ICS71.100.70 CCSY42 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T5708—2025 化妆品中苯丙香豆素和4,6-二甲基-8-特 丁基香豆素的测定 高效液相色谱法 DeterminationofPhenprocoumonand4,6-Dimethyl-8-tert- butylcoumarinincosmetics—HPLCmethod 2025-12-11发布 2026-07-01实施 中华人民共和国海关总署发布前 言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。 本文件起草单位:中华人民共和国天津海关。 本文件主要起草人:陈旭艳、陈其勇、章骅、娄婷婷、杨爽、黄晨。 ⅠSN/T5708—2025化妆品中苯丙香豆素和4,6-二甲基-8-特 丁基香豆素的测定 高效液相色谱法 1 范围 本文件描述了化妆品中苯丙香豆素和4,6-二甲基-8-特丁基香豆素的高效液相色谱检测方法。 本文件适用于水状、乳状、膏霜状、凝胶状、粉状、油状化妆品中苯丙香豆素和4,6-二甲基-8-特丁基 香豆素的检测。其他化妆品基质经充分验证后参照执行。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文 件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于 本文件。 GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 方法提要 水状、乳状、膏霜状、凝胶状、粉状化妆品用甲醇提取,油状化妆品用甲醇-四氢呋喃混合溶液提 取,提取液经离心过滤后,用高效液相色谱法测定,外标法定量。 5 试剂和材料 除另有规定外,所有试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。 5.1 乙腈:色谱纯。 5.2 甲醇:色谱纯。 5.3 乙酸铵:色谱纯。 5.4 冰乙酸:色谱纯。 5.5 四氢呋喃:色谱纯。 5.6 乙酸铵溶液(0.02mol/L):称取1.5416g乙酸铵,加入适量水溶解,用水定容至1000mL,用乙酸 调节pH至4.3。 5.7 甲醇-四氢呋喃(8+2,体积比):量取8mL甲醇和2mL四氢呋喃,混匀。 5.8 标准物质:苯丙香豆素(C18H16O3,CAS号:435-97-2)和4,6-二甲基-8-特丁基香豆素(C15H18O2, CAS号:17874-34-9),纯度≥95%。 5.9 苯丙香豆素、4,6-二甲基-8-特丁基香豆素标准储备溶液:分别准确称取适量的苯丙香豆素、4,6-二 甲基-8-特丁基香豆素标准品(精确到0.1mg),用甲醇(5.2)配制成质量浓度为1000μg/mL标准储备 1SN/T5708—2025溶液,4℃保存,有效期为3个月。 5.10 苯丙香豆素和4,6-二甲基-8-特丁基香豆素混合标准中间溶液:分别准确吸取苯丙香豆素和4,6- 二甲基-8-特丁基香豆素标准储备溶液(5.9)各1mL于10mL容量瓶中,用甲醇(5.2)定容至刻度,配制 成质量浓度为100μg/mL混合标准中间溶液,4℃保存,有效期为1个月。 5.11 苯丙香豆素和4,6-二甲基-8-特丁基香豆素混合标准工作溶液:分别准确吸取苯丙香豆素和4,6- 二甲基-8-特丁基香豆素混合标准中间液(5.10)0.04mL、0.1mL、0.25mL、0.5mL、1.0mL于10mL容 量瓶中,用甲醇(5.2)定容至刻度,配制成质量浓度为0.4μg/mL、1.0μg/mL、2.5μg/mL、5.0μg/mL、 10.0μg/mL的混合标准工作溶液。 5.12 有机相滤膜:0.45μm。 5.13 刻度具塞离心管:15mL。 6 仪器和设备 6.1 高效液相色谱仪,配有二极管阵列检测器或紫外检测器。 6.2 分析天平:感量0.1mg和0.01g。 6.3 超声波水浴。 6.4 离心机(转速大于5000r/min)。 6.5 pH计。 