ICS67.050 CCSX04 中华人民共和国国家标准 GB/T46804—2025 食品中磷脂酰丝氨酸的测定 Determinationofphosphatidylserineinfood 2025-12-02发布 2026-07-01实施 国家市场监督管理总局 国家标准化管理委员会发布前 言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件规定了食品质量相关技术要求,食品安全相关要求见有关法律法规、政策和食品安全标准等 文件。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由全国食品工业标准化技术委员会(SAC/TC64)提出并归口。 本文件起草单位:广东省食品工业研究所有限公司、广东省东莞市质量监督检测中心、国检测试控 股集团(安徽)拓维检测服务有限公司、安利(中国)日用品有限公司、翁源广业清怡食品科技有限公司、 江苏广海检测检验有限公司、中国科学院微生物研究所、仙乐健康科技股份有限公司、广东省科学院测 试分析研究所(中国广州分析测试中心)、理星(宁波)生物科技有限公司、青岛谱尼测试有限公司、谱尼 测试集团广西有限公司、青岛恒诺世佳品牌管理有限公司、沈阳天峰生物制药有限公司、河北迈金农业 科技开发有限公司、广东广业清怡食品科技股份有限公司、东莞市南北检测认证技术有限公司、纽诺健 康科学(中国)有限公司、山东佰安瑞生物药业有限公司、上海欧睿生物科技有限公司、河北远大九孚生 物科技有限公司、广州白云山汉方现代药业有限公司、四川康联生物科技有限公司、上海统园食品技术 有限公司、福建省工业产品生产许可证审查技术中心、山东悠乐滋生物科技有限公司、邦泰生物工程 (深圳)有限公司、湖南国燕控股集团有限公司。 本文件主要起草人:庄俊钰、赖毅东、柯洋洋、刘春丽、王淑芝、林丹、何颖、许伟沂、王李平、袁永红、 嵇春波、袁焕明、王桂森、张贵明、赵新庄、贝荣廷、何焜鹏、廖明慧、梁丽敏、杨静、车日晖、利通、张娜、 陈秋霞、杜阳吉、陈秋森、何晓军、蔡振、朱培丰、王玉梅、朱程军、许文东、舒智、刘金双、罗春连、王志勇、 舒尚科、康军。 ⅠGB/T46804—2025 食品中磷脂酰丝氨酸的测定 1 范围 本文件描述了食品中磷脂酰丝氨酸含量的测定方法。 本文件适用于饮料、糖果(压片糖果、凝胶糖果)、方便食品、乳制品等食品中磷脂酰丝氨酸含量的 测定。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文 件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于 本文件。 GB/T6682—2008 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 原理 试样中磷脂酰丝氨酸经提取净化后,采用正相液相色谱法分离,用蒸发光散射检测器(ELSD)测 定,外标法定量。 5 试剂和材料 除非另有说明,所有试剂均为分析纯。 5.1 试剂 5.1.1 甲醇(CH3OH):色谱纯。 5.1.2 乙腈(CH3CN):色谱纯。 5.1.3 三氯甲烷(CHCl3):色谱纯。 5.1.4 正己烷[CH3(CH2)4CH3]:色谱纯。 5.1.5 异丙醇[(CH3)2CHOH]:色谱纯。 5.1.6 正丙醇(C3H7OH):色谱纯。 5.1.7 三乙胺[(CH3CH2)3N]。 5.1.8 乙酸(CH3COOH)。 5.1.9 盐酸(HCl)。 5.1.10 磷酸(H3PO4)。 5.1.11 氯化钠(NaCl)。 1GB/T46804—2025 5.1.12 二水合磷酸二氢钠(NaH2PO4·2H2O)。 5.1.13 十二水合磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)。 5.1.14 氢氧化钠(NaOH)。 5.1.15 水(H2O):为GB/T6682—2008规定的一级水。 5.2 试剂配制 5.2.1 三氯甲烷-甲醇溶液(90+10):取900mL三氯甲烷(5.1.3)和100mL甲醇,混匀备用。 5.2.2 甲醇-盐酸溶液(90+10):取90mL甲醇(5.1.1)和10mL盐酸(5.1.9),混匀备用。 5.2.3 乙腈-正丙醇溶液(60+30):取60mL乙腈(5.1.2)和30mL正丙醇(5.1.6),混匀备用。 5.2.4 异丙醇-甲醇盐酸溶液(80+20):取80mL异丙醇(5.1.5)和20mL甲醇-盐酸溶液(5.2.2),混匀 备用。 5.2.5 正己烷-异丙醇-乙酸-三乙胺溶液(820+170+10+0.8):取820mL正己烷(5.1.4)、170mL异丙 醇(5.1.5)、10mL乙酸(5.1.8)、0.8mL三乙胺(5.1.7),混匀备用。 