中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 出口动物源性食品中左旋咪唑残留量的 测定　液相色谱 -质谱 /质谱法 Determination of levamisole residue in animal‑derived food for export — LC‑MS/MS methodICS 67.050 CCS X 04 2025 ‑12‑11发布 2026 ‑07‑01实施 中华人民共和国海关总署 　发 布 SN/T 5877—2025SN/T 5877—2025 前 言 本文件按照 GB/T 1.1—2020《标准化工作导则　第 1部分：标准化文件的结构和起草规则 》的规定 起草。 请注意文件的某些内容可能涉及专利 。本文件的发布机构不承担识别专利的责任 。 本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口 。 本文件起草单位 ：合肥海关技术中心 、杭州海关技术中心 、中国海关科学技术研究中心 、湛江海关技 术中心。 本文件主要起草人 ：宋伟、侯建波、孔维恒、李红权、张文华、韩芳、周典兵、吴琼、刘宇欣、周晓莹、蒙晓笛、 谢鹏飞。 ⅠSN/T 5877—2025 出口动物源性食品中左旋咪唑残留量的 测定　液相色谱 -质谱 /质谱法 1 范围 本文件描述了 动物源性食品中左旋咪唑残留量的液相色谱 -质谱 /质谱检测方法 。 本文件适用于水产 、畜禽肉、畜禽内脏 、禽蛋、奶、蜂蜜、蜂王浆、肠衣、脂肪等动物源性食品中左旋咪 唑残留量的测定 ，其他动物源性食品参照执行 。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款 。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件 ；不注日期的引用文件 ，其最新版本 （包括所有的修改单 ）适用于本 文件。 GB/T 6682　分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义 。 4 原理 试样中左旋咪唑残留经乙腈提取 ，提取液经分散固相萃取净化 ，液相色谱 -质谱 /质谱法测定 ，内标法 定量。 5 试剂和材料 除非另有说明 ，所用试剂均应为分析纯 ，水应为 GB/T 6682规定的一级水 。 5.1 试剂 5.1.1 乙腈（CH 3CN） ：色谱纯。 5.1.2 甲醇（CH 3OH） ：色谱纯。 5.1.3 甲酸（HCOOH ） ：色谱纯。 5.1.4 甲酸铵（HCOONH 4） 。 5.1.5 无水硫酸钠 （Na 2SO 4） 。 5.1.6 无水硫酸镁 （MgSO 4） 。 5.2 溶液配制 5.2.1 10 mmol/L 甲酸铵溶液 （含0.1%甲酸） ：取0.63 g甲酸铵和 1 mL甲酸，用水溶解后定容至 1 000 mL。 5.2.2 乙腈 -甲酸铵溶液 ：取5 mL乙腈，用10 mmol/L 甲酸铵溶液 （含0.1%甲酸）稀释至 100 mL。 1SN/T 5877—2025 5.3 标准品 5.3.1 标准品：盐酸左旋咪唑 （Levamisole Hydrochloride ，CAS号：16595 ‑80‑5） ，纯度大于 98%，或等效有 证标准物质 。 5.3.2 内标物：盐酸左旋咪唑 ‑D 5（Levamisole‑D 5 Hydrochloride ，CAS号：1246819 ‑64‑6） ，纯度大于 98%， 或等效有证标准物质 。 5.4 标准溶液配制 5.4.1 左旋咪唑标准储备溶液的配制 ：准确称取 11.78 mg盐酸左旋咪唑标准品 （相当于约 10 mg左旋咪 唑，精确至 0.01 mg） ，用甲醇溶解并稀释定容于 10 mL容量瓶，配制成左旋咪唑质量浓度为 1 mg/mL 的 标准储备液 ，-18 ℃下保存，有效期 6个月。 5.4.2 同位素内标储备液 ：准确称取 1 mg盐酸左旋咪唑 ‑D 5标准品（精确至 0.01 mg） ，用甲醇溶解并稀 释定容于 10 mL容量瓶，配制成盐酸左旋咪唑 ‑D 5质量浓度为 100 μg/mL的标准储备液 ，-18 ℃下保存， 有效期 6个月。 5.4.3 左旋咪唑标准中间溶液 ：精密移取 1.0 mL左旋咪唑标准储备溶液 ，于100 mL容量瓶，用甲醇定 容，配制成左旋咪唑质量浓度为 10 μg/mL的标准中间液 ，0 ℃~ 4 ℃保存，有效期 3个月。 5.4.4 同位素内标中间溶液 ：精密移取 1.0 mL同位素内标储备溶液 ，于10 mL容量瓶，用甲醇定容 ，配 制成盐酸左旋咪唑 ‑D 5质量浓度为 10 μg/mL的同位素内标中间液 ，0 ℃~ 4 ℃保存，有效期 3个月。 