ICS 11. 100 YY C 44 中华人民共和国医药行业标准 YY/T0688.1—2008 临床实验室检测和体外诊断系统 感染病原体敏感性试验与抗菌剂敏感性 试验设备的性能评价第1部分：抗菌剂 对感染性疾病相关的快速生长需氧菌的 体外活性检测的参考方法 Clinical laboratory testing and in vitro diagnostic test systems- Susceptibility testing of infectious agents and evaluation of performance of antimicrobial susceptibility devices- Part 1:Reference method for testing the in vitro activity of antimicrobial agents against rapidly growing aerobic bacteria involved in infectious diseases (ISO 20776-1:2006,MOD) 2008-10-17发布 2010-01-01实施 国家食品药品监督管理局 发布 YY/T 0688.1—2008 目 次 前言 引言 1范围 2 术语及定义 3试验程序 3.1概述 3.2培养基 3.3 抗菌剂 3.4 接种菌液的制备 3.5 微量稀释盘的接种. 10 3.6微量稀释盘的孵育 10 3.7结果的判读· 10 3.8MIC结果可能不能反映抗菌剂真实活性的特殊情况及其处理 11 4质量控制 12 附录A（规范性附录）对于Mueller-Hinton肉汤的要求 18 参考文献 20 YY/T.0688.1—2008 前言 YY/T0688的本部分修改采用ISO20776-1:2006《临床实验室检测和体外诊断系统感染病原体 氧菌的体外活性检测的参考方法》。 本部分与ISO20776-1：2006，差异如下： a）在引言添加“注：已知对某抗菌剂固有耐药的细菌不做敏感性试验”的说明。 b）将原文中的"non-selectivenutritiveagarmedium”译成"非选择性琼脂培养基”（在临床检验实 际工作中，非选择性培养基与营养琼脂是两种截然不同的培养基，而试验菌株从储存培养物 到工作培养物的所有传代培养用固体培养基均建议使用前者。如此翻译是为了避免与营养 琼脂相混淆）。 c) 将“4质量控制..质控菌株的工作培养物可通过储存菌株在非选择性琼脂培养基上再培养 获得。...”中的“再培养”改为“连续传代培养两次”，“储存菌株”改为“参考菌株的储存培养 物”（结合临床检验工作的实际，并严格遵守CLSI在M7-A6中对菌株储存培养物连续传代培 养次数的规定)。 d）将"4质量控制.进一步的传代培养只能用第次工作培养物不能超过一周)进行。..” 改为"4质量控制..工作培养物只能再传代一次，且使用时间不能超过一周。....”（结合 临床检验工作的实际，并严格遵守CLSI在M7-A6中对菌株工作培养物的使用时间及传代培 养次数的规定）。 为便于使用，本标准相对于国际标准原文还做了下列编辑性修改： a）将“本国际标准”一词改为“本部分”； b）用小数点“”代替作为小数点的逗号“，”； 删除国际标准原文中的前言。 本部分的附录A为规范性附录。 本部分由国家食品药品监督管理局提出。 本部分由全国医用临床检验实验室和体外诊断系统标准化技术委员会(SAC/TC136)归口。 本部分主要起草单位：北京市医疗器械检验所、南京医科大学附属第一医院。 本部分主要起草人：童明庆、王辉。 YY/T0688.1-2008 引言 抗菌剂体外敏感性试验通常是针对于可能导致疾病的微生物，尤其是那些被认为对频繁使用的抗 菌剂皇现耐药性的微生物种属"。除此之外，该试验在细菌耐药性监测及其流行病学研究以及新抗菌 剂与现有抗菌剂之间的比较等方面也很重要。 稀释法常被用来测定抗菌剂的最小抑菌浓度（MICs，minimuminhibitoryconcentrations），是抗菌 剂敏感性试验的参考方法。MIC法通常用于细菌耐药性监测、新抗菌剂与现有抗菌剂之间的比较，该 法也用于常规方法所得结果不可靠或临床需要定量结果的微生物的敏感性试验。对于稀释法测试，某 抗菌剂对于特定微生物的MIC值是通过观察微生物分别在含有系列稀释浓度的该抗菌剂的一系列琼 脂平板（琼脂稀释法）上或肉汤（肉汤稀释法）中的可见的生长能力来确定的， 抗菌剂的最小抑菌浓度（MIC值)是指在规定的体外条件下，规定的孵育时间内，能抑制某特定微 生物出现肉眼可见生长的抗菌剂的最低浓度（以mg/L为单位）。