5.2.6 异丙醇-水-乙酸-三乙胺溶液(850+140+10+0.8):取850mL异丙醇(5.1.5)、140mL水、10mL 乙酸(5.1.8)、0.8mL三乙胺(5.1.7),混匀备用。 5.2.7 饱和氯化钠溶液:称取100g氯化钠(5.1.11),加入热水200mL,超声混匀,冷却至形成固液两相 的饱和溶液。 5.2.8 氢氧化钠溶液(1mol/L):称取4.0g氢氧化钠(5.1.14)于烧杯中搅拌溶解,冷却至室温后转移至 100mL容量瓶中,用水定容至刻度并混匀。 5.2.9 磷酸盐缓冲溶液:称取27.4g二水合磷酸二氢钠(5.1.12)及8.80g十二水合磷酸氢二钠(5.1.13) 于1000mL烧杯中,加入800mL水溶解后,用1mol/L氢氧化钠溶液(5.2.8)调节pH至6.0,再转移 至1000mL容量瓶中,用水定容至刻度并混匀。 5.3 材料 5.3.1 氨基固相萃取柱:500mg/6mL,或性能相当者。 5.3.2 滤膜:0.22μm,有机相。 5.4 标准品 磷脂酰丝氨酸(C42H82NO10P,CAS号:51446-62-9):纯度≥97%,或经国家认证并授予标准样品/ 标准物质证书的标准样品/标准物质。 5.5 标准溶液配制 5.5.1 磷脂酰丝氨酸标准储备液(10mg/mL):准确称取磷脂酰丝氨酸标准品100.0mg(精确至0.0001g), 用适量三氯甲烷-甲醇溶液(5.2.1)溶解,移入10mL容量瓶中,并用三氯甲烷-甲醇溶液(5.2.1)定容至 刻度,混匀。-20℃下冷冻保存,有效期为1个月。 5.5.2 磷脂酰丝氨酸标准中间液(1mg/mL):准确移取磷脂酰丝氨酸标准储备液(5.5.1)1mL至10mL 容量瓶中,用三氯甲烷-甲醇溶液(5.2.1)定容至刻度。临用现配。 5.5.3 磷脂酰丝氨酸标准工作液:分别吸取磷脂酰丝氨酸标准中间液(5.5.2)0.2mL、0.5mL、1mL、 1.5mL、2mL、3mL至10mL容量瓶,用三氯甲烷-甲醇溶液(5.2.1)定容至刻度,混匀。磷脂酰丝氨酸 标准系列溶液的质量浓度分别为20μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、150μg/mL、200μg/mL、300μg/mL。 临用现配。 2GB/T46804—2025 6 仪器和设备 6.1 高效液相色谱仪:配备蒸发光散射检测器(ELSD)。 6.2 分析天平:精确度0.001g和0.0001g。 6.3 超声波清洗仪:温度范围10℃~80℃。 6.4 涡旋混合器:最高转速不低于500r/min。 6.5 离心机:最高转速不低于10000r/min。 6.6 捣碎机。 7 分析步骤 7.1 试样的制备 7.1.1 固体试样 固体试样主要分为: ———块状试样(压片糖果、方便食品等):取代表试样用捣碎机捣至粉末状,样品袋密封,冷藏备用; ———粉末试样(乳粉、饮料等):取代表试样混匀,样品袋密封,冷藏备用; ———凝胶糖果:取代表性样品,于-20℃冰箱冷冻至坚硬后用捣碎机捣碎,样品袋密封,冷藏备用; ———软胶囊型凝胶糖果:取代表性样品,去除外软胶囊,内容物混匀,样品袋密封,冷藏备用。 7.1.2 液体试样 取代表性液体试样混匀,样品袋密封,冷藏备用。 7.2 试样的提取 7.2.1 饮料、压片糖果、软胶囊型凝胶糖果、方便食品等 称取0.1g~1.0g试样(精确至0.001g)于50mL离心管中,加入10mL三氯甲烷-甲醇溶液 (5.2.1),用涡旋混合器涡旋分散试样,用超声波清洗仪室温超声10min,于10000r/min离心2min,上 清液过0.22μm有机相滤膜,滤液待上机测定。 7.2.2 凝胶糖果 取1.0g试样(精确至0.001g)于50mL离心管中,加入10mL磷酸盐缓冲溶液(5.2.9),用涡旋混 合器涡旋振荡分散试样,加入10mL三氯甲烷-甲醇溶液(5.2.1)涡旋2min,用超声波清洗仪室温超声 10min,10000r/min离心2min,若离心后三氯甲烷层出现乳化,三氯甲烷层转移至另一干净离心管 中,加入10mL饱和氯化钠溶液(5.2.7),涡旋2min,于10000r/min离心2min,取下层的三氯甲烷层 过0.22μm有机相滤膜,滤液待上机测定。 7.2.3 乳制品 称取1.0g试样(精确至0.001g)于50mL离心管中,加入2mL水,用涡旋混合器涡旋分散试样,加入 9mL甲醇(5.1.1),涡旋混匀1min,加入10mL三氯甲烷(5.1.3),涡旋混匀1min,于10000r/min离心 2min,上清液转移至另一50mL离心管,加入10mL饱和氯化钠溶液(5.2.7),涡旋2min,于10000r/min 离心2min,去除上层水相,保留下