QB/T 8141－2025 中 华 人 民 共 和 国 轻 工 行 业 标 准 饮料中绿原酸类化合物的测定 高效液相色谱法 QB/T 8141－2025 * 中国轻工业出版社出版发行 地址：北京鲁谷东街 5号 邮政编码： 100040 发行电话： (010)85119832 网址： http://www.chlip.com.cn Email：[email protected] 轻工业标准化编辑出版委员会编辑 地址：北京西城区月坛北小街 6号院 邮政编码： 1000 37 电话：(010)68049923 * 版权所有 侵权必究 书号： 155019· 7114 印数： 1－200册 定价： 23. 00元 ICS 67.050 CCS X 04 中华人民共和国轻工行业标准 QB/T 8141－2025 饮料中绿原酸类化合物的测定 高效液相色谱法 Determination of chlorogenic acid compounds in beverages —High performance liquid chr omatography 2025-04-10发布 2025-11-01实施 中华人民共和国工业和信息化部 发布 QB/T 8141－2025 I 前 言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由中国轻工业联合会提出。 本文件由全国食品工业标准化技术委员会 （SAC/TC 64 ）归口。 本文件起草单位：广州王老吉药业股份有限公司、广东省食品工业研究所有限公司（国家轻工业食 品质量监督检测广州站）、广州王老吉大健康产业有限公司、广药王老吉（毕节）产业有限公司、东鹏 饮料（集团）股份有限公司、广东长兴生物科技股份有限公司、康正检测服务股份有限公司、山东嘉源 检测技术股份有限公司、翁源广业清怡食品科技有限公司、新疆科奇食品有限公司、无锡市食品安全检 验检测中心、东莞市南北检测认证技术有限公司、江苏广海检验检测有限公司、深圳中检联检测有限公 司。 本文件主要起草人：黄晓丹、许佩勤、翁少全、伍柏坚、胡海娥、王利平、谭宇鹏、王瑞强、黄柳 霞、廖燕、利通、冯永巍、何晓军、朱志红、李俊祥、彭绍忠、郑荣波、李学莉、卢君、邬晓莹、姚骏、 黄柏森、朱姣、林咏珊、冯志强、陈宇欢、车日晖、李俊武。 本文件为首次发布。 QB/T 8141－2025 1 饮料中绿原酸类化合物的测定 高效液相色谱法 1 范围 本文件描述了液体饮料中绿原酸类化合物的高效液相色谱测定方法。 本文件适用于液体饮料（蛋白饮料、咖啡类饮料除外）中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸 A、异绿原酸 B、异绿原酸 C、1,5-二咖啡酰奎尼酸单个或多个含量的测定。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用 于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 原理 试样中的绿原酸类化合物过滤后经反相液相色谱柱分离，紫外检测器或二极管阵列检测器检测，外 标法定量。 5 试剂和材料 除另有说明外，本方法所用试剂均为分析纯，水为符合 GB/T 6682 规定的一级水。 5.1 试剂 5.1.1 甲醇（ CH 3OH）：色谱纯。 5.1.2 乙腈（ CH 3CN）：色谱纯。 5.1.3 乙酸（ CH 3COOH）。 5.1.4 甲酸（ CH 2O2）。 5.2 试剂配制 5.2.1 乙酸水溶液（ 0.1%，体积比）：取 1 mL乙酸，加水定容至 1 000 mL，混匀。 5.2.2 甲酸水溶液（ 0.1%，体积比）：取 1 mL甲酸，加水定容至 1 000 mL，混匀。 5.3 标准品 5.3.1 新绿原酸（ C16H18O9，CAS号： 906-33-2），纯度不小于 98%或经国家认证并授予标准物质证 书的标准品。 QB/T 8141－2025 2 5.3.2 绿原酸（ C16H18O9，CAS号:327-97-9），纯度不小于 98%或经国家认证并授予标准物质证书的 标准品。 5.3.3 隐绿原酸（ C16H18O9，CAS号： 905-99-7），纯度不小于 98%或经国家认证并授予标准物质证 书的标准品 。 