MIC值有助于临床医师了解微生物 对抗菌剂的敏感性从而帮助他们制定合理的用药方案。由于所用方法可能显著地影响试验结果，为了 确保室内试验结果的可重复性和室间试验结果的可比性，实验室需要进行严格的质量控制及试验程序 的标准化。通常情况下，对于给定的抗菌剂和试验菌株，肉汤稀释法的检测结果（MIC值）在MIC实际 值士1个倍比稀释度的范围内是可以被接受的。 肉汤稀释法：是一种向一系列相同体积的含抗菌剂的肉汤培养基（其中所含某抗菌剂的浓度通常是 以几何级数递增的)中接种已知固定量某微生物以确定该微生物对该抗菌剂的MIC值的方法。 肉汤微量稀释法：顾名思义，就是在微量稀释盘中进行肉汤稀释试验。 本标准所描述的方法仅适用于需氧菌的纯培养物，这些细菌在Mueller-Hinton琼脂平板和Muel- ler-Hinton肉汤（可能需要加人添加剂）中经过夜孵育均易于生长。本标准所描述的肉汤稀释法本质上 感性试验委员会（EUCAST)[6所发布的肉汤微量稀释法是同一种方法，所有这些方法都是在 Ericsson和Sherrist7所描述方法的基础上发展而来的。 1）已知对某抗菌剂固有耐药的细菌不做敏感性试验。 IV ..-YY/T.0688.1—2008 临床实验室检测和体外诊断系统 感染病原体敏感性试验与抗菌剂敏感性 试验设备的性能评价第1部分：抗菌剂 对感染性疾病相关的快速生长需氧菌的 体外活性检测的参考方法 1范围 YY/T0688的本部分介绍了测定抗菌剂MIC值的种参考方法-—肉汤微量稀释法。MIC值仅 反映抗菌剂在规定的体外试验条件下的抗菌活性。医生在制定用药方案时，不但要参考MIC结果，还 应考虑诸如药物在人体内的药代/药效学参数以及细菌对抗菌剂的耐药机制等其他因素。对于某种抗 菌剂，根据体外敏感性试验结果（MIC值)可将相应受试菌划分为敏感（S)”、“中介（I)”和“耐药（R)”。 另外，MIC值可用于确定该受试菌株是野生型还是非野生型。尽管解释MIC值的临床意义已超出了 本部分的范畴，但为了适应临床需要，根据不同抗菌剂-细菌组合对方法的基本内容进行调整是必要的。 这些调整体现在下列各表格中。为了确保试验结果的可比性与可靠性，其他药敏试验方法（如常规方法 或抗菌剂敏感性试验设备)应该和本参考方法进行比对以确定其准确性。 2术语及定义 下列术语和定义适用于YY/T0688的本部分。 2. 1 抗菌剂antimicrobialagent -类可以抑制或杀死微生物，可能用于抗感染治疗的生物来源的、合成的或半合成的物质的总称。 注：消毒剂、灭菌剂和防剂不在此定义范围内。 2.2 抗菌剂属性propertiesof antimicrobialagents 2.2.1 效价potency 受试物中有效抗菌活性成分所占比例，是受试物通过生物学方法所测值与相同质量或体积的参考 品通过相同方法测得值的比率。 质的量浓度(mol/L)。 2.2.2 浓度 concentration 抗菌剂在规定体积溶液中的量。 注1：常用毫克/升(mg/L)来表示。 注2：虽然mg/L=μg/mL，但不推荐使用μg/mL作为单位。 2.3 原液 stocksolutions 用于进一步稀释的初始浓度溶液。 1 YY/T0688.1—2008 2. 4 最小抑菌浓度minimuminhibitoryconcentrationMIC 在规定的体外试验条件下，在规定的孵育时间内，能抑制细菌出现肉眼可见生长的最低浓度。 注：常用mg/L表示。 2.5 折点breakpointsBP 用以界定受试细菌对某抗菌剂是敏感、中介或耐药的特定的MIC值。 注：关于折点的最新解释，可参考应用本参考方法的机构的最新出版物。 2.5.1 敏感susceptibleS 受试菌株的生长可被某浓度抗菌剂抑制预示着该抗菌剂的临床推荐剂量能够获得理想的疗效。 注1：菌株是在规定的表型测试系统中基于合理的折点被判定为敏感的。 注2：折点应根据测试环境的改变(诸如药物常规剂量的改变、新的耐药机制的出现等)做相应调整。 2.5.2 中介intermediateI 受试菌株的生长可被某浓度抗菌剂抑制，但无法确定该抗菌剂临床推荐剂量的准确疗效。 注1：菌株是在规定的表型测试系统中基于合理的折点被判定为中介的。 注2：“中介”意味着由受试菌株导致的感染可通过该抗菌剂在患处的生理富集或使用更高剂量的该抗菌剂来获得 妥善的治疗。 注3：该级别还提供了一个“缓冲区”，从而避免了小的、不可控的技术因素所导致的重大的结果解释偏差。 注4：折点应根据测试环境的改变（诸如药物常规剂量的改变、新的耐药机制的出现等）做相应调整。 2.5.3 耐药resistanceR 受试菌株的生长可被某浓度抗菌剂抑制预示着该抗菌剂的临床推荐剂量不能获得理想的疗效。 注1：菌株是在