5.4.5 左旋咪唑标准工作液 ：精密移取 1.0 mL左旋咪唑标准中间液 ，于100 mL容量瓶，用乙腈稀释 ，配 制成左旋咪唑质量浓度为 100 μg/L的标准工作液 ，0 ℃~ 4 ℃保存，有效期 1个月。 5.4.6 同位素内标工作液 ：精密移取 2.0 mL同位素内标中间液 ，于100 mL容量瓶，用乙腈稀释 ，配制成 盐酸左旋咪唑 ‑D 5质量浓度为 200 μg/L的同位素内标工作液 ，0 ℃~ 4 ℃保存，有效期 1个月。 5.5 材料 5.5.1 十八烷基键合硅胶 （C18） ，粒径 40 μm~60 μm。 5.5.2　N‑丙基乙二胺 （PSA） ，粒径 40 μm~60 μm。 5.5.3 石墨化碳黑 （GCB） ，粒径 40 μm~60 μm。 5.5.4 滤膜：0.22 μm，有机系。 6 仪器和设备 6.1 液相色谱 -质谱 /质谱仪：配电喷雾离子源 （ESI） 。 6.2 分析天平 ：感量为 0.01 g和0.01 mg。 6.3 组织捣碎机 。 6.4 均质器：转速不低于 10 000 r/min。 6.5 涡旋振荡器 。 6.6 高速冷冻离心机 ：最大转速不低于 10 000 r/min。 7 试样制备与保存 7.1 水产、畜禽肉、畜禽内脏 、脂肪 从样品可食部分取出有代表性样品 500 g，用组织捣碎机捣碎 ，均匀分成两份 ，分别装入洁净的容器 2SN/T 5877—2025 内，密封并做好标记 ，一份作为试样 ，一份作为备用 ，分别于 -18 ℃及以下条件保存 。 7.2 禽蛋 取出有代表性样品 500 g，洗净、去壳后充分混匀 ，均匀分成两份 ，分别装入洁净的容器内 ，密封并做 好标记，一份作为试样 ，一份作为备用 ，分别于 -18 ℃及以下条件保存 。 7.3 奶、蜂蜜、蜂王浆 对于结晶的蜂蜜样品 ，在密闭的情况下 ，放置于不超过 60℃的水浴中融解 ，搅拌均匀后迅速冷却至 室温。 对于冷冻的蜂王浆样品 ，在常温下完全解冻后 ，搅拌均匀 。 取出有代表性品 500 g，充分混匀 ，均匀分成两份 ，分别装入洁净容器中 ，密封并标明标记并做好标 记，一份作为试样 ，一份作为备用 ，蜂蜜常温保存 ，奶于 0 ℃~ 4 ℃条件下保存 ，蜂王浆于 -18 ℃及以下条 件保存。 7.4 肠衣 取出有代表性样品 500 g，去掉附盐 ，沥净盐卤 ，将肠衣剪碎混匀 ，均匀分成两份 ，分别装入洁净容器 中，密封并标明标记 ，一份作为试样 ，一份作为备用 ，分别于 -18 ℃及以下条件保存 。 8 分析步骤 8.1 提取 8.1.1 水产、畜禽肉、畜禽内脏 、肠衣 称取 4 g试料（精确至 0.01 g） ，置于 50 mL离心管中 ，加入 100 μL同位素内标工作液 （5.4.6） ，加入 10 mL乙腈（5.1.1），以10 000 r/min 高速均质 1 min后加入 5 g无水硫酸钠 （5.1.5），再加盖涡旋振荡 1 min；以4 000 r/min，4 ℃离心 5 min，取1.0 mL上层清液待净化 。 8.1.2 禽蛋、奶 称取 4 g试料（精确至 0.01 g） ，置于 50 mL离心管中 ，加入 100 μL同位素内标工作液 （5.4.6） ，然后 加入 10 mL乙腈（5.1.1） ，加盖涡旋振荡 2 min后加入 5 g无水硫酸钠 （5.1.5） ，再加盖涡旋振荡 1 min；以 4 000 r/min，4 ℃离心 5 min，取1.0 mL上层清液待净化 。 8.1.3 蜂蜜、蜂王浆 称取 4 g试料（精确至 0.01 g） ，置于 50 mL离心管中 ，加入 100 μL同位素内标工作液 （5.4.6） ，然后 加入 4 mL水溶解。加入 10 mL乙腈（5.1.1） ，加盖涡旋振荡 2 min后加入 5 g无水硫酸钠 （5.1.5） ，再加 盖涡旋振荡 1 min；以4 000 r/min，4 ℃离心 5 min，取1.0 mL上层清液待净化 。 8.1.4 脂肪 试料在 60 ℃水浴下加热融解并混匀 。称取 2 g试料（精确至 0.01 g） ，置于 50 mL离心管中 ，加入 50 μL同位素内标工作液 （5.4.6），然后加入 10 mL乙腈（5.1.1），加盖涡旋振荡 2 min。以4 000 r/min， -5 ℃离心 10 min，取2.0 mL上层清液 ，之后加入乙腈饱和的正己烷溶液除油数次 ，取下层乙腈溶液待 净化。 3SN/T 5877—2025 8.2 净化 8.2.1 水产（虾、蟹等色素含量高的试样除外 ） 、畜禽肉、畜禽内脏 、肠衣、奶、蜂蜜、蜂王浆 将1.0 mL待净化液加入已装有 50 mg C 18（5.5.1） 、50 mg PSA （5.5.2）和150 mg无水硫酸镁 （5.1.6） 的2 mL离心管中 ，涡旋 1 min，10 000 r/min，4 ℃离心 5 min；取0.5 mL上清液