娇、唐国涛、张凤、张冬生、蔡梅玲、范秀琼、简耀彩、谢金兰、 范剑明、甘奕挺。 I DB44/T 2323—2021 五指毛桃组织培养育苗技术规程 1 范围 本文件规定了五指毛桃(Ficus hirta Vahl)组织培养的外植体、瓶苗培育、瓶苗移植、档案管理等 内容。 本文件适用于五指毛桃组培苗培育。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 LY/T 1770 桉树无性系组培快繁技术规程 LY/T 1882 林木组织培养育苗技术规程 LY/T 2752 林木轻基质无纺布容器育苗技术规程 3 术语和定义 LY/T 1770和LY/T 1882界定的以及下列术语和定义适用于本文件。 五指毛桃 Ficus hirta Vahl 为桑科（Moraceae）榕属（Ficus）粗叶榕(Ficus hirta Vahl)中五裂叶型的植株，俗名五指毛桃、 掌叶榕、五指牛奶等，其干燥根味甘、辛，性平，有去红肿，祛风湿，益气固表等功效。 4 外植体 采集 选取无病虫害、健壮的当年生嫩枝为外植体。需在连续3 d晴天后采集。 预处理 切取长约2 cm～3 cm带顶芽茎段，置入干净玻璃瓶中，注入适量洗涤剂和水清洗茎段表面，用自来 水反复冲洗干净。 灭菌 在超净工作台上用75%乙醇浸泡10 s～15 s,无菌水冲洗1次～2次，然后用添加1滴～2滴吐温80的 0.1%HgCl2浸泡并不断摇动，灭菌14 min，用无菌水冲洗4次～6次。 5 瓶苗培育 1 DB44/T 2323—2021 培养基 5.1.1 配制 初代培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+IBA(0.1 mg/L～0.5 mg/L)+蔗糖30 g/L，增殖培养基为MS+6-BA(0.5 mg/L～1.5 mg/L)+IBA(0.1 mg/L～0.5 mg/L)+蔗糖30 g/L，生根培养基为1/4MS(大量元素1/4)+IBA(1.0 mg/L～2.0 mg/L)+NAA(0.1 mg/L～0.5 mg/L)+AC0.5 g/L+蔗糖20 g/L，添加卡拉胶均为6.5 g/L，pH值 调至5.8～6.2。 5.1.2 灭菌和存放 参照LY/T 1770和LY/T 1882相关条款执行。 培养条件 培养室温度26 ℃±2 ℃，相对湿度65%～70%，光照强度1000 lx～2000 lx，每天光照时长10 h～ 12 h。及时发现并清除污染材料，定期清洁培养室。 初代培养 在超净工作台上将消毒好的带顶芽茎段接种在初代培养基中，每瓶接种1段，培养30 d～40 d，可 诱导顶芽萌发，形成单芽或丛芽。 增殖培养 在超净工作台上将初代培养诱导出的幼芽接种在增殖培养基中培养，每瓶接种4（个或丛）～5（个 或丛），培养周期30 d～35 d。从外植体开始，培养时间超过4年，或继代培养超过40代，宜重新采集 外植体更新培养材料。 生根培养 在超净工作台上从增殖培养获得的芽苗中，切取具3片以上舒展叶片、高2.5 cm～3.5 cm的芽苗， 接种在生根培养基中培养，培养周期为25 d～30 d。 6 瓶苗移植 基质与容器 采用轻型基质（基质成分参照LY/T 2752相关条款执行）或黄心土作基质，以塑料薄膜袋或无纺布 袋为容器，规格为8 cm×10 cm。移植前2 d用50 %的多菌灵可湿性粉剂1000倍液淋透基质杀菌。 瓶苗炼苗 当瓶苗生根率达80%～90%，根长 0.5 cm～1.5 cm 时，可在炼苗棚内进行炼苗，炼苗10 d～15 d， 后将瓶盖拧开再炼苗3 d～5 d。 洗苗 将经过炼苗的瓶苗和培养基一起倒入清水中，洗净培养基，不要损伤幼苗。选择生长正常、叶片舒 展、根系完整、根茎结合处无愈伤组织的芽苗备用。 2 DB44/T 2323—2021 移植 移植时先在基质中掘个小孔，将芽苗植入，用基质完全覆盖小苗根部，不要按压基质，以防压断幼 根，避免夏季高温时移植。 苗期管理 6.5.1 遮荫 移植后用透光度25%的遮阳网遮荫，阴天可不遮盖，30 d后可移除遮阳网。 6.5.2 水分 移植完成后即淋透水，以后做到见干见水，保持基质湿润。 6.5.3 养分 -1 小苗移植10 d左右开始长新叶，可以薄施肥，用1 g·L 的复合肥（N-P2O5-K2O=15-15-15）水溶液 -1 淋施，7 d～10 d 一次；移植30 d后，逐渐增加到用3 g·L 的复合肥（N-P2O5-K2O=15-15-15）水溶液 淋施，10 d～15 d 一次。 6.5.4 除草 以“除早、除小、除了”为原则，及时连根拔除杂草。 苗木出圃 苗高≥20 cm，地径≥0.3 cm，生长正常，无损伤，无病虫害的苗木可以出圃。 7 有害生物防治 病害 苗期偶有炭疽病危害，发病后应及时清除病叶，集中焚烧，阻止病源传播，可用50%多菌灵可湿性 粉剂1000倍液喷洒防治。 虫害 苗期偶有卷叶蛾或粘虫的幼虫危害嫩梢和嫩叶，少量危害时人工捕杀，并用黑光灯或糖醋液诱杀成 虫。 8 档案 按LY/T 1770相关条款执行。 3