中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 保健食品中双醋酚丁 、拖拉塞米和 脱乙酰比沙可定的测定 液相色谱 -质谱 /质谱法 Determination of diaotyldiphenolisatinum ，torasemide and deacetylbisacodyl in health foods —LC‑MS/MS methodICS 67.05 CCS X 04 2025 ‑12‑11发布 2026 ‑07‑01实施 中华人民共和国海关总署 　发 布 SN/T 5882—2025SN/T 5882—2025 前 言 本文件按照 GB/T 1.1—2020《标准化工作导则　第 1部分：标准化文件的结构和起草规则 》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利 。本文件的发布机构不承担识别专利的责任 。 本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口 。 本文件起草单位 ：中华人民共和国武汉海关 、中华人民共和国拱北海关 、湖北省食品质量安全监督 检验研究院 、广州市食品检验所 。 本文件主要起草人 ：王晗、王兰兰、王惠、钱振杰、赵晓亚、杨青、万莹、尚吟竹、王鹏。 ⅠSN/T 5882—2025 保健食品中双醋酚丁 、拖拉塞米和 脱乙酰比沙可定的测定 液相色谱 -质谱 /质谱法 1 范围 本文件描述了保健食品中双醋酚丁 、拖拉塞米和脱乙酰比沙可定的液相色谱 -质谱 /质谱测定方法 。 本文件适用于片剂 、粉剂、口服液、胶囊剂、煎膏剂和丸剂类型保健食品中双醋酚丁 、拖拉塞米和脱乙 酰比沙可定的测定 。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款 。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件 ；不注日期的引用文件 ，其最新版本 （包括所有的修改单 ）适用于本 文件。 GB/T 6682　分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义 。 4 方法提要 试样中的待测物用乙腈提取 ，经基质分散固相萃取净化 ，用液相色谱 -质谱 /质谱仪测定 ，基质匹配外 标法定量 。 5 试剂和材料 除非另有说明 ，所有试剂均为分析纯 ，水为 GB/T 6682规定的一级水 。 5.1 甲醇（CH 3OH） ：色谱纯。 5.2 乙腈（CH 3CN） ：色谱纯。 5.3 甲酸（HCOOH ） ：色谱纯。 5.4 氯化钠（NaCl） 。 5.5 无水硫酸镁 （MgSO 4） 。 5.6 0.1%甲酸溶液 ：移取 1.0 mL甲酸（5.3） ，用水定容至 1 000 mL，混匀。 5.7 标准物质 ：双醋酚丁 、拖拉塞米和脱乙酰比沙可定标准物质的纯度均 ≥98%，或具有有证标准物质 证书的标准物质 ，标准物质的化合物信息见附录 A。 5.8 标准储备液 ：分别称取适量标准品 （精确至 0.000 1 g） ，用甲醇溶解 ，配制成质量浓度为 1.00 mg/mL 的标准储备液 ，-18 ℃以下避光保存 ，有效期 6个月。 1SN/T 5882—2025 5.9 标准中间液 ：用甲醇分别将各标准储备液 （5.8）稀释成浓度为 10.0 mg/L的标准中间溶液 ，-18 ℃ 以下避光保存 ，有效期 3个月。 5.10 混合基质标准工作液 ：分别准确移取适量标准中间液 （5.9） ，用基质空白溶液稀释成质量浓度分别 为0.001 mg/L、0.002 mg/L、0.005 mg/L、0.010 mg/L、0.020 mg/L和0.050 mg/L的混合基质标准溶液 ， 现用现配 。 5.11 固相萃取吸附剂 ：十八烷基键合硅胶 （C18） ，40 μm~60 μm；石墨化炭黑 （GCB） ，40 μm~60 μm。 5.12 微孔滤膜 ：有机系，0.22 μm。 6 仪器和设备 6.1 液相色谱 -质谱 /质谱仪：配电喷雾离子源 （ESI） 。 6.2 粉碎机。 6.3 分析天平 ：感量为 0.000 1 g和0.001 g。 6.4 振荡器。 6.5 涡旋混合器 。 6.6 离心机：最大转速不低于 8 000 r/min。 7 试样制备与保存 7.1 片剂、丸剂、粉剂 取代表性样品 ，片剂、丸剂用粉碎机捣碎并混合混匀 ，粉剂混合混匀 ；分成两份 ，分别装入洁净的容器 中，密封并标识 ，将试样置于 -18 ℃以下保存 ，尽快检测 。 7.2 胶囊剂 7.2.1 硬胶囊 取代表性样品 ，连胶囊壳一起用粉碎机捣碎并混合混匀 ，分成两份 ，分别装入洁净的容器中 ，密封并 标识，将试样置于 -18 ℃以下保存 ，尽快检测 。 