6.6 涡旋振荡器。 7 测定步骤 7.1 试样处理 7.1.1 水状、乳状、膏霜状、凝胶状、粉状化妆品 称取试样约1g(精确至0.01g)于15mL离心管中,加甲醇(5.2)8mL,涡旋振荡使基质均匀分散 后,用甲醇(5.2)定容至10mL,超声提取20min,混匀,于5000r/min离心5min,上清液经0.45μm有 机相滤膜过滤,滤液供液相色谱测定。 7.1.2 油状化妆品 称取试样约1g(精确至0.01g)于15mL离心管中,加甲醇-四氢呋喃混合溶液(5.7)8mL,涡旋振荡使 基质均匀分散后,用甲醇-四氢呋喃混合溶液(5.7)定容至10mL,超声提取20min,混匀,于5000r/min离 心5min,上清液经0.45μm有机相滤膜过滤,滤液供液相色谱测定。 7.2 测定 7.2.1 液相色谱参考条件 7.2.1.1 色谱柱:CN柱,5μm,250mm×4.6mm,或相当者。 7.2.1.2 流动相:乙腈和乙酸铵溶液(5.6)(50+50,体积比),等度洗脱。 7.2.1.3 流速:1mL/min。 7.2.1.4 柱温:30℃。 7.2.1.5 检测波长:280nm。 7.2.1.6 进样量:10μL。 2SN/T5708—20257.2.2 色谱测定 质量浓度为0.4μg/mL、1.0μg/mL、2.5μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL的混合标准工作溶液,按 照色谱条件(7.2.1)进行测定,以色谱峰的峰面积为纵坐标、与其对应的浓度为横坐标作图,绘制标准工 作曲线。在上述仪器条件下,苯丙香豆素的保留时间约为6.2min,4,6-二甲基-8-特丁基香豆素的保留 时间约为8.6min。标准溶液色谱图见图A.1。 试样溶液(7.1)注入液相色谱仪,按照色谱条件(7.2.1)进行测定,记录色谱峰的保留时间和峰面积。 苯丙香豆素和4,6-二甲基-8-特丁基香豆素含量高的试样可取适量用甲醇稀释到线性范围内进行测定。 阳性样品需用液相色谱-质谱/质谱进行确证(见附录B),标准溶液液相色谱-质谱/质谱图见图A.2。 7.3 空白试验 除不加待测试样外,其他均按7.2操作步骤进行。 7.4 结果计算 化妆品试样中苯丙香豆素和4,6-二甲基-8-特丁基香豆素的含量以微克每克(μg/g)表示,多点校正 按式(1)计算。 X=(ρ-ρ0)×V×f m…………………………(1) 式中: X———化妆品样品中苯丙香豆素和4,6-二甲基-8-特丁基香豆素的含量,单位为微克每克(μg/g); ρ———从标准工作曲线上查出的试样溶液中苯丙香豆素和4,6-二甲基-8-特丁基香豆素的质量浓 度,单位为微克每毫升(μg/mL); ρ0———从标准工作曲线上查出的空白溶液中苯丙香豆素和4,6-二甲基-8-特丁基香豆素的质量浓 度,单位为微克每毫升(μg/mL); V———试样定容体积,单位为毫升(mL); f———稀释倍数; m———试样的质量,单位为克(g)。 单点校正按式(2)计算,计算结果应扣除空白值。 X=ρ×A×V×f As×m…………………………(2) 式中: X———化妆品样品中苯丙香豆素和4,6-二甲基-8-特丁基香豆素的含量,单位为微克每克(μg/g); ρ———标准工作溶液中苯丙香豆素和4,6-二甲基-8-特丁基香豆素的质量浓度,单位为微克每毫升 (μg/mL); A———化妆品样品中苯丙香豆素和4,6-二甲基-8-特丁基香豆素的峰面积; As———标准工作溶液中苯丙香豆素和4.6-二甲基-8-特丁基香豆素的峰面积; V———试样定容体积,单位为毫升(mL); f———稀释倍数; m———试样的质量,单位为克(g)。 计算结果保留两位小数。 8 检出限和定量限 本方法对苯丙香豆素和4,6-二甲基-8-特丁基香豆素的检出限为1.5μg/g,定量限为5μg/g。 3SN/T5708—20259 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定的结果的绝对差值不应超过算术平均值的10%。 4SN/T5708—2025