ICS 11.100 YY C 44 中华人民共和国医药行业标准 YY/T0575—2005 硫乙醇酸盐流体培养基 Fluid thioglycollate medium 2006-12-01实施 2005-12-07发布 发布 国家食品药品监督管理局 数码防伪 YY/T0575—2005 前言 本标准全部技术条款为强制性。 本标准是在参考《中华人民共和国药典》（2005年版）基础上，结合中国国情及实际情况和要求而 制定。 本标准附录A为规范性附录。 本标准由国家食品药品监督管理局提出。 本标准由中国药品生物制品检定所归口。 本标准由中国药品生物制品检定所负责起草。 本标准主要起草人：高尚先、孙彬裕、曲守方、康国华、刘艳 I YY/T0575—2005 硫乙醇酸盐流体培养基 1范围 本标准规定了硫乙醇酸盐流体培养基的质量要求、检验方法、使用说明、标志、标签以及包装、运输、 贮存。 本标准适用于需氧菌、厌氧菌培养的硫乙醇酸盐流体培养基。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T191包装储运图示标志 中华人民共和国药典（2005年版） JF1070--2000定量包装商品净含量计量检验规则 3术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3. 1 培养基culturemedium 由人工方法配合而成的，专供微生物培养、分离、鉴别、研究和保存使用的混合营养物制品。 3. 2 菌落形成单位colonyformingunit，cfu 菌落形成单位是指在活菌培养计数时，由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁 殖所形成的集落，以其表达活菌的数量。 4培养基配方 单位为：g/L。 胰酪蛋白陈 15.0 g 酵母浸出粉 5.0 g 5.0 g 葡萄糖 氯化钠 2.5 g L-胱氨酸（或半胱氨酸盐酸盐） 0.5 g 硫乙醇酸钠 0.5 g 琼脂 0.65g~0.75g 刃天青（Resazurin) 0.001 g 5质量要求 5.1理化要求 5.1.1外观 应为均一的类白色至浅黄色粉末。 YY/T0575—2005 5.1.2澄清度 溶化后溶液应澄清。 5.1.3装量 应不低于标示量。 5.1.4氧化层形成能力 氧化层形成能力应符合下列规定： a）灭菌后冷至室温，培养基上层应出现氧化层（粉红色）； b）氧化层高度不应超过培养基深度的1/5。 5.1.5pH值 灭菌后，20℃～25℃时，该培养基pH值应为7.1士0.2。 5.1.6干燥失重 应不超过5.0%。 5.2灵敏度检查 空白对照管应无菌生长，加小于100cfu菌的培养基管应生长良好。 6检验方法 6.1理化检验 6.1.1外观 采用目测法：在自然光线明亮处目视，应符合5.1.1的规定。 6.1.2澄清度 用新鲜蒸馏水按使用说明配制培养基，采用目测法：在自然光线明亮处目视，应符合5.1.2的规定。 6.1.3装量 按JJF1070一2000，使用通用量具，测定装量，应符合5.1.2的规定。 6.1.4氧化层形成能力 按使用说明配制培养基，灭菌后冷至室温。在自然光线明亮处目视检查氧化层的形成情况，应符合 5.1.4a）的规定。用通用量具测量，计算氧化层的比例，应符合5.1.4b)的规定。 6.1.5pH值 按使用说明配制培养基，取新鲜配制的液体培养基，灭菌后，在20℃～25℃时，按《中华人民共和国 药典》（2005年版）pH值测定法测定，应符合5.1.5的规定。 6.1.6干燥失重 按《中华人民共和国药典》（2005年版）干燥失重测定法，在60℃时压力2.67kPa（20mmHg）以下 干燥至恒重，应符合5.1.5的规定。 6.2灵敏度检查 按《中华人民共和国药典》（2005年版）二部附录XH无菌检查法中灵敏度检查方法进行（参见附 录A)，结果应符合5.2的规定。 使用说明 使用说明至少应当具有下列内容： a）产品名称、规格； b）配方； 用途； d）使用方法； e) 注意事项； 2 YY/T0575—2005 f）贮存条件与失效期； 生产单位名称、联系方式。 g) 标志与标签 标志与标签至少应当具有下列内容： 执行标准号； a) b) 产品注册证号； c): 产品名称、规格、数量、批号； d) 制造厂名称、商标和厂址； e) 贮存条件和失效期。 包装、运输、贮存 9 9.1包装 包装储运图示标志应符合GB/T191的规定。包装容器应保证密封性良好，不易破碎。 9.2运输 培养基在运输过程中，应防潮，应防止重物堆压，避免阳光直射和雨雪浸淋，防止与酸碱物质接触， 防止内外包装破损。 9.3贮存 产品应置阴凉干燥处贮存。 3 YY/T0575—2005 附录A （规范性附录） 硫乙醇酸盐流体培养基灵敏度检查方法 A.1菌种 培养基灵敏度检查所用的菌株传代次数不得超过5代（从菌种保存中心获得的冷冻干燥菌种为第 0代），并采用适宜的菌种保藏技术，以保证试验菌株的生物学特性。 金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaureus)[CMCC(B）26003] 铜绿假单胞菌（Pseudomonasaeruginosa)[CMCC(B）10104] 枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis)[CMCC(B）63501] 生孢梭菌（Clostridiumsporogenes)[CMCC(B）64941] A.2方法 A.2.1 无菌操作要求 培养基灵敏度试验应严格遵守无菌操作，防止微生物污染。 稀释液、培养基、实验器具等灭菌时，应照中华人民共和国药典（2005年版)灭菌法的要求，采用验 证合格的灭菌程序灭菌。 A.2.2菌液制备 接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至营养肉汤或营养琼脂培养基 中，接种生孢梭菌的新鲜培养物至硫乙醇酸盐流体培养基中，30℃～35℃培养18h～24h后。上述培 养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1mL含菌数小于100cfu的菌悬液。 A.2.3培养基接种 取每管装量为12mL的硫乙醇酸盐流体培养基9支，分别接种小于100cfu的金黄色葡萄球菌、铜 绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌各2支，另1支不接种作为空白对照，培养3d。逐日观察结果。 4 YY/T0575—2005 参考文献 [1JGB9969.1—1998 ：工业产品使用说明书 总则 [2]陈天寿主编.微生物培养基的制造与应用.北京.中国农业出版社.1995年6月 ［[3］USP/NF（ASIANEDITION)2004［美国药典（2004年版）］促生长试验 5