7.2.2 软胶囊 取代表性样品 ，将胶囊壳与内容物分离 ，胶囊壳用粉碎机捣碎 ，与内容物一起混合混匀 ，分成两份 ，分 别装入洁净的容器中 ，密封并标识 ，将试样置于 -18 ℃以下保存 ，尽快检测 。 7.3 煎膏剂、口服液 取代表性样品混匀 ，分成两份 ，分别装入洁净的容器中 ，密封并标识 ，将试样置于 -18 ℃以下保存 ， 尽快检测 。 8 分析步骤 8.1 提取 8.1.1 口服液 称取 1.0 g试样（精确至 0.001 g）于50 mL离心管中 ，加入 10 mL乙腈（5.2） 、1 g氯化钠（5.4）和4 g 2SN/T 5882—2025 无水硫酸镁 （5.5） ，迅速剧烈混合后机械振荡提取 30 min，8 000 r/min离心 5 min，取上清液待净化 。 8.1.2 片剂、丸剂、粉剂、胶囊剂、煎膏剂 称取 1.0 g试样（精确至 0.001 g）于50 mL离心管中 ，加入 10 mL乙腈（5.2） ，机械振荡提取 30 min， 8 000 r/min离心 5 min，取上清液待净化 。 8.2 净化 吸取 2 mL上清液于 15 mL离心管中 ，加入 200 mg C 18和20 mg GCB ，涡旋振荡 2 min，8 000 r/min 离心 5 min，取上清液过 0.22 μm滤膜后液相色谱 -质谱 /质谱仪测定 。 8.3 基质空白溶液的制备 取不含双醋酚丁 、拖拉塞米和脱乙酰比沙可定的样品 ，按8.1~8.2中的步骤制备 。 8.4 测定 8.4.1 液相色谱参考条件 液相色谱 参考条件如下 ： a）色谱柱：C18 色谱柱，100 mm× 3.0 mm（内径） ，粒径 3.5 μm，或性能相当者 ； b）柱温：30 ℃； c）流动相：A为0.1%甲酸溶液 （5.6） ，B为乙腈（5.2） ，梯度洗脱 ，洗脱程序见表 1； 表1　液相色谱的梯度洗脱程序 时间 /min 0.00 2.00 5.00 7.00 7.50 10.00流动相 A/% 90 90 5 5 90 90流动相 B/% 10 10 9595 10 10 d）流速：0.3 mL/min ； e）进样量：5 μL。 8.4.2 质谱参考条件 质谱参考条件如下 ： a） 离子源：电喷雾离子源 （ESI） ； b） 扫描方式 ：正离子扫描 ； c） 检测方式 ：多反应监测模式 （MRM） ； d） 雾化气、气帘气、辅助加热气 、碰撞气均为高纯氮气及其他适合气体 ；使用前应调节各气体流量 以使质谱灵敏度达到检测要求 ，喷雾电压 、碰撞气能量等参数应优化至最佳灵敏度 ，其他参考质 谱条件见附录 B。 3SN/T 5882—2025 8.4.3 液相色谱 -质谱 /质谱测定 8.4.3.1 定性测定 按照液相色谱 -质谱 /质谱条件测定试样和混合基质标准工作液 ，试样中目标化合物的保留时间与混 合基质标准工作液中对应化合物的保留时间偏差在 ±2.5%之内；定性离子对的相对丰度与浓度相当的 混合基质标准工作液的相对丰度一致 ，相对丰度偏差不超过表 2的规定，且每个离子的信噪比均 ≥3，则 可判断试样中存在相应的被测物 。 表2　定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度 /% 最大允许偏差 /%>50 ±2020~50（含） ±2510~20（含） ±30≤10 ±50 8.4.3.2 定量测定 将混合基质标准工作液和试样溶液依次注入液相色谱 -质谱 /质谱仪中 ，测得定量离子峰面积 。混合 基质标准工作液和待测液中双醋酚丁 、拖拉塞米和脱乙酰比沙可定的响应值均应在仪器检测的定量线性 范围内。若检测结果超过基质标准曲线线性范围 ，将样品以基质空白溶液稀释浓度至线性范围内测定 。 在上述仪器条件下 ，双醋酚丁 、拖拉塞米和脱乙酰比沙可定的提取离子色谱图见附录 C。 8.5 空白试验 除了不加试样外 ，均按上述步骤进行 。 9 结果计算和表述 试样中双醋酚丁 、拖拉塞米和脱乙酰比沙可定的含量 Xi，以质量分数毫克每千克 （mg/kg）表示，单点 校正按式 （1）计算： Xi=ci×A×V Ai×m×1 000 1 000…………………………… （ 1 ） 式中： Xi——试样中被测组分含量 ，单位为毫克每千克 （mg/kg） ； ci——标准溶液中待测组分质量浓度 ，单位为毫克每升 （mg/L） ； A——试样溶液对应的色谱峰面积响应值 ； Ai——标准溶液对应的色谱峰面积响应值 ； V——试样最终定容体积 ，单位为毫升 （mL） ； m——试样质量 ，单位为克 （g） 。 多点校准时 ，用式（2）计算。 Xi=ci×V m×1 000 1 000………………………… （2） 式中： Xi——试样中被测组分含量 ，单位为毫克每千克 （mg/kg） ； ci——从标准工作曲线得到的样液中待测组分质量浓度 ，单位为毫克每升 （mg/L） ； V——试样最终定容体积 ，单位为毫升