5.3.4 异绿原酸 A（C25H24O12，CAS号： 2450-53-5），纯度不小于 98%或经国家认证并授予标准物 质证书的标准品。 5.3.5 异绿原酸 B（C25H24O12，CAS号： 14534-61-3），纯度不小于 98%或经国家认证并授予标准物 质证书的标准品。 5.3.6 异绿原酸 C（C25H24O12，CAS号： 32451-88-0），纯度不小于 98%或经国家认证并授予标准物 质证书的标准品。 5.3.7 1,5-二咖啡酰奎尼酸（ C25H24O12，CAS号： 19870-46-3），纯度不小于 98%或经国家认证并授 予标准物质证书的标准品。 5.4 标准溶液配制 5.4.1 绿原酸类化合物标准储备溶液 分别精确称取 10 mg（精确至 0.01 mg）新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸 A、异绿原酸 B、 异绿原酸 C、1,5-二咖啡酰奎尼酸标准品于 10 mL棕色容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，配制成浓 度分别为 1 mg/mL的新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸 A、异绿原酸 B、异绿原酸 C、1,5-二咖啡 酰奎尼酸标准储备溶液， -18 ℃避光储存，有效期 1个月。 5.4.2 绿原酸类化合物混合标准中间溶液（ 100 μg/mL） 分别准确吸取 1 mL新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸 A、异绿原酸 B、异绿原酸 C、1,5-二咖 啡酰奎尼酸标准储备溶液用水定容至 10 mL，配制成绿原酸类化合物混合标准中间溶液，现用现配。 5.4.3 绿原酸类化合物系列混合标准工作溶液 分别吸取一定量的绿原酸类化合物混合标准中间溶液，用水稀释配制成绿原酸类化合物系列混合标 准工作溶液，标准工作溶液系列质量浓度分别为 0.5 μg/mL、1 μg/mL、2 μg/mL、5 μg/mL、10 μg/mL、 20 μg/mL，现用现配。 5.5 材料 滤膜： 0.45 μm，水相。 6 仪器和设备 6.1 高效液相色谱仪：带紫外检测器或二极管阵列检测器。 6.2 分析天平：感量分别为 0.000 01 g和0.001 g。 6.3 超声波清洗仪： 温度范围 10℃～80 ℃。 6.4 涡旋混合器：最高转速不低于 500 r/min 。 QB/T 8141－2025 3 7 分析步骤 7.1 试样的提取 取5.00 mL样液（同时准确称其质量，精确到 0.001 g） ，混匀（碳酸饮料先用超声清洗仪超声脱气 30 min 后再取样测定），若试样中绿原酸类化合物含量较高，可适当进行稀释，过 0.45 μm水相滤膜，待测。 7.2 仪器参考条件 a) 色谱柱： C18（4.6 mm×250 mm，5 µ m），或具有同等性能的色谱柱。 b) 柱温： 30 ℃。 c) 流速： 1.0 mL/min 。 d) 进样体积： 100 µ L。 e) 检测波长： 327 nm。 f) 流动相： 流动相 A为0.1%乙酸水， 流动相 B为0.1%甲酸水， 流动相 C为乙腈，梯度洗脱参考条 件见表 1。 表1 梯度洗脱参考条件 时间 /min 流动相 A/（%） 流动相 B/（%） 流动相 C/（%） 0.0 81 9 10 12.0 81 9 10 12.5 72 8 20 28.0 72 8 20 28.1 81 9 10 30.0 81 9 10 7.3 标准曲线的制作 将标准系列工作液分别注入高效液相色谱仪中，测定相应的色谱峰面积，以标准工作液的质量浓度 为横坐标，以响应值 (峰面积)为纵坐标，绘制标准曲线。 7.4 试样测定 试液（ 7.1）进样，得到色谱峰面积响应值，根据标准曲线得到待测液中绿原酸类化合物的质量浓 度。新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸 A、异绿原酸 B、异绿原酸 C、1,5-二咖啡酰奎尼酸的混合 标准溶液色谱图和试样色谱图见附录 A。 8 分析结果的表述 试样中绿原酸类化合物的含量按公式（ 1）或公式（ 2）计算。 ƒ100 Xρ=   ………………………… （1） 式中： X——试样中绿原酸类物质的含量，单位为微克每百毫升